手持叶绿素测定仪在测定花生叶绿素含量中的应用
手持叶绿素测定仪在测定花生叶绿素含量中的应用
测定花生的叶绿素含量时, 究竞选取哪个叶位的叶片才有代表性, 以往未见对此有专门的报导。为摸清花生不同叶位叶绿素含量的变化, 特作如下试验, 以便今后在取样过程中选择一个合适的叶位, 提供依据。此外, 提取叶绿素的方法, 按目前资料介绍多用磨碎法, 即用研钵将花生碎叶加少量有机济剂(丙酮) 和少许碳酸钠、石英砂共同磨研、过滤、洗涤、定容。但磨碎法费工太多, 尤其测定的样木较多时, 操作上稍不注意, 容易产生误差, 且丙酮价格较贵, 成本较高。近年有用乙醇作溶剂(分两次) 浸提的, 操作简便, 且95肠乙醉较易取得。但浸提法比磨碎法对同一花生鲜叶所提取的叶绿素的量究竟有无差异, 有必要进一步试验, 以便校正我们所取得的数据。
作花生不同叶位叶绿素含量测定时, 每次在大田随机取8一10个植株, 逐株从主茎已开展的顶叶(第一叶) 开始, 依次向下剪至第4一5片叶, 每一植株作为一个样本, 每个叶位的叶片作为一个处理. 剪碎叶片时, 注意避开主脉, 每次称取鲜样0.5克, 最后用25毫升容量瓶(或具塞比色管) 定容。提取液用72型或721型分光光度计进行比色。利用叶绿素a 、b 在652nm 处有相同的比吸收系数, 并在此波长下测定其光密度计算叶绿素总量, 或利用它们二者在663nm 及645nm 波长的两个吸收高峰, 测定其光密度, 分别计算叶绿素a 或b 含量及总量。
托普云农手持叶绿素测定仪的测定结果发现，花生由于有根瘤菌固氮作用, 提供氮素, 特别在盛花后, 固氮作用旺盛。因而在结荚中后期(19叶) 顶下第5叶如保护得好, 仍能保持它较高的叶绿素含量, 这对促进花生的光合作用以及结英发育是有利的。但考虑到南方花生锈病为害严重, 尤以春植花生为然, 发病后蔓延较快, 下部叶易先枯死或布满抱子堆, 如固定取第五叶,
往往后期不易取得完整、理想的叶样。故还是固定顶下第三叶为取样叶为宜。
手持叶绿素测定仪可以即时测量植物的叶绿素相对含量（单位SPAD ）或绿色程度、叶面温度，从而解植物真实的硝基需求量并且了解土壤硝基的缺乏程度或是否过多地施加了氮肥。可以通过便携式叶绿素仪来增加氮肥的利用率，并可保护环境。便携式叶绿素测定仪广泛应用于农林相关科研单位和高校对植物生理指标的研究和农业生产的指导。
托普云农手持叶绿素测定仪/便携式叶绿素仪可以即时测量植物的叶绿素相对含量或绿色程度、叶面温度，从而了解植物真实的硝基需求量并且了解土壤硝基的缺乏程度或是否过多地施加了氮肥。
根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A 与其中溶质浓度C 和液层厚度L 成正比，即A=αCL 式中：α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm 时，α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a 、b 和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A ，并根据叶绿素a 、b 及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a 、b 时为了排除类
胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。