放线菌的培养与观察 实验报告
放线菌的培养和形态观察
摘要 本实验目的是学习并掌握放线菌的培养方法，初步了解放线菌的形态特征。以青色链霉菌（Streptomyces glaucus ）和弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae) 为实验材料，利用高氏I 号培养基进行培养，采用插片法制片，用高倍镜观察其菌丝及孢子丝形态。青色链霉菌（S.glaucus ）的菌落呈青灰色，菌丝颜色较浅，孢子丝螺旋形；弗氏链霉菌(S.fradiae)菌落呈暗黄色，菌丝颜色较浅，孢子丝较菌丝粗且直。 关键词 放线菌观察 插片法 菌丝 孢子丝
引言 放线菌是能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌，其菌丝（包括基内菌丝和气生菌丝）及孢子丝有着各种不同的形态，以孢子进行繁殖。实验主要是观察其菌丝与孢子丝，为了保证菌丝与孢子丝的完整，实验采用插片法培养放线菌。菌丝与孢子丝之间的区别比较明显，很容易区分，观察时需要注意的是它们的形态与位置关系。 1 材料和方法 察。 1.1材料 1.1.1菌种
青色链霉菌（S. glaucus），弗氏链霉菌（S. fradiae ）。 1.1.2培养基
髙氏I 号培养基:可溶性淀粉2g KNO3 0.1g K2HPO4 0.05g MgSO4• 7H2O 0.05g NaCl 0.05g FeSO4• 7H2O 0.001g （母液）琼脂 2g 蒸馏水 100mL pH 7.2～7.4
1.1.3仪器和其他用品
平板培养皿，盖玻片，镊子，酒精灯，显微镜，擦镜纸，接种环等。 1.2方法【1】
1.2.1 配制培养基 按配方配制100ml 高氏I 号培养基，并与培养皿一起高温灭菌30min 。
1.2.2 制作培养基平板
1.2.3 接种 无菌操作分别在青色链霉菌和弗氏链霉菌高氏Ⅰ号培养基上挑取菌种在制备的高氏Ⅰ号培养基平板上密集划线接种。
1.2.4 插片 无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45°角插入平板琼脂接种线上。 1.2.5 培养 将平板倒置，于28℃培养7d 。
1.2.6 菌落形态观察 。
1.2.7 镜检 用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，有菌面朝上放在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜观
图1 青色链霉菌菌丝及孢子丝1（10×
40
） 图2 青色链霉菌菌丝及孢子丝2（10×100）
【1】
2 结果与分析 2.1 实验结果
2.1.1观察青色链霉菌（S. glaucus）（见图1，2）
培养基上的菌落呈青灰色，因为密集划线接种，无法分辨菌落形态。
显微视野中首先可以观察到分布较复杂的菌丝，较透明较细的是基内菌丝，基内菌丝分布于整个视野中，且拥有错综复杂的分支；菌丝中颜色较深的菌丝是气生菌丝（图
1，2）。螺旋式的孢子丝（图2）。
2.1.1观察弗氏链霉菌（S. fradiae）（见图3,4） 培养基上的菌落呈暗黄色。
显微视野中同样菌丝复杂分布，有很
多分支，但是与青色链霉菌明显不同的是孢子丝是直的而不是螺旋式，孢子丝内可以观察到正在形成的孢子（图3，4）。
图3 弗氏链霉菌的菌丝及孢子丝（10×40）
图4弗氏链霉菌的孢子丝及孢子（10×100）
2.2结果分析
把盖玻片插到放线菌生长的培养基中，放线菌会沿着盖玻片与培养基交界的区域生长到盖玻片上，因此经过培养后，可通过观察盖玻片观察到自然状态下的放线菌菌丝，实验中观察到的菌丝就是菌丝的正常形态。
由于培养方法的限制，观察菌丝时只能大体根据菌丝的颜色和形状来大体判断基内菌丝和气生菌丝。观察时孢子丝比较容易找到，比如青色链霉菌的孢子丝螺旋状，弗氏链霉菌的孢子丝长且直，高倍镜下还可观察到孢子。
3. 小结
本实验包括放线菌的培养与观察，掌握了放线菌的培养方法，了解了放线菌菌丝及孢子丝的自然生长形态特征。在实验过程
中，要注意划线时要紧密，插片时要垂直于
划线，保证菌种能着生在盖玻片上；显微观察时宜用略暗光线，使菌丝更容易观察；操作过程中勿碰动菌丝体，以免影响菌丝的自然状态；制片时，要尽可能使菌面朝上，以免破坏菌丝体。实验的关键步骤和注意事项是影响实验结果的主要因素，做好充分预习，对实验方法要明确。 参考文献