浅谈血液保存技术

浅谈血液保存技术

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（绵阳师范学院 生科学院 08级2班）

摘要：探讨几种常见的血液保存方法，以及相互间的比较，特别是有关Rh 阴性血的的保存技术；分析血液保存对原血液有关理化因子的影响；研究有关血液保存的展望。

关键字：血液，保存，理化因子。

Abstract: this paper studies several common blood preservation method, and the comparison between each other, especially about Rh blood preservation technology negatie, Analysis of the original blood blood preservation chemical factor influence; the relevant Research related to blood preservation outlook.

Key word: blood, save, physical-chemical factors.

前言：

血液的冷冻保存研究开始于20 世纪40 年代, 并于50 年代用于临床。本文讨论现有的常见的血液保存技术，以及Rh 阴性稀有血液的保存与供应。同时随着血液的保存，血液中的理化因子也必将受到影响。由此而思虑血液保存的未来应该怎样进行？

1、三种常见血液保存法

在血液的冷冻保存研究开始以后的几十年中先后采用慢速冷冻糖液聚集洗涤制备法、慢速冷冻盐液离心洗涤制备法和快速冷冻法保存红细胞[1] 。

慢速冷冻盐液聚集洗涤法原理：pH 5.2-6.1，血浆中丙种球蛋白与红细胞的脂蛋白形成可逆性复合物，加入非电解质溶液如果糖、葡萄糖溶液时，离子强度减小，离子间引力也减小，与脂蛋白结合的球蛋白之间又互相形成可逆结合，使红细胞聚集成团沉降，当加入电解质如生理盐水或提高pH 时，球蛋白之间的结合又断开，红细胞重新悬浮。

慢速冷冻盐液离心洗涤制备法原理：用不同浓度梯度的NaCl 溶液由高渗过度到等渗，用大容量离心机反复离心或用连续离心机分离、洗脱去甘油。

快速冷冻法原理：血液加入甘油试剂，室温平衡30分钟，196℃冷冻，-120℃贮存。

冷冻红细胞的特点：

⏹ 冷冻红细胞保存期可长达10年，适合于稀有血型红细胞长期、常规保存。 ⏹ 对于自身输血者，可用此法预先冷冻贮存其自身红细胞，待需要时解冻洗涤输用。

⏹ 经冷冻洗涤的红细胞，基本去除了白细胞、血小板及血浆蛋白，其去除率要高于洗涤红细胞，减少了输血副反应，对于血液病、阵发性睡眠性血红蛋白尿、肾功能异常以及心功能不全的患者输注更为有利，特别对缺乏IgA 而有抗IgA 抗体的患者以及患有严重过敏性输血反应的患者是理想的血液。

⏹ 冷冻红细胞的2，3-DPG 含量与冷冻前区别不大，接近正常，输入人体后，

红细胞的放氧能力比4℃保存时间较长的库血要好，可以立即纠正缺氧，对于胸外科手术和新生儿换血有利。

冷冻红细胞制备需一定设备，解冻洗涤需一定时间。

2、Rh 阴性血液保存技术：

Rh 血型系统的临床意义仅次于ABO 血型系统, 我国汉族人群Rh 阴性者只占0. 2% - 0. 5%,较高的民族如维吾尔族、哈萨克族等也不过2% -5%。Rh 阴性稀有血液的供应一直是输血界的难题。为了保证临床急诊Rh 阴性患者输血的需要, 建立Rh 阴性血液深低温冰冻长期保存是唯一有效的方法。[2]

焦作市中心血站的夏琳静( 1970 - ) , 女, 主管技师, 从事检验。创立一种RhD 阴性血液冰冻保存技术，使用冷冻血液从融化到悬浮过程结束只需1 h- 1. 5 h, 能够及时向临床提供所需血液。其报告结果如下[3]：

洗涤后冷冻红细胞质控检测

深圳市宝安区血站的张国清、杨玉发和彭丽珍等，创建一种新型的保存方法：

采用电子摇摆秤和输血器自动控制法来代替手工摇摆法控制甘油的流速和流量, 确保甘油准确、均匀地加入到红细胞中, 减轻了工作量, 可同时较大批量制备冷冻红细胞。另外, 我们在冰冻前离心去除多余的甘油, 可使甘油达到合适的浓度, 并可减小甘油化血液制剂的体积, 从而缩短冷冻和融化时间, 减少冰晶的机械损伤作用。并能使冰冻红细胞解冻后的洗涤程序简化, 由3步法改为2步法, 至少缩短洗涤时间30 m in, 能为临床急症病人争取多一些抢救时间, 同时由于减少了洗涤次数, 也提高了红细胞的回收率。

3、最新血液保存方法：

解放军总医院输血科, 全军临床输血中心(刘景汉, 欧阳锡林, 庄远, 车辑, 陈麟凤等) ; 探索变化温度保存血液后再置于4℃条件下继续保存的价值, 为信息化军事斗争提供血液卫勤保障。研究表明, 血液在室外环境(26. 2℃～ 34. 7℃) 可保存4 d, 然后将室外保存的血液再置于4℃条件下继续保存可达7 d, 其血液质量指标可达到临床应用标准。这一研究提示在应急情况下, 变化温度条件保存血液是可行的, 可实现急需时有效提供血液。变化温度条件下对血液进行保存, 为深入研究血液和各种细胞保存开辟了新途径, 解决了突发事件和应急情况下快捷有效的提升血液保障的能力。同时, 对提高远距离、跨区域采集血液和储运提供了理论依据和量化标准, 确保了血液质量和输血安全。[4]

4、血液保存对原血液有关理化因子的影响：

血液在保存过程中, 红细胞会发生一系列结构和功能的改变, 从而影响血液质量和临床输血效果。有效携氧量的减少比较直观的反映了红细胞在保存过程中携氧能力的逐渐降低。到保存末期全血红细胞的有效携氧量已经不到采血时的40% , 而悬浮红细胞也仅保有! 新鲜血∀约1 /2的有效携氧量。从有效携氧量的角度可以看出, 悬浮红细胞保存方式较全血更有利于保持红细胞的携氧功能。

血液保存时间和前处理操作等对血红细胞携氧能力及能量代谢有重要影响, 过滤、离心

等操作会对红细胞造成一次性损伤。目前对库血安全性的考察主要是基于血液采集、处理和保存的流程规范以及病毒检测、血型配伍等, 而没有从红细胞功能改变及其对临床输血效果的影响等方面进行分析。

血液中一定浓度的NO 能调节并维持红细胞的变形性, 血液在库存期间, 红细胞的生理功能受损、变形性降低、聚集性增加、弹性下降致使细胞变硬。这一系列变化很可能与NO 的

[5]减少与缺失有关。因此对贮存血液中NO 含量的监测对输血安全的保证有一定的作用。

目前监测运输、库存血液质量的主要依据是c( K+ )、c( Na+ ) 、pH + 等是否符合国家标准。离体或冷藏血液随时间推移不可避免发生一系列的生理及生化改变, 出现红细胞膜僵化、磷酸盐丢失及产生和释放前炎性因子, 以及红细胞膜通透性的改变, 这也都是导致血液中c( K+ ) 、c( N a+ ) 、pH + 改变的主要因素。输血相关疾病的发生率及死亡率与RBC 贮存时间存在相关性, 可能是由于NO 含量的下降, 红细胞膜僵硬, 输入体内无法从狭窄血管中通过所致。

5、血液保存展望：

目前, 添加40%甘油- 80∃ 冰冻保存的红细胞保存期可达14 年以上, 加入AS3 保护液配方可使冰冻复苏后的红细胞4℃保存期延长至21 天。22℃ 液体保存的血小板有效期仅为5天, 细菌感染是输注液体血小板引起感染性休克致病人死亡的主要原因。冰冻血小板可大大减少细菌感染的几率, 并可使其保存期延长至1 年以上。脐血中造血干细胞和造血祖细胞也可被冰冻保存, 快速加入5% DMSO 可有效保护复温后CD34+ 细胞的活性和集落形成单位的

[6-9]数量。刘景汉等报道用快速加入5% DMSO 的方法成功保存的冰冻血小板, 其即刻止血效

果明显, 已成功地在临床上推广应用。

参考文献：

【1】 安万新. 输血技术学[M]. 科学技术文献出版社, 2006.

【2】 王赤林, 袁继荣, 李双. 冰冻红细胞制备过程中若干问题探讨[J]. 中国输血杂志,

2004, 17(1):21-22.

【3】 夏琳静. RhD阴性血液冰冻保存技术[J]. 河南预防医学杂志, 2009, 20(1):80-80.

【4】 刘景汉, 欧阳锡林, 王嵘, 等. 变化温度保存血液再置于4℃继续保存的初步研究

[J]. 临床输血与检验, 2008, 10(3):196-198.

【5】 汤晓娴, 彭明喜, 董国飞, 等. 冷冻储运血液中一氧化氮的变化[J]. 中国输血杂志,

2009, 22(10):813-814.

【6】 刘景汉, 王青梅, 李锡金, 等. 低温保存血小板临床应用效应研究[J]. 解放军医学

杂志, 2001, 26(3):222-223.

【7】 刘景汉, 欧阳锡林, 高大勇. 冰冻血小板战时运输和储存的允许许温度[J]. 解放

军医学杂志, 2003, 28(4):343-344.

【8】 刘景汉, 欧阳锡林, 高大勇. 冰冻血小板的运输及其在野战医院应用的可行性研究

[J]. 中国医师杂志, 2003, 5(7):872-874.

【9】 欧阳锡林, 刘景汉, 韩玮, 等. 冰冻保存血小板新亚群及其膜表面分子分析[J]. 解

放军医学院学报, 2003, 24(2):109-111.