蛋白质化学
蛋白质化学-自测题
（一）名词解释
1． 两性离子
2． 必需氨基酸
3． 等电点
4． 构型
5． 蛋白质的一级结构
6． 构象
7． 蛋白质的二级结构
8．结构域
9．蛋白质的三级结构
10．蛋白质的四级结构
11．超二级结构
12．盐析
13．盐溶
14．蛋白质的变性
15．蛋白质的复性
16．蛋白质的沉淀作用
17．凝胶电泳
18．层析
(二) 填空题
1．蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的_____基和另一氨基酸的_____基连接而形成的。
2．大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为___%，如测得1克样品含氮量为10mg, 则蛋白质含量为____%。
3．在20种氨基酸中，酸性氨基酸有_________和________2种，具有羟基的氨基酸是________和_________，能形成二硫键的氨基酸是__________.
4．蛋白质中的_________、___________和__________3种氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白质在280nm 处有最大吸收值。
5．精氨酸的pI 值为10.76, 将其溶于pH7的缓冲液中，并置于电场中，则精氨酸应向电场的_______方向移动。
6．组成蛋白质的20种氨基酸中，含有咪唑环的氨基酸是________，含硫的氨基酸有_________和___________。
7．蛋白质的二级结构最基本的有两种类型，它们是_____________和______________。
8．α-螺旋结构是由同一肽链的_______和 ________间的___键维持的，螺距为______,每圈螺旋含_______个氨基酸残基，每个氨基酸残基沿轴上升高度为_________。天然蛋白质分子中的α-螺旋大都属于___手螺旋。
9．在蛋白质的α-螺旋结构中，在杂环氨基酸________存在处局部螺旋结构中断。
10．球状蛋白质中有_____侧链的氨基酸残基常位于分子表面而与水结合，而有_______侧链的氨基酸位于分子的内部。
11．氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成______色化合物，而________与茚三酮反应生成黄色化合物。
12．维持蛋白质的一级结构的化学键有_______和_______；维持二级结构靠________键；维持三级结构和四级结构靠_________键，其中包括________、________、________和_________.
13．稳定蛋白质胶体的因素是__________________和______________________。
14．GSH 的中文名称是____________，它的活性基团是__________，它的生化功能是____________________。
15．加入低浓度的中性盐可使蛋白质溶解度________，这种现象称为________，而加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度______并__________,这种现象称为_______,蛋白质的这种性质常用于_____________。
16．用电泳方法分离蛋白质的原理，是在一定的pH 条件下，不同蛋白质的________、_________和___________不同，因而在电场中移动的_______和_______不同，从而使蛋白质得到分离。
17．氨基酸处于等电状态时，主要是以________形式存在，此时它的溶解度________。
18．今有甲、乙、丙三种蛋白质，它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0, 当在pH8.0缓冲液中，它们在电场中电泳的情况为：甲_______，乙_______，丙________。
19．当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以_____离子形式存在，当pH>pI时，氨基酸以_______离子形式存在。
20．谷氨酸的pK1(α-COOH) ＝2.19, pK2 (α-NH+3 ) = 9.67, pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等电点为__________。
21．天然蛋白质中的α—螺旋结构，其主链上所有的羰基氧与亚氨基氢都参与了链内_____键的形成，因此构象相当稳定。
22．将分子量分别为a （90 000）、b （45 000）、c （110 000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，它们被洗脱下来的先后顺序是_____________。
23．一个α-螺旋片段含有180个氨基酸残基，该片段中有_____圈螺旋？该α-螺旋片段的轴长为_____.
24. 常用的蛋白质沉淀法有____________，____________，____________，____________，其中____________和____________法沉淀，可保持蛋白质不变性。
25. 蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种____________键，使天然蛋白质原有的____________与____________性质改变。
26. 按照分子形状分类，蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为____________，蛋白质分子形状的长短轴之比大于10的称为____________。按照组成分分类，分子组成中仅含氨基酸的称____________，分子组成中除了蛋白质部分还有非蛋白质部分的称____________，其中非蛋白质部分称___________。
27. 蛋白质可受_______，______或_______的作用而水解，最后彻底水解为各种________的混合物。
28. 蛋白质在电场中的泳动速度不同是由于各种蛋白质所带____________、____________和____________不同。
(三) 选择题
1．在生理pH 条件下，下列哪种氨基酸带正电荷？
A ．丙氨酸 B．酪氨酸 C．赖氨酸
D．蛋氨酸 E．异亮氨酸
2．下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸？
A ．亮氨酸 B．酪氨酸 C．赖氨酸
D ．蛋氨酸 E．苏氨酸
3．蛋白质的组成成分中，在280nm 处有最大吸收值的是：
A ．酪氨酸 B．半胱氨酸 C．丙氨酸 D．组氨酸
4．下列4种氨基酸中哪个有碱性侧链？
A ．脯氨酸 B．苯丙氨酸 C．异亮氨酸 D．赖氨酸
5．下列哪种氨基酸属于亚氨基酸？
A ．丝氨酸 B．脯氨酸 C．亮氨酸 D．组氨酸
6．下列哪一项不是蛋白质α-螺旋结构的特点？
A ．天然蛋白质多为右手螺旋
B ．肽链平面充分伸展
C ．每隔3.6个氨基酸螺旋上升一圈。
D ．每个氨基酸残基上升高度为0.15nm.
7．下列哪一项不是蛋白质的性质之一？
A ．处于等电状态时溶解度最小 B．加入少量中性盐溶解度增加
C ．变性蛋白质的溶解度增加 D．有紫外吸收特性
8．下列氨基酸中哪一种不具有旋光性？
A ．Leu B．Ala C．Gly D．Ser E．Val
9．在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？
A ．凯氏定氮法 B．双缩脲反应 C．紫外吸收法 D．茚三酮法
10．下列哪种酶作用于由碱性氨基酸的羧基形成的肽键？
A ．糜蛋白酶 B．羧肽酶 C．氨肽酶 D．胰蛋白酶
11．下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的？
A ．蛋白质分子的净电荷为零时的pH 值是它的等电点
B ．大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出
C ．由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点
D ．以上各项均不正确
12．下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是错误的？
A ．氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位
B ．带电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧，面向水相
C ．蛋白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一
D ．蛋白质的空间结构主要靠次级键维持
13．下列哪些因素妨碍蛋白质形成α-螺旋结构？
A ．脯氨酸的存在 B．氨基酸残基的大的支链
C ．碱性氨基酸的相邻存在 D．酸性氨基酸的相邻存在
E ．以上各项都是
14．关于β-折叠片的叙述，下列哪项是错误的？
A ．β-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态
B ．它的结构是借助于链内氢键稳定的
C ．所有的β-折叠片结构都是通过几段肽链平行排列而形成的
D ．氨基酸之间的轴距为0.35nm
15．维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是：
A ．盐键 B．疏水键 C．氢键 D．二硫键
16．维持蛋白质三级结构稳定的因素是：
A ．肽键 B．二硫键 C．离子键 D．氢键 E．次级键
17．凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的是：
A ．分子量大的 B．分子量小的
C ．电荷多的 D．带电荷少的
18. 下列哪项与蛋白质的变性无关？
A. 肽键断裂 B．氢键被破坏
C ．离子键被破坏 D．疏水键被破坏
19．蛋白质空间构象的特征主要取决于下列哪一项？
A ．多肽链中氨基酸的排列顺序 B．次级键
C ．链内及链间的二硫键 D．温度及pH
20．下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的？
A ．胶体性质 B．两性性质
C ．沉淀反应 D．变性性质
E ．双缩脲反应
21．氨基酸在等电点时具有的特点是：
A ．不带正电荷 B．不带负电荷
C ．A 和B D．溶解度最大
E ．在电场中不泳动
22．蛋白质的一级结构是指：
A ．蛋白质氨基酸的种类和数目 B．蛋白质中氨基酸的排列顺序
C ．蛋白质分子中多肽链的折叠和盘绕 D．包括A,B 和C
23．下述关于谷胱甘肽分子的描述哪项是错误的？
A ．谷胱甘肽通过破坏有毒过氧化物对动物细胞起保护作用
B ．谷胱甘肽是一种含有巯基的活性肽
C ．谷胱甘肽分子除含有γ-自由羧基，还含有巯基
D ．谷胱甘肽分子中的“γ”表示谷氨酸和半胱氨酸由前者的γ-自由羧基和半胱氨酸的氨基形成
24．CM-纤维素是一种——
A 羧甲基纤维素 B 阴离子交换剂 C 可用来分离氨基酸 D A和B
25．凝胶过滤——。
A 是借助特殊滤膜进行的旨在除去杂质的高级过滤技术
B 可按分子大小分离蛋白质
C 小分子物质易过滤
D B和C
26．桑格反应——。
A 可用来鉴定多肽链羧基末端氨基酸
B 主要试剂为2，4-二硝基苯酚
C 为羟基化反应
D B和C
27 蛋白质盐析——。
A 是利用蛋白质在低盐溶液中发生沉淀的原理
B 可用于除去蛋白质溶液中的盐成分
C 可对蛋白质进行分级分离
D 可用于蛋白质缓冲液的更换
28 下述方法哪个不能用于蛋白质定量分析——。
A 考马斯亮蓝法
B 紫外分光光度法
C 双缩脲法
D 茚三酮显色法
(四) 是非判断题
( ) 1．氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。
( ) 2．因为羧基碳和亚氨基氮之间的部分双键性质，所以肽键不能自由旋转。
( ) 3．所有的蛋白质都有酶活性。
( ) 4．α-碳和羧基碳之间的键不能自由旋转。
( ) 5．多数氨基酸有D-和L-两种不同构型，而构型的改变涉及共价键的破裂。
( ) 6．所有氨基酸都具有旋光性。
( ) 7．构成蛋白质的20种氨基酸都是必需氨基酸。
( ) 8．蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序在很大程度上决定了它的构象。
( ) 9．一氨基一羧基氨基酸的pI 为中性，因为-COOH 和-NH2 的解离度相同。
( ) 10．蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏，因此涉及肽键的断裂。
( ) 11．蛋白质是生物大分子，但并不都具有四级结构。
( ) 12．血红蛋白和肌红蛋白都是氧的载体，前者是一个典型的变构蛋白，在与氧结合过程中呈现变构效应，而后者却不是。
( ) 13.．用FDNB 法和Edman 降解法测定蛋白质多肽链N-端氨基酸的原理是相同的。
( ) 14．并非所有构成蛋白质的20种氨基酸的α-碳原子上都有一个自由羧基和一个自由氨基。
( ) 15．蛋白质是两性电解质，它的酸碱性质主要取决于肽链上可解离的R 基团。
( ) 16．在具有四级结构的蛋白质分子中，每个具有三级结构的多肽链是一个亚基。
( ) 17．所有的肽和蛋白质都能和硫酸铜的碱性溶液发生双缩脲反应。
( ) 18．一个蛋白质分子中有两个半胱氨酸存在时，它们之间可以形成两个二硫键。
( ) 19．盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离制备。
( ) 20．蛋白质的空间结构就是它的三级结构。
( ) 21．维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。
( )22．具有四级结构的蛋白质，它的每个亚基单独存在时仍能保存蛋白质原有的生物活性。
( )23．变性蛋白质的溶解度降低，是由于中和了蛋白质分子表面的电荷及破 坏了外层的水膜所引起的。
( )24．蛋白质二级结构的稳定性是靠链内氢键维持的，肽链上每个肽键都参与氢键的形成。
（五）问答题
1．什么是蛋白质的一级结构？为什么说蛋白质的一级结构决定其空间结构？
2．什么是蛋白质的空间结构？蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系？
3．蛋白质的α—螺旋结构有何特点？
4．蛋白质的β—折叠结构有何特点？
5．举例说明蛋白质的结构与其功能之间的关系。
6．什么是蛋白质的变性作用和复性作用？蛋白质变性后哪些性质会发生改变？
7．简述蛋白质变性作用的机制。
8．蛋白质有哪些重要功能。
9．下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：CNBr 、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、6mol/L HCl 、β-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一个最适合完成以下各项任务？
（1）测定小肽的氨基酸序列。
（2）鉴定肽的氨基末端残基。
（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性；如有二硫键存在时还需加什么试剂？
（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。
（5）在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。
（6）在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。
10．有一组单亚基蛋白质，具有不同的分子量和等电点。分别为：A （45ku,pI5.4）,B(13ku,pI10.6),C(17ku,pI7.0),D(69ku,pI4.8),E(90ku,pI5.9)。（1）请指出经过SDS-PAGE 后，从凝胶的上样孔到前沿指示剂方向蛋白质的条带顺序，并说明原因；（2）指出经过等电聚集电泳后，从负极到正极方向蛋白质在凝胶上的排列，并说明原因。