Addgene---2016年最火的慢病毒质粒和腺病毒质粒
2016年七月，Addgene推出了病毒服务，开始为世界各地的科学家提供可立即使用的慢病毒和腺相关病毒（AAV）。最初只有几种有限的产品可以在美国供给，但到了2016年底，Addgene扩大其病毒库存至：25种慢病毒和25种腺病毒。这些病毒被包装成200多个包裹，然后分发到全球20多个国家。在初步的成功后，Addgene将继续提供和扩大这种多样化且有用的工具组合，使世界各地的研究人员可以加快他们的工作。
那么，你是否好奇：到目前为止，全球研究人员发现最有用的是哪种病毒质粒？为此，Addgene对现有的病毒服务进行了数据统计，并找到了2016年最火的慢病毒质粒和腺相关病毒质粒。
TOP慢病毒质粒:
lentiCas9-Blast
Tips
Addgene大部分病毒库存是基于CRISPR工具，虽然我们提供一些非CRISPR相关的包装后病毒。Cas9是大多数CRISPR应用的头条新闻，并且可以在你选择的细胞系转然这种病毒后进行表达。而各种已设计完成的Cas9突变体可以完成独特的编辑任务，如lenticas9-Blast表达的经典Cas9核酸酶，可以介导DNA双链断裂。
Lenticas9-Blast（https://www.addgene.org/52962/）是一个Cas9表达载体，是由Broad Institute 的张锋实验室发表的（Sanjana et al.，2014）。它是一个二元载体系统，即通常需要与一个传递gRNA的第二载体结合使用，例如：lentiGuide-Puro。而单载体系统通常在同一个质粒中表达Cas9和gRNA。lenticas9-Blast病毒可以用来产生Cas9的表达细胞系，可用于筛选（using pooled CRISPR knockout libraries）和个别基因的敲除（using gRNA lentiviruses）。
Cas9的表达有典型的细胞毒性，所以，在得到高滴度的Cas9慢病毒时会遇到困难。当利用lenticas9-Blast产生 Cas9表达细胞时，这种细胞毒性也会导致生长率的变化。为了确保这种生长率的影响不混淆你的实验数据，Addgene建议在进行筛选甚至单基因敲除之前，产生单克隆Cas9表达细胞系。
Top AAV: pAAV-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-mCherry
Addgene目前的AAV库存几乎完全来自于北卡罗来纳州大学的Bryan Roth实验室中表达DREADD（Designer Receptors Exclusively Activated by Designer Drugs）的病毒。这些可以用来研究在特定的细胞类型（典型的神经元）中激活特定的信号通路的影响。而这类病毒几乎都很受欢迎，PAAV-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-mCherry（https://www.addgene.org/44362/）包含一个融合了mCherry的双floxed人毒蕈碱受体4（Gαi耦合）DREADD，其受人突触蛋白启动子的控制。
当第一次使用这种病毒时，Roth实验室建议使用前先进行Cre重组酶表达的验证。当对固定组织中的hM4D(Gi)-mCherry进行可视化时，实验室还建议使用抗mCherry的抗体而不是内源性的mCherry荧光。
关于本文的更多详细内容，可在Addgene网站上http://blog.addgene.org/top-requested-lentiviruses-and-aav-of-2016查询。