EGFR基因突变检测的临床应用

72, 现代检验医学杂志 第28卷 第3期 2013年5月 JM o cL a bM e c V o l . 28, N o . 3, M a . 2013y

]患者肺动脉压之间的相关性分析[临床医学工J .

, () , 程, [1**********]0-1711.

Xu C M , C h e n L X , @i a n WX . C o r r e l a t i o nb e t w e e n N T -r o B N Pa n c p u l m o n a r r t e r i a l r e s s u r e o fA E -p y a p

, C O P D p a t i e n t s [J ]. C l i n i c a l M e c i c a l E n i n e e r i n g g

, () , [1**********]0-1711.

[], r a t i o n 16 I s h i i J N o m u r aM , I t oM , e t a l . P l a s m a c o n c e n t

o fb r a i nn a t r i u r e t i c p e t i c e a s ab i o c h e m i c a lm a r k e r p f o r t h ee v a l u a t i o no f r i h tv e n t r i c u l a ro v e r l o a ca n c g m o r t a l i t n c h r o n i c r e s i r a t o r i s e a s e [J ]. C l i n y i p y c

, , (/) , C h i m A c t a [1**********]-30.

[], 17 Ru t t e nF ~, C r a m e rM J Z u i t h o f fN P , e t a l . C o m a r i -p

en a t r i u r e t i c p e t i c ea s s a s f o r i c e n t i f -s o no fB -t p y y p

i n e a r tf a i l u r ei ns t a b l ee l c e r l a t i e n t s w i t ha y g h yp

e p u l m o n a r c l i n i c a lc i a n o s i so fc h r o n i co b s t r u c t i v y g

[], , (/) , c i s e a s e J . E u r J~e a r t F a i l 2007967651-659.

[]18 Se t h iS . E t i o l o n c m a n a e m e n to f i n f e c t i o n si n g y a g

[]r u c t i v e p u l m o n a r i s e a s e J . M e cP r o c h r o n i c o b s t y c g

, () , S E A , 201128311-14.

[]19 Vi n o l aAM , C h a n e z P , C h i a a r aG , e t a l . T r a n s f o r -g p p

m i n r o w t h f a c t o r -b e t a e x r e s s i o n i nm u c o s a l b i o -g g p p

[]s i e s i na s t h m aa n cc h r o n i cb r o n c h i t i s J . A mJR e -, , () , s i rC r i t C a r eM e c 19971562P t 1591-599. p

[, 20] DeB o e r W I V a nS c h a c e w i k A , S o n eJ K , e ta l .

T r a n s f o r m i n r o w t hf a c t o rb e t a 1a n cr e c r u i t m e n t gg o fm a c r o h a e s a n cm a s t c e l l s i na i r w a s i n c h r o n i c p g y

[]o b s t r u c t i v e p u l m o n a r i s e a s e J . A mJR e s i rC r i t y c p

, , () , C a r eM e c [1**********]1-1957.

[]/a s kF o r c e . S t a n c -21 Ce l l i B R , M a c N e e W , A T S E R ST

a r c s f o r t h e c i a n o s i s a n c t r e a t m e n t o f a t i e n t sw i t h g p

/C O P D , as u m m a r f t h e A T S E R S p o s i t i o n p a e r y o p

, () , [], 4236932-946. J . E u rR e s i r J 200p

[]22 S t o l zD , B r e i c t h a r c tT , C h r i s t -C r a i n M , e t a l . U s eo f

f B -t e n a t r i u r e t i c p e t i c e i n t h e r i s k s t r a t i f i c a t i o n o y p p

], , a c u t ee x a c e r b a t i o n so fC O P D [J . C h e s t 2008133

() , 51088-1094.

收槁日期 2012-10-29 修回日期 2013-04-21

E G F R 基因突变检测的临床应用

+

卢仁泉Ä (周瑞芳Â9江苏泰州 1. 江苏省泰州职业技术学院医学技术学院, 225300

) 上海 2. 复旦大学附属肿瘤医院检验科, 200032

9摘 要 表皮生长因子受体(是一种跨膜受体酪氨酸激酶9在许多肿瘤中过表达或e i c e r m a l r o w t h f a c t o r r e c e t o r E G F R ) p g p 发生突变9通过信号转导对癌细胞增殖\凋亡和血管生成具有重要./9已成为抗肿瘤药物的重要靶点之一D 近年来9尤其是肺癌患者中开展该基因突变的检测已逐渐受到重视D 掌握E G F R 基因突变检测的,-./9E G F R 基因突变检测常用方法以及E 可为其今后在,-中的广泛应用提供更广的前景D G F R 基因突变检测常用的样本及其处理9

关键词 表皮生长因子受体 突变 检测 肺癌 临床应用

() 中图分类号 @754 文献标志码 A 文章编号 1671-7414201303-072-03, / 10. 3969. . 1671 7414. 2013. 03. 022

C l c a lA l c a fD e e c G F R m u a p p g E

(1.

ÂÄ

Z ~O U R u i -f a n L U R e n -u a n g , C

2253002.

200032, ) A b r a c E G F R (e i c e r m a l r o w t h f a c t o r r e c e t o r i s a t r a n s m e m b r a n e t r o s i n ek i n a s e r e c e t o r . M u t a t i o n s t h a t l e a c t oE G -p g p y p F Ro v e r e x r e s s i o no r o v e r a c t i v i t a v e b e e n a s s o c i a t e cw i t h a n u m b e r o f c a n c e r s . M u t a t i o n s o fE G F Rc o u l c l e a c t o i t s c o n -p y h

, , , s a n i m o r t a n t r o l e i n t h e p r o l i f e r a t i o n a o t o s i s a n ca n i o e n e s i so f c a n c e r o u s c e l l s . R e c e n t l s t a n t a c t i v a t i o n w h i c h p l a y p p p g g y n a n c e r i s p a i ce n o u ha t t e n t i o n . M a s t e r i n h e t e s tm e t h o c sa n cc o m m o ns a m l e t h e c e t e c t i o no fE G F R m u t a t i o n s i n l u g c g g t p s c l i n i c a l a l i c a t i o n . r e t r e a t m e n t c o u l c p r o v i c e v a l u a b l e i n s i h t s i n t o i t p p p g

, K e w r e i c e r m a l r o w t h f a c t o r r e c e t o r m u t a t i o n s c e t e c t i o n l u n a n c e r c l i n i c a l a l i c a t i o n p g p g c p p y , 表皮生长因子受体(e i c e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e t o r p p 是原癌基因c 具有酪氨酸激酶活-e r b -1表达的产物, E G F R )

, 性, 能调控细胞的生长和增殖 在许多肿瘤中过表达或发

样本及其处理, 可为其今后在临床中的广泛应用提供更广的前景

1 表皮生长因子受体的分子结构 表皮生长因子受体是

一种跨膜受体酪氨酸激酶, 含细胞外区 疏水跨膜区和细胞内区3个区域, 其由E G F R 基因编码

其中外显子1色体, 由25编码单一的跨6个外显子组成Á,

生突变, 通过信号转导对癌细胞增殖 凋亡和血管生成具有重要意义, 已成为抗肿瘤药物的重要靶点之一

膜序列以及这一序列两边的少量氨基酸残基, 几乎所有酪氨酸激酶区E G F R 的胞外区都是由外显子2~14编码,

, 周瑞芳(女, 复旦大学医学硕士学位, 研究方向, 肿瘤及血液科疾病的发病机制及临床护理新 施的探讨

万方数据

, , 现代检验医学杂志 第28卷 第3期 2013年5月 JM o cL a bM e c V o l . 28N o . 3, M a . 2013y 73

由外显子16~22编码, C 端自磷酸化部位由外显子23~26编码最常见的异源二聚体化类型是~e r -2

) , 该二聚体化改变了受体的构象, 导致受体胞内结构的特定酪氨酸残基自身磷酸化,

激活其下游信号途径, 进而对癌细胞增殖 凋亡和血管生成具有重要意义

要出现在E G F R 酪氨酸激酶编码区, 集中在18~21外显子, 占突变类型的90%以上,

多为框内缺失性突变或替代突变

Å

病理背景相关

男性(10%) 女性(38%) 非吸烟者(47%) 吸烟者(7%)

腺癌(30%) 非腺癌(2%)

等临床 病理背景密切相关

与E G F R 基因突变独立相关的是组织类型和吸烟状况

女性肺癌几乎都是非吸烟者腺癌

小细胞癌

!

(尤其是与腺癌的复合型) 等病例中也经

常检出E G F R 基因突变

另外, E G F R 作为癌症治疗的分子靶标受到普遍关注,

已陆续开发出了E G F R 酪氨酸激酶抑制剂(E G F R -T K I ) 和抗E G F R 抗体等, 如日本率先批准的E G F R -T K I 制剂之一的吉非替尼(G e f i t i n i b ) 已广泛应用于临床

替尼的]期临床试验(I P A S S

) 的结果 "

, N E J G S G 002) #Å

研究显示, E G F R 基因突变也可以作为最重要的疗效

预测因子

Á

人将日本国立癌症中心内接受治疗的肺癌患者分为1999~2001年和2002~2004年两组, 做了吉非替尼上市前后的回顾性分析

3 EG F R 基因突变检测常用方法 目前有很多E G F R 基因突变检测的方法, 包括直接测序法 突变扩增阻滞系统(a m p l i f i c a t i o n r e f r a c t o r y m u t a t i o n s y s t e m , A R M S ) 片段长度分析 变性高效液相色谱技术和焦磷酸法(P y r o s e C u e n c -i n g

) 等

它可以检测万方数据

英格兰杂志报道用A R M S 法检测E G F R 突变

, 该法检测灵敏度比直接测序法有所提高, 可检测样品中少至1%

~0. 1%的突变基因, 且该方法在设计上最大限度地缩短目标产物的长度, 可以避免石蜡包埋组织标本提取的D N A 大部分片段化而无法得到准确检测结果的难点, 但是只能检测已知突变

来自不同组织样本或细胞学样本均有可能发生基因突变

, 而手术中获得的较大标本固定8~18h

定石蜡包埋的组织切片来抽提D N A

检测对象的样本不同, 其肿瘤细胞的确认方法和含量也不同, 因此需要特别注意, 区别对待

4. 1 肿瘤部位新鲜冷冻材料 肿瘤部位新鲜冷冻材料可

提取出最高品质的D N A , R N A

4. 2 活检组织的石蜡切片 制作5片切片,

其中1片进行~E 染色, 并确认肿瘤细胞的存在

在制作标本时多制作一些未染色标本(空自对照) 也很有用

活检材料的固定时间一般是一昼夜

74, 现代检验医学杂志 第28卷 第3期 2013年5月 JM o dL a 5M e d V o l . 28, N o . 3, M a . 2013y

4. 4 细胞学样本 细胞学样本包括支气管灌洗液 胸腔积液 心包液 经支气管刷检细胞和痰液等

相应的检测技术仍需优化, 因此暂不建议用此类样本的检测结果来指导临床用药

建议使用高灵敏度的方法(如A R M S 法) , 且对阴性结果需额外谨ó地解释

如果有方法可稳定可靠地进行检测, 则血液会成为理想的检测对象

变

$

, 但技术尚不成熟, 假阴性率仍然较高, 且需要使用A R M S 法等灵敏度非常高的检测方法

2008年发表了利用上皮特异性抗体包被的微柱捕捉

循环血中的癌细胞, 并进行E G F R 基因分析的报告

"

根据肿瘤患者的实际情况正确采集样本并选择恰当的方法进行E G F R 突变的检测不仅可以作为是否给予患者E G F R -T K I 治疗的 考, 而且可以作为患者的疗效预测因子, 其在临床中的应用将会越来越广泛

参考文献

[1] 奉水东, 陈敏时, 陈 新, 等. P C R -S S C P 检测肺癌

E G F R 基因突变[J ]. 现代检验医学杂志, 2008, 23

(2) , 13-15.

F e n g S D , C h e nM S , C h e nX , e t a l . S t u c y o

nP C R -S S -C Pc e t e c t i n g E G F R m u t a t i o n si nl u n g c

a n c e r [J ]. J M o cL a bM e c , 2008, 23(2) , 13-15.

[2] Fr a n k l i n WA , V e v eR , ~i r s c hF R , e ta l . E p

i c e r m a l g

r o w t h f a c t o r r e c e p t o r f a m i l y i n l u n g c a n c e r a n c p r e -m a l i g n a n c y [J ]. S e m i nO n c o l , 2002, 29(1s u p p

l 4) , 3-14. [3] Co h e nS . P u r i f i c a t i o no ft h er e c e p

t o rf o re p i c e r m a l g r o w t hf a c t o r f r o m A -431c e l l s , i t s f u n c t i o na sa t -r o s y lk i n a s e [J ]. M e t h o c sE n z y

m o l , 1983(99) , y

379-387. [4] Ko s a k aT , Y a t a b eY , E n c o h~, e t a l . M u t a t i o n s o f t h e

e p i c e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r g e n e i n l u n g c

a n c e r , b i o l o g i c a l a n cc l i n i c a l i m l i c a t i o n s [J ]. C a n c e r R e s , 2004, 64(24) , p

8919-8923.

[5] Ly n c hT J , B e l lD W , S o r c e l l aR , e t a l . A c t i v a t i n g m u -t a t i o n s i n t h e e p i c e r m a l g

r o w t h f a c t o r r e c e p t o r u n c e r -l y i n g r e s p o n s i v e n e s so fn o n -s m a l l -c e l l l u n a n c e r t o g e f i t i n i b [J . N E n g

lJ M e c , 2004, g c

]350(21) , 2129-[2139. 6] M i t s u c o m iT , Y a t a b eY. M u t a t i o n so f t h ee p

i c e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p

t o r g e n e a n cr e l a t e c g e n e s a sc e -t e r m i n a n t so f e p

i c e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r t y r o -s i n ek i n a s e i n h i b i t o r ss e n s i t i v i t y i nl u n a n c e r [J ]. C a n c e r S c i , 2007, 98(12) , g c

1817-1824.

[7] To y

o o k aS , Y a t a b eY , T o k u m o M , e t a l . M u t a t i o n so f e p i c e r m a l g r o w t hf a c t o r r e c e p

t o r a n cK -r a s g e n e s i n a c e n o s C u a m o u s c a r c i n o m a o f t h e l u n g

[J ]. I n t JC a n c -万方数据

e r , 2006, 118(6) , 1588-1590.

[8] Ta t e m a t s u A , S h i m i z uJ , M u r a k a m iY , e t a l . E p

i c e r -m a l g r o w t hf a c t o rr e c e t o r m u t a t i o n si ns m a l lc e l l l u n g c

a n c e r [J ]p

. C l i nC a n c e rR e s , 2008, 14(19) , 6092-6096. [9] M o k T , W u Y L , T h o n r a s s e r tS , e ta l . P h a s eI I I , r a n c o m i z e c , o p e n -l a b e l , g p

f i r s t -l i n e s t u c y o f g e f i t i n i bv s c a t b o p l a t i n /p a c l i t a x e li n c l i n i c a l l y s

e l e c t e c p a t i e n t s w i t ha c v a n c e c n o n -s m a l lc e l ll u n g c

a n c e r (E S M O 2008, L B A 2) [J ]. A n nO n c o l , 2008, 19(s u l 8) , W. [10]p p

M i t s u c o m iT , M o r i t aS , Y a t a b e Y , e ta l . G e f i t i n i b v e r s u s c i s p

l a t i n p l u s c o c e t a x e l i n p a t i e n t sw i t hn o n -s m a l l -c e l l l u n g c a n c e rh a r b o u r i n g m

u t a t i o n so f t h e e p i c e r m a l g r o w t hf a c t o rr e c e p

t o r (W J T O G 3405) , a no p

e nl a b e l , r a n c o m i s e c p h a s e3t r i a l [J ]. L a n c e t O n c o l , 2010, 11(2) , 121-128.

[11] Ma e m o n c oM , I n o u eA , K o b a y

a s h iK , e t a l . G e f i t i n i b o r c h e m o t h e r a p y f o r n o n -s m a l l -c e l l l u n g c

a n c e rw i t h m u t a t e cE G F R [J ]. N E n g l J M e c , 2010, 362(25) , 2380-2388.

[12] Ta k a n oT , F u k u iT , O h eY , e t a l . E G F R m u t a t i o n s

p

r e c i c ts u r v i v a lb e n e f i tf r o m g e f i t i n i bi n p a t i e n t s w i t h a c v a n c e c l u n g a

c e n o c a r c i n o m a , a h i s t o r i c a l c o m p

a r i s o no f p a t i e n t s t r e a t e cb e f o r ea n ca f t e r f i t i n i ba r o v a l i nJ a a n [J ]. JC l i nO n c o l , g 2008, e -26(p p p

34) , 5589-5595.

[13] Ma h e s w a r a nS , S e C u i s tL V , N a g

r a t hS , e t a l . D e t e c -t i o no fm u t a t i o n i nE G F R i n c i r c u l a t i n u n -c a c e l l s [g l g

n c e r J ]. NE n l JM e c , 2008, 359(4) , 366-377. [g

14] Pi r k e rR , ~e r t hF J , K e r rKM , e ta l . C o n s e n s u s f o r

E G F R m u t a t i o n t e s t i n i nn o n -s m a l l c e l l l u n a n c -e r , g

r e s u l t s f r o maE u r o e a nw o r k s h o [J ]g c . JT h o O n c o l , 2010, 5(p p

r a c 10) , 1706-1713.

[15] Ki m u r a~, K a s a h a r aK , K a w a i s h iM , e t a l . D e t e c t i o n

o f e p i c e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o rm u t a t i o n s i n s e -r u ma s a p r e c i c t o r o f t h e r e s p o n s e t o g e f i t i n i b i n p a -t i e n t s w i t h n o n -s m a l l -c e l ll u n a n c e r [J ]. C l i n C a n c e rR e s , 2006, g c

12(13) , 3915-3921.

[16] 郭 野,

秦绪珍, 崔 巍, 等. 中国健康人血清游离表皮生长因子受体外显子18~22序列分析[J ].

现代检验医学杂志, 2009, 24(1

) , 7-10. G u oY , @i nX Z , C u iW , e t a l . G e n e s e C u e n c e a n a l y s i s o fE G F Re x o n 18~22i n f r e eD N A i n s e r u mo f C h i -n e s e h e a l t h y

i n d i v i d u a l [J ]. J M o dL a 5M e d , 2009, 24(1) , 7-10.

[17] 周小购,

李龙芙, 崔 巍, 等. 检测肺癌患者血清游离D N A 的E G F R 基因点突变与E G F R -T K I 疗效的相

关性分析[J ]. 癌症进展, 2011, 9(1) , 13-18.

Z h o uX Y , L i L Y , C u iW , e t a l . C o r r e l a t i o n a n a l y s i s o f s e r u mf r e eD N A E G F R m u t a t i o na n d E G F R -T K I

r e s p o n s e i n l u n g c a n c e r p a t i e n t s [J ]. o n c o l o g y P

r o -r e s s , 2011, 9(1) , 13-18. [18]g

M a h e s w a r a nS , S e C u i s tL V , N a g

r a t hS , e t a l . D e t e c -t i o no fm u t a t i o n s i nE G F R i n c i r c u l a t i n l u n -c a e r c e l l s [J ]. NE n g l JM e d , g g

n c -2008, 359(4) , 366-377. 收槁日期 2013-02-18 修回日期 2013-03-29

EGFR基因突变检测的临床应用

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：

周瑞芳， 卢仁泉， ZHOU Rui-fang， LU Ren-quan

周瑞芳,ZHOU Rui-fang(江苏省泰州职业技术学院医学技术学院,江苏泰州,225300)， 卢仁泉,LU Ren-quan(复旦大学附属肿瘤医院检验科,上海,200032)现代检验医学杂志

JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE2013,28(3)

参考文献(18条)

1. 奉水东;陈敏时;陈新 PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变[期刊论文]-现代检验医学杂志 2008(02)

2. Franklin WA;Veve R;Hirsch FR Epidermal growth factor receptor family in lung cancer and premalignancy 2002(1 suppl 4)3. Cohen S Purification of the receptor for epidermal growth factor from A-431 cells:its function as a tyrosyl kinase1983(99)

4. Kosaka T;Yatabe Y;Endoh H Mutations of the epidermal growth factor receptor gene in lung cancer:biological andclinical implications 2004(24)

5. Lynch TJ;Bell DW;Sordella R Activating mutations in the epidermal growth factor receptor underlying responsiveness ofnon-small-cell lung cancer to gefitinib 2004(21)

6. Mitsudomi T;Yatabe Y Mutations of the epidermal growth factor receptor gene and related genes as determinants ofepidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors sensitivity in lung cancer 2007(12)

7. Toyooka S;Yatabe Y;Tokumo M Mutations of epidermal growth factor receptor and K-ras genes in adenosquamous carcinomaof the lung 2006(06)

8. Tatematsu A;Shimizu J;Murakami Y Epidermal growth factor receptor mutations in small cell lung cancer 2008(19)9. Mok T;Wu YL;Thongprassert S Phase III,randomized,open-label,first-line study of gefitinib vs catboplatin/paclitaxelin clinically selected patients with advanced non-small cell lung cancer(ESMO 2008,LBA2) 2008(suppl 8)

10. Mitsudomi T;Morita S;Yatabe Y Gefitinib versus cisplatin plus docetaxel in patients with non-small-cell lung cancerharbouring mutations of the epidermal growth factor receptor(WJTOG3405):an open label,randomised phase 3 trial2010(02)

11. Maemondo M;Inoue A;Kobayashi K Gefitinib or chemotherapy for non-small-cell lung cancer with mutated EGFR 2010(25)12. Takano T;Fukui T;Ohe Y EGFR mutations predict survival benefit from gefitinib in patients with advanced lungadenocarcinoma:a historical comparison of patients treated before and after gefitinib approval in Japan 2008(34)13. Maheswaran S;Sequist LV;Nagrath S Detection of mutation in EGFR in circulating lung-cancer cells 2008(04)

14. Pirker R;Herth FJ;Kerr KM Consensus for EGFR mutation testing in non-small cell lung cancer:results from a Europeanworkshop 2010(10)

15. Kimura H;Kasahara K;Kawaishi M Detection of epidermal growth factor receptor mutations in serum as a predictor ofthe response to gefitinib in patients with non-small-cell lung cancer 2006(13)

16. 郭野;秦绪珍;崔巍 中国健康人血清游离表皮生长因子受体外显子18~22序列分析[期刊论文]-现代检验医学杂志 2009(01)17. 周小昀;李龙芸;崔巍 检测肺癌患者血清游离DNA的EGFR基因点突变与EGFR-TKI疗效的相关性分析[期刊论文]-癌症进展 2011(01)18. Maheswaran S;Sequist LV;Nagrath S Detection of mutations in EGFR in circulating lung-cancer cells 2008(04)

本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_sxyxjy201303022.aspx