酵母菌的工艺流程图
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1. 材料准备。
2. 取出保存的菌种,接入试管斜面活化,然后经过摇瓶或者扁瓶扩大培养。逐级扩大培养
中,至少准备3瓶250mL 种子液(污染得重新做)
3. 将菌种接入种子罐进行扩大培养。(种子罐)
4. 酵母细胞要计数,用血球计数板常规操作计数, 要稀释适当倍数,使酵母菌种子液初
始浓度为106~107个/mL,同时观察是否污染,观察每ml 菌落总
5. 配制硫酸亚铁 [ FeSO 4.7H 2O] 储备溶液,用量400 mL ,含铁量为100mg/ m L ,用
100mL 的三角瓶装起来,0.1 MPa 、121度高压蒸汽灭菌20 min 。(无菌操作,把储备溶液接进种子罐,28°C ,2 0 0 转/ min 发酵 24h-48h 收集第一次菌体)
6. 吸取待测铁溶液5.00mL 放入50mL 容量瓶中,其它试剂加入量同上,然后测定其吸光度。根据所测吸光度在铁标准曲线上找出对应的铁含量,并计算出原待测溶液中每毫升含铁的微克数。
符合要求,收集菌体,蒸馏水洗涤酵母泥,离心,反复三次,收集菌体,置于干燥箱中60~80℃烘干至恒重