总蛋白含量测定操作规程
03-28
总蛋白含量测定操作规程
1 目的
确保口蹄疫灭活疫苗总蛋白含量测定（lowry）操作规程
2 范围
适用于口蹄疫灭活疫苗总蛋白量测定。
3 责任部门
QC部相关检验人员
4 内容
4.1 准备
4.1.1 设备 酶标仪(全波长)，“M”型96孔板，卡介苗注射器，单通道和多通道移液器，涡旋震荡仪，酶标板振荡器等。
4.1.2 试剂 丙酮(分析纯)、无菌去离子水、商品化Lowry法改良试剂盒 4.2操作步骤
4.2.1 标准系列稀释液制备 将商品化试剂盒内标准牛血清白蛋白(2mg/ml母液)，按下表依次稀释。
上述表格中，A1-A9为系列稀释的标准牛血清白蛋白溶液，A1至A9蛋白浓度依次增高;B、C、D行中1-6列为检测样品750nm吸光值，B1-B6为6批不同批次疫苗样品，每一列为同一疫苗样品三个重复。
4.2.6.2 绘制标准曲线:将上表中数据复制到EXCELL表格中，
4.15%(标准差/平均值*100%)，将每毫升水相抗原中总蛋白含量，除以2折算为每毫升疫苗总蛋白含量，该疫苗的总蛋白含量为138μg/ml。按照上述方法，可计算其他样品的总蛋白含量。
4.2.6.4 结果判定
同一样品不同重复间变异系数应小于5.3%，否则试验不成立，应重做。 4.3 清场
4.3.1 将所有试液、指示剂及相关化学试剂放回原处，并填写理化室化学试剂使用记录。
4.3.2 将所有器具内废液倒掉，用自来水冲洗三遍，确保器具内壁无溶液残留，分类放入塑料筐内待进一步清洗。
4.3.3 擦拭桌面，确保桌面整洁。清洗抹布拧干放回原处待用。 4.3.4 拖洗地面，确保地面整洁。清洗拖布甩干放回原处待用。