专题十五 生物技术实践

2016-2017学年度??? 学校12月月考卷

学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、综合题

1．（2016天津卷.10）（12分）天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。

（1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶_____________________。

（2）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中, 发酵罐先通气，后密闭。通气能提高____________的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。

（3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下。

①发酵过程中, 定期取样测定醋酸杆菌密度变化, 趋势如右图。据图分析，与颠倒前相比，B 层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是____________________。

②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中____________层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。

③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的____________，淘汰了部分乳酸菌种类。

2．（2016课标1卷.39）

空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下： ①配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl 、X 、H 2O ）;

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。 回答下列问题:

（1）该培养基中微生物所需的氮来源于_________________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X 通常是_________________。

（2）步骤③中，实验组的操作是_________________。

（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_________________现

象。若将30（即36-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法_______________（填

“正确”或“不正确”）。

3．（2016四川卷.10）图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的

mRNA 部分序列。

（1）图中选择培养基应以 为唯一氮源；鉴别培养基还需添加 作指示剂，

产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成 色。

5（2）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10 的土壤样品液0.1mL ，培养一

段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。

8 该过程采取的接种方法是 ，每克土壤样品中的细菌数量为 ×10

个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较 。

（3）现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA 在图乙箭头所

示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码（终止密码有UAG 、UGA 和UAA ）。突变基因转录的mRNA 中，终止密码为 ，突变基因表达的蛋白质含 个氨

基酸。

4．（2016新课标2卷.39)

苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：

（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，

在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反

应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________

中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增值速度________________。

（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据

醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。

（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度

____________（填“低于”或“高于”）第二阶段。

（4）醋酸杆菌属于___________核生物，其细胞结构中（填“含有”或“不含有”）线

粒体。

5．（2016新课标Ⅲ卷.39）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化

所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸

钙。回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进

行梯度稀释的理由是_________________。

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和

_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。

（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填

“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。

6．（2016江苏卷.29）为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响，以及固定化藻对

2+含Zn 污水的净化作用，科研人员用筛选到的一株绿球藻进行试验，流程及结果如下。

请回答下列问题：

（1）实验中的海藻酸钠作用是 ，CaC l2的作用是 。

（2）为洗去凝胶球上残余的CaC l2和其他污染物，并保持绿球藻活性，宜采用 洗涤。图1 中1. 0%海藻酸钠组培养24 h 后, 移去凝胶球, 溶液呈绿色, 原因是

______________________。

2+（3）为探索固定化藻对含Zn 污水的净化作用，应选用浓度为 海藻酸钠制

备凝胶球。

2+（4）图2中空白凝胶球组Zn 浓度下降的原因是 。结合图1和图2分析，固

2+2+定化藻的实验组24~48h间Zn 浓度下降速度较快的主要原因是 ；72~96h间Zn

浓度下降速度较慢的原因有 。

7．（2016海南卷.30）回答下列问题：

（1）蛋白酶甲、乙、丙三者的活性随pH 的变化如图所示。通常，用清水洗涤衣服上的

新鲜血迹时，不应该使用开水，原因是_______________________。若要去除衣服上的

血渍，应选择含有_____________________（填“蛋白酶甲”、“蛋白酶乙”或“蛋白

酶丙”）的碱性洗衣粉，理由是___________________。

（2）某同学为了洗去衣服上的油渍，洗衣时在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶，该

同学的做法___________________（填“合理”或“不合理”），理由是

_________________________。

（3）已知溶液的pH 可以影响酶的活性，请推测pH 影响某种蛋白酶活性的原因可能是

其影响了酶和底物分子中_________________（填“羧基和氨基”、“氨基和甲基”、

“羧基和甲基”或“甲基和甲基”）等基团的解离状态。

8．(2016届黑龙江哈尔滨六中高三第三次模拟理综生物试卷）关于DNA 粗提取的实验

材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？

请回答下列问题：

（1）鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中 细胞数目较多，可以提供丰富的 。

（2）实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因

是 。

（3）生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步

骤后，结果是 ，这是因为这些动物和人一样，成熟红细胞中 ，但若

改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行，这是因为 。

9．(2016届江西九江高三下第三次模拟考试理综生物试卷）中国科学家屠呦呦从植物

黄花蒿中发现并提取青蒿素挽救了数百万人的生命。研究表明，青蒿素易溶于丙酮、乙

酸乙酯、氯仿、苯、乙醚及石油醚, 几乎不溶于水。

（1）植物芳香油的提取方法有_________、________和萃取等，应采用________法从黄

花蒿中提取青蒿素。

（2）可以用青蒿芽通过________技术获得大量的用于提取青蒿素的幼苗，该过程的原

理是________,该过程所需的是MS 培养基, 在MS 培养基中添加有机物时，用________

作碳源，如果用葡萄糖作碳源会导致植物细胞________而影响生长, 葡萄糖是否可以作

为微生物培养基的碳源？________ (填“是”或“否”）

10．(2016届宁夏石嘴山第三中学高三下第四次模拟生物试卷）2015年“青蒿素之母”

屠呦呦获得了诺贝尔生理学或医学奖。青蒿素是从黄花蒿的茎叶中提取的无色针状晶

体，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发。请回答以下问题：

（1）从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用 法，所选用的有机溶剂为 （填

“乙醇”或“乙酸乙酯”），通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和 ，以提

高效率。提取过程中宜采用 加热以防止燃烧、爆炸，加热时瓶口要安装 装置，所得液体浓缩前进行 。

（2）黄花蒿精油是从黄花蒿的花蕾中提取的，其原理是利用水蒸气将挥发性较强的植

物芳香油携带出来，形成油水混合的乳浊液呈 色，此时向乳浊液中加入氯化

钠，就会出现明显的分层现象，可用分液漏斗将其分开，然后再加入 ，得到纯精油。

11．(2016届黑龙江大庆第一中学高三第三次模拟考试理科生物试卷）请回答下列有关

生物技术实践方面的问题：

（1）传统发酵技术应用十分广泛，果酒和果醋就是常见例子。当发酵装置由果酒酿造

转为果醋酿造时，首先要提高 ，其次要注意通

入 。

（2）微生物培养基通常在压力为lOOkPa, 温度为 ℃条件下，灭菌15至30min, 然后待培养基冷却至 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板。

（3） 菊花的组织培养，一般选择 的茎上部新萌生的侧枝；进行菊花组织

培养时，一般将pH 控制在 左右，温度控制在18℃至22℃并每天光

照12h 。

（4） 植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，柑橘芳香油的制备通常使用 法为提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用 浸泡。

12．

(2016届福建福州一中高三下模拟考试（5月质检）生物卷）随着科技的发展，人类从

依靠经验利用职务发展到对植物中的有效成分进行化学分析与分离提纯。请回答下列关

于植物中有效成分提取的问题：

植物芳香油的提取方法有____________、____________、_______等。

玫瑰精油的提取中如果要提高品质，就需要__________________________________。

橘皮精油的化学本质是____________。提取的操作流程是____________、漂洗、压榨、

____________、静置等。

胡萝卜素的提取中____________、________________________会导致胡萝卜素分解。提

取装置要在加热瓶口安装____________。提取的胡萝卜素可用____________鉴定。

13．(2016届海南中学高三第九次月考生物试卷）根据所学知识回答下列问题：

（1）在果酒酿造过程中，如果果汁灭菌不严格，含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋

酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？ （“能”或“不能”）。请说明理

由： 。

（2）在食品加工业中，使用量最大的酶制剂果胶酶是由 发酵生产的。

（3）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂和分化的关键性激素，在植物组织培养过程中，若先使用细胞分裂素，后使用生长素，实验结果是细胞 。

（4）采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤依次是：粉碎、干燥、萃取、 、浓缩，其中的干燥过程应控制好时间和温度，以防止 ，而萃取过程应采用水浴加热，这是因为 。

14．(2016届吉林大学附属中学高三模拟考试理科综合生物试卷）请回答生物技术实践的相关问题：

（1）果酒的制作过程中，在葡萄汁装入消毒发酵瓶时，要留有大约 的空间。所使用的发酵液能使酵母菌生长繁殖而绝大多数其他微生物无法适应，这种发酵液应具有 的特点。

（2）在筛选纤维素分解菌的过程中，常用的方法是 。但这只是分离纯化的第一步，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行 的实验。

（3）植物组织培养是一种常见的繁殖花卉的手段，一般的说，容易进行 的植物，也容易进行组织培养。但为了提高成功率，往往要添加植物激素，其中关键性的激素是 。

（4）许多植物芳香油的提取在原理和程序上是相同的，结合玫瑰精油的提取，设计提取茉莉油的实验流程（如下图）：

其中A 表示 过程，B 表示 过程。

15．(2016届吉林省实验中学高三第八次模拟考试理综生物试卷) 有机化工原料氯苯不易降解，会污染环境，现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物。回答下列问题：

（1）为了获得能降解氯苯的微生物菌种，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以_________为碳源的培养液进行选择培养。除含有碳源外，培养液还应含有________、无机盐和蒸馏水等。

（2）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1L 含20 mg 氯苯的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时，则应选择微生物_______作为菌种进行后续培养。

（3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可用___________直接计数，也可选用_____________法统计活菌数目，一般前者得到的结果_____（填“>”、“=”或“

（4）对选定的菌种进行细胞学检测，发现它没有具膜细胞器如线粒体等，则该菌种属于_____生物，其产生的降解氯苯的酶蛋白是在 上合成。

16．(2016届江西南昌第二中学临川第一中高三4月联考二理综生物卷）请回答“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”有关问题

（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、 和无机盐。

（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是 和 两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是 。

（3）可以通过_____________________________来判断细菌是否分解尿素。土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们能合成__________。

（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则土壤细菌的增长呈现____型曲线增长。

17．(2016届江西万载高三第四次理科综合能力模拟冲刺试卷生物试卷）（1）微生物

所需的营养成分一般包括 、 、水和无机盐。

（2）培养微生物时，除考虑微生物生长所需的营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、 以及是否需要O 2等。

（3）对培养基进行灭菌时，多采用 法，而对接种环或涂布器灭菌时则用 法。

（4）平板划线时，为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始，所以每次划线前都要 ，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线 。

（5）脲酶可以将尿素分解为NH 3，从而使尿素溶液pH 升高，这可用 试剂来检验。

18．

(2016届山东省济宁市高三第二次模拟考试生物试卷）红方是腐乳的一种。请回答与其制作有关的问题：

（1）补充制作红方的实验流程：①__________→②加盐腌制→③_________→④密封腌制。

（2）在实验流程①中，首先将豆腐块平放在笼屉内，笼屉中的温度应控制在__ __℃，并保持在一定的________。5天后豆腐块表面布满毛霉菌丝，这些毛霉来自空气中的______。

（3）在实验流程②操作中，向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬。同时，盐还能_____________，避免豆腐块腐败变质。

（4）在实验流程③用到的辅料中，卤汤是由___________及各种______________配制而成的。

19．(2016届山东省平度市高三毕业班模拟考试（五）理综生物试卷）根据生物相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前将胡萝卜粉碎和 ，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法 （填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是 ；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用 法，并以 样品作为对照。

（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是 。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，可选用 或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是 。培养酵母菌R 时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌提供 和 。

20．(2016届山西省康杰中学高三下学期模拟（一）生物试卷）下图为鸭梨醋饮的制作流程图，请据图回答问题。

（1）果酒的酿造原理是先使酵母菌进行__________，以增加酵母菌的数量，然后再通过_________获得果酒。

（2）过程②所用的微生物是__________ （填“需氧型”或“厌氧型”）生物，该微生物在氧气、糖源都充足时，将葡萄汁中的_________分解为______________。

（3）为获得高纯度的果酒，需要对过程①所用的微生物进行分离和纯化，其过程为： 第一步：配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的__________等基本营养成分，原料称重溶解后，然后进行灭菌操作，常用的灭菌方法是____________。

第二步：接种。微生物常用的接种方法有__________________。

第三步：培养。温度控制在____________。

第四步：挑选符合要求的菌落。

21．(2015年湖北黄冈中学4月高三适应性考试理科综合生物试卷）根据所学知识，请回答下列有关问题。

（1）若以花菜为实验材料，进行DNA 的粗提取与鉴定实验，为了使花菜细胞破碎释放DNA ，应加入一定量的__________和食盐，进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

（2）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油中，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是____________________。

（3）工业生产上，提取天然β—胡萝卜素的方法主要有三种，一是从__________中提取，二是从大面积养殖的岩藻中获得，三是利用__________生产。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是______________，原因是____________________。这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、__________、浓缩。提取的胡萝卜素粗品可通过__________进行鉴定。

22．(2016届辽宁大连八中二十四中高三下期联合模拟考试理科生物卷）下图是以鲜苹果汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图，分析并回答：

（1）在果汁加工过程中可添加________酶提高出汁率和澄清度。

（2）在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约________的空间。经过10—12天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色由________色变为_______色，说明产生了酒精。

（3）过程乙中使用的微生物是________，可以从食醋中分离纯化获得。纯化菌种时需要对培养基进行灭菌，其方法是________；培养温度控制在____________ 摄氏度范围内。

（4）在__________的条件下，如果缺少糖源，乙中的微生物将甲过程的产物变为乙醛，再将其变为醋酸。

23．(2016届宁夏银川唐徕回民中学高三下第三次模拟考试生物试卷）自20世纪60年代以来，花药离体培养的研究发展迅速，据记载，现在已经有250多种高等植物的花药培养成功。请回答下列问题：

（1）被子植物的花粉的发育要经历小孢子四分体时期、__________等阶段。诱导花粉植株能否成功受多种因素的影响，其中__________与___________是主要的影响因素。选择花药时，一般要通过_________来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用方法有______________。

（2）接种前，通常要将花蕾进行消毒，常用体积分数为______和质量分数为0．1%氯化汞溶液。

（3）细胞分裂素和生长素的使用顺序和用量会影响到植物细胞的发育方向。例如，为了有利于细胞分裂而不分化，两种激素的使用顺序为：___________________________。花粉植株产生的途径有两种：一种是花粉分化形成愈伤组织，另一种是形成_______________。

24．(2016届安徽合肥第一中学高三下冲刺模拟卷A 理科生物试卷）下图为通过花药培养获得月季花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。

（1）选择花药时一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用方法是_______________________。一般来说，在_______________期，细胞核由中央移向细胞一侧。为此，通常选择_______________________的花蕾，成功率最高。

（2）上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先形成_______________，再将其诱导分化成植株。

（3）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。如果在以尿素为唯一氮源的培养基中加入__________________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________________染料，培养几种菌后，培养基中出现透明菌，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

（4）在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格采取的措施是_________________________________，如果_______________，说明培养基制备成功，否则需要重新制备。

25．(2016届安徽省六安市第一中学高三第三次模拟考试生物试卷）玫瑰精油是世界上最昂贵的精油，被称为“精油之后”，它除了具有美容护肤的功效外，还具有镇静催眠、缓解心理压力等多重功效。请回答相关问题：

（1）提炼玫瑰精油时，玫瑰花瓣与清水的质量比为_____________，用________法得到油水的混合物，加入NaCl 的目的是______________，用分液漏斗得到的油层还会含有一定量的水分，因此要加入一些_____吸水，放置过夜再过滤即可得到精油。

（2）若进行玫瑰的花粉组织培养，为了确定花粉时期最常用的方法是____，若进行玫瑰的组织培养，则需要制备____________培养基。

（3）花药中的花粉可以通过脱分化形成愈伤组织，再分化形成____________，再将其诱导分化成植物体，两条途径主要取决于__________________。

26．(2016届广西来宾高级中学高三5月模拟考试理综生物试卷）下表是某同学列出的

（1）制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL 后，还要进行 和 。

（2）从功能上看，该培养基属于 培养基，细菌能利用培养基中的氮源是由于能合成 。

（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时， （需要/不需要）设置对照组（即不接种进行培养），原因是 。

6（4）某同学在3个培养基上分别涂布稀释倍数为10的土壤样液0．1mL ，培养一段时

间后，其菌落数分别为180、220、320个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为 ，此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为 。

27．(2016届海南省海口中学高三第四次模拟考试生物试题）请回答下列与植物有效成分的提取相关的问题：

（1）玫瑰精油提取，当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 。

（2）提取玫瑰精油的过程中进行冷却的原因是 。

（3）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 法提取橘皮精油，其中将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡的目的是 ．

（4）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比。

（5）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，右图为鉴定结果示意图，则甲、乙中属于胡萝卜素层析带的是 。

28．(2016届湖北省高三下学期5月模拟考试 理综生物试卷）受中医古籍《肘后备急方》中将青蒿“绞汁”用药的启发，屠呦呦采用低温提取的方法，从黄花蒿中直接提取得到青蒿素，是治疗疟疾的特效药。青蒿素易溶于有机溶剂，不 溶于水，不易挥发，对热不稳定。回答下列问题：

（1）青蒿素的提取 （填“适宜”或“不宜”）采用水蒸气蒸馏法提取，原因是 。

（2）屠呦呦采用乙醚浸提法提取青蒿素，其提取流程与胡萝卜素的提取具有相似之处。在用乙醚浸泡提取前，现要对黄花素茎叶进行 和干燥，以提高萃取效率；干燥过程应控制好 和干燥时间，以防止 。

（3）青蒿素是从野生植物黄花蒿中提取，曾被世界卫生组织称做是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”，这一实例表明了生物多样性的 价值。青蒿素还对癌细胞的生长具有显著抑制作用，它能诱导多种癌细胞的凋亡。细胞凋亡是由 所决定的细胞 的过程。

29．(2016届湖南五市十校教研教改共同体高三模拟理综生物试卷）腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品。现代科学研究表明，多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉。回答下列问题：

（1）毛霉能在豆腐块上生长，是因为豆腐块能为其提供水、无机盐、__________和_________等四大类基本营养物质。

（2）民间制作腐乳____________（填“需要”或“不需要”）灭菌，发酵好的豆腐上布满了菌丝，这些菌丝_____________（填“属于”或“不属于”）同一物种。

（3）现代的腐乳生产使用的是优良的毛霉菌种，而优良的毛霉菌种通常是从自然发酵的长满菌丝的豆腐坯上分离并纯化得到的。该过程需要先制成孢子悬液，再进行接种培养，以获得所需的毛霉菌落，这一过程最常用的方法是________________________。

（4）以下是现代化生产腐乳的流程图：

该流程中扩大培养时使用的培养基与毛霉菌种分离时使用的培养基最大的区别是后者培养基中加入了_______。当豆腐坯接种孢子悬浮液经培养长出菌丝后，对豆腐坯进行的A 处理是______________。

腐乳在制作后期装瓶时可加入酒和多种香辛料配制的卤汤，酒的含量控制在12％左右，若酒的含量过高会导致腐乳的成熟时间__________。

30．(2016届河南八市重点高中高三第三次质量检测生物试卷）下图为传统酿酒的工艺流程图：

根据对微生物发酵原理以及操作原理的理解回答下列问题：

（1）在酿酒前对粮食种子（多为高粱）要进行适当粉碎成小颗粒状态，但是并不磨成面粉状态，这样做的原因是__________，第二步高温蒸汽条件下蒸一段时间，其目的一方面是___________，另一方面“糖化”的含义是______________。

（2）第三步为什么晾至35℃左右时才可向粮食中加曲? _____。“加曲”实际上相当于向培养基中_____。

（3）密封后在酒缸中发酵12天左右，此间温度基本保持在_________℃，原因是此温度是酵母茵等酿酒微生物的_____________。

（4）发酵好后需要用蒸馏法获得酒精，蒸馏的温度应控制在78℃，原因是_______。蒸馏出的原浆酒酒精浓度高达95％以上，但成品白酒一般酒精浓度为40－60度，“勾兑”的作用是向原浆酒中加_____稀释，因此名酒产地要有好的水源地。

参考答案

1．（12分）

（1）在最适温度条件下催化能力最强

（2）酵母菌

（3）①先快速增长后趋于稳定？ 氧气、营养物质、PH

②颠倒前的B 层和颠倒后的A （或不翻动，或下）

③种间竞争（或竞争）

【解析】（1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，原因是酶在最适温度条件下催化能力最强。

（2）通气阶段可促进酵母菌的有氧呼吸，为酵母菌的繁殖提供能量，从而增加酵母菌数量。

（3）①A 、B 层颠倒后，B 层醋酸杆菌获得的氧气较为充足，环境中的营养物质和pH 也影响其种群密度。

②乳酸菌为厌氧菌，颠倒前的B 层和颠倒后的A 层有利于乳酸菌的繁殖。

③发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的竞争，淘汰了部分乳酸菌种类使成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少。

【考点定位】本题考查发酵技术。

【名师点睛】本题结合天津独流老醋生产工艺考查发酵过程中不同阶段的微生物代谢类型和条件控制。属于容易题。解题关键是明确明确酵母菌、乳酸菌和醋酸杆菌的代谢类型，解题关键是分析A 、B 层颠倒后其发酵条件的不同。易错点是最后一空，错因在于未能注意题干中“不同种类乳酸菌”而考虑乳酸菌的种内斗争。

2．（1）牛肉膏、蛋白胨 琼脂

（2）将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间

（3）污染 不正确

【解析】（1）依据配制培养基的成分可知：该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨。因为该实验是 “用平板收集教室空气中的微生物”，所使用的培养基应为固体培养基，配制时，需加入凝固剂，据此推知：该培养基中的成分X 通常是琼脂。

（2）依题意可知，该实验的目的是：用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。所以步骤③中，实验组的操作是：将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间，以收集教室不同高度空气中的微生物。

（3）设置的空白对照组，在整个实验过程中没有用来收集空气中的微生物，若空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明培养基的配制是不成功的，在此次调查中出现了污染现象，所以若将30（即36-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法不正确。

【考点定位】微生物的培养与应用

【名师点睛】本题以“了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况”实验为载体，综合考查学生对微生物的培养与应用的知识的理解能力和实验设计能力。解答本题除了需要熟记和理解相关的基础知识，形成知识网络外，更主要的是从题意中提取有效信息，如配制培养基的成分、该实验的目的及给出的实验步骤等，将其与所学知识有效地联系起来，实现对知识的整合和迁移。

3．（1）尿素 酚红 红 （2）稀释涂布平板法 1.75 少 （3）UGA 115

【解析】（1）由于筛选产脲酶，脲酶能够催化尿素分解为氨，故应以尿素为唯一氮源，培养基中可以加入酚红指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成红色。

（2）用于计数细菌菌落数接种方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30~300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数，每克土壤样品中的细菌数量为

（156+178+191）/3÷0.1×10=1.75×10。由于两个或多个细菌连接在一起时，往往统计的是一个菌落，故用此方法测得的细菌数偏低。

（3）突变基因转录的mRNA 中，终止密码为UGA, 由于增加70个碱基，mRNA 中碱基总数（由于终止密码子不编码氨基酸，故除去终止密码子含3个碱基）=271+2+72=345，由于mRNA 上一个密码子含三个碱基决定一个氨基酸，故突变基因表达的蛋白质含345÷3=115个氨基酸。

【考点定位】遗传信息的转录和翻译、微生物的分离与计数、基因突变

【名师点睛】本题以“脲酶细菌筛选及突变基因表达的研究”为背景，通过图示形式呈现实验流程和基因突变的相关信息，意在考查考生从情景中获取关键信息，并结合所学的基础知识、基本原理进行归纳分析、推理判断的能力，本题易错点在于：①忽略了用稀释涂布平板法进行计数时，统计的菌落数应介于30~300之间；②忽略了题图乙中为mRNA 上的碱基序列，而误认为是基因中碱基序列或将“271”当作是mRNA 中的密码子序号，导致计算错误；③遗忘了密码子与氨基酸的对应关系（终止密码子不决定氨基酸，一个密码子含3个碱基，决定一个氨基酸）的知识，导致计算错误。

4．（15分）

（1）细胞质基质 重铬酸甲 线粒体 快

（2）有氧

（3）低于 （4）原 不含有

【解析】（1）图示中的过程①和②分别表示无氧呼吸的第一、第二阶段，其场所均为细胞质基质；橙色的重铬酸甲溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，变成灰绿色。过程③表示有氧呼吸的第二、第三阶段，其场所分别为线粒体基质和线粒体内膜，即在酵母菌细胞的线粒体中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度快。

（2）醋酸杆菌是一种好氧菌，在氧气充足的条件下才能进行旺盛的生命活动，因此将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，需要在有氧条件下才能完成。

（3）第一阶段即果酒的制作，所控制的温度范围是18～25℃，第二阶段即果醋的制作所控制的温度范围是30～35℃，所以第一阶段的温度低于第二阶段的。

（4）醋酸杆菌属于原核生物，其细胞结构中不含线粒体等复杂的细胞器。

【考点定位】果酒和果醋的制作、原核生物与原核细胞

【名师点睛】熟记并理解有氧呼吸与无氧呼吸的过程、场所及其联系，明确果酒和果醋制作的基础知识是正确解答此题的前提。果酒和果醋制作的中的几点注意事项如下：

①酿酒和酿醋所利用的微生物不同：前者为酵母菌---真核生物，兼性厌氧菌；后者为醋酸杆菌---原核生物，好氧菌。二者本质区别是有无以核膜为界限的细胞核，此外有无复杂的细胞器也是二者的区别。

②酵母菌进行有氧呼吸时，产生能量多，可大量繁殖；进行无氧呼吸时，产生能量少，仅能满足自身代谢，基本不繁殖；所以利用酵母菌进行工业生产时先进行通气再密封。

③对于发酵温度的数字的记忆：果酒为18℃～25℃，果醋为30℃～35℃。

5．（1）无菌水 泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落

（2）鉴别乳酸菌 中和产生的乳酸 具有透明圈

（3）甘油

【解析】（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。若直接培养，由于泡菜滤液中菌的浓度高，则很难分离得到单菌落。

（2）由题意可知，分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸

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能溶解培养基中的碳酸钙。由此可推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和鉴别能产生乳酸的乳酸菌；根据产酸菌在含CaCO 3的培养基上产生透明的原理，分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌，然后用平板划线法进一步分离纯化。

（3）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。即将1mL 培养的菌种转移到已灭菌的盛有1mL 甘油的甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存。所以乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油。

【考点定位】微生物的分离和培养

【名师点睛】利用溶钙圈法分离纯合泡菜滤液中的乳酸菌

1. 原理：利用一些产酸类细菌在含CaCO 3的培养基上产生CaCO 3溶解圈，从而筛选出这些产酸类细菌，可用于乳酸菌的筛选。 其中培养基中加入CaCO 3的作用是：①鉴别能产生酸的细菌；②中和产生的酸，以维持培养基的PH 。

-62．筛选过程：样品预处理→梯度稀释至10→选择合适的稀释度涂布→37℃培养48h →挑选

产生溶钙圈（透明圈）的菌落反复在MRS 培养基上划线→挑起单菌落染色，经镜检确认为纯种→菌种保存。

因为课本里没有这个实验，所以本题考查考生的知识迁移能力。首先通过认真审题，从题干中获取该实验原理，然后再综合运用课本所学相关实验的方法、原理进行解题。

6．（1）包埋绿球藻（包埋剂） 与海藻酸钠反应形成形成凝胶球（凝固剂） （2）培养液（生理盐水） 海藻酸钠浓度过低（凝胶球孔径过大）

（3）2.0%

2+（4）凝胶球吸附Zn 绿球藻生长（增殖）速度快 绿球藻生长（增殖）速度减慢，

2+溶液中Zn 浓度较低

【解析】（1）海藻酸钠溶液在CaC l2溶液中形成凝胶球，包埋绿球藻。

（2）可采用蒸馏水洗去凝胶球上残余的CaCl 2和其他污染物，并保持绿球藻活性。溶液呈绿色，说明固定化的绿球藻数量少，原因是海藻酸钠浓度过低（凝胶球孔径过大）。

（3）根据图1可知，浓度为2.0%的海藻酸钠制备的凝胶球最有利于绿球藻的繁殖。

2+2+（4）空白凝胶球容易吸附Zn ，导致溶液中Zn 浓度下降；根据合图1和图2分析，固定化

2+藻的实验组24~48h间绿球藻数量增加最快，导致Zn 浓度下降速度较快，72~96h间绿球藻

数量基本不再增加。

【考点定位】固定化细胞，海藻酸钠，CaCl 2、实验分析

【名师点睛】此题是对固定化细胞的考查，解答本题的关键在于理解固定化细胞的过程，明

2+确海藻酸钠与CaCl 2的作用；关于固定化藻对含Zn 污水的净化作用，应结合曲线图进行分

析，两幅曲线图均有两个自变量，分析时应控制一个自变量不变，分析另一个自变量对纵坐标的影响。

7．（15分）

（1）开水使血中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗（3分）

蛋白酶丙（1分）

碱性条件下只有蛋白酶丙有活性（4分）

（2）不合理（1分） 蛋白酶会降解脂肪酶（4分）

（3）羧基和氨基（2分）

【解析】（1））用清水洗涤衣服上的新鲜血迹时，如果使用开水，会使血中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗。使用碱性洗衣粉去除衣服上的血渍，碱性条件下只有蛋白酶丙有活性，应选择含有蛋白酶丙的碱性洗衣粉。

（2）脂肪酶的化学成分为蛋白质，会被蛋白酶水解。

（3）蛋白酶和和其作用的蛋白质类污渍的氨基和羧基均会发生解离离，pH 会影响其解离状态。

【考点定位】酶的研究

【名师点睛】“四步法”分析酶促反应曲线

（1）识标：“识标明变量”。明确酶促反应曲线坐标图中横坐标（自变量）和纵坐标（因变量）的含义。

（2）析线：“析线理关系”。分析酶促反应曲线走势，明确因变量怎样随自变量的变化而变化。“上升”“下降”“先升后降”“先升后稳”“水平”等。

（3）明点（特殊点）：“抓点求突破”。明确酶促反应曲线中起点、终点、顶点、拐点、交叉点、特殊条件下的交点等表示的生物学含义。

（4）判断：“先分后合巧辨析”。对于多条酶促反应曲线图，根据曲线上不同标示物识别曲线所代表的意义（有的曲线直接标出），首先对每一条曲线单独分析，进行比较，判断曲线间有无联系或找出相互关系，然后综合分析。

8．(1)含细胞核红DNA

(2)鸡血细胞中DNA 相对含量高

(3)很难提取到DNA 成熟红细胞中无细胞核肝细胞有细胞核

(4)研磨

【解析】(1)鸡红细胞中含有成形的完整的细胞核，而且红细胞数量比较多，因而DNA 量也较丰富。

(2)鸡的全血包括血浆和血细胞，血浆中无DNA ，全血中除去血浆后即是浓缩的血细胞液，DNA 的相对含量提高了。

(3)哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数DNA ，在实验中很难提取到，但肝细胞含有细胞核，并且肝组织易破坏，有利于DNA 的提取。

(4)若使肝脏组织易分离，将肝脏组织剪碎、研磨是一种简便易行的方法。

【考点定位】本题考查DNA 的粗提取相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

【名师点睛】易错警示 (1)DNA粗提取与鉴定实验的易错点

①本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。②实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破放出DNA ，第二次的目的是稀释NaCl 溶液，使DNA 从溶液中析出。

9．(15分, 除注明外, 每空2分）

(1）蒸馏 压榨 萃取

(2）植物组织培养 （植物) 细胞的全能性 蔗糖 失水 是（1分)

【解析】（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等方法，而青蒿素几乎不溶于水，易溶于有机溶剂，所以应采用萃取法。

（2）要用青蒿芽通过植物组织培养技术可以大量获得青蒿素的幼苗，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。MS 固体培养基中应用蔗糖作为碳源，既可以提供能量还可以维持细胞渗透压。如果用葡萄糖作碳源会导致植物细胞失水而影响生长，葡萄糖可以做为微生物培养基的碳源。

【考点定位】本题考查植物组织培养和植物芳香油提取相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

【名师点睛】1. 植物有效成分的提取的三种常用方法比较

10．（15分，除标注外，每空2分）

（1）萃取（1分） 乙酸乙酯 干燥 水浴 回流冷凝(冷凝回流 或 冷凝) 过滤

（2）乳白 无水硫酸钠

【解析】（1）由题意“青蒿素易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发”可知: 应采用萃取法从黄花蒿中提取青蒿素。乙醇是水溶性有机溶剂，萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以乙醇不能用于青蒿素的萃取；乙酸乙酯不与水混溶，因此可用于青蒿素的萃取。通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和干燥，以提高效率。提取过程中宜采用水浴加热以防止燃烧、爆炸，加热时瓶口要安装回流冷凝装置，所得液体浓缩前进行过滤

（2）黄花蒿精油是从黄花蒿的花蕾中提取的，其原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合的乳浊液呈乳白色，此时向乳浊液中加入氯化钠，就会出现明显的分层现象，可用分液漏斗将其分开，然后再加入无水硫酸钠吸水，得到纯精油。

【考点定位】植物有效成分的提取。

11．（1）发酵温度 无菌空气

（2）121 50

（3）未开花植株 5．8

（4）压榨（1分） 石灰水

【解析】

试题分析：（1）果酒制作需要在缺氧且温度为18℃～25℃的环境中进行，而果醋制作要在有氧且温度为30℃～35℃的环境中进行，所以当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿造时，首先要提高发酵温度，并注意适时通过充气口充入无菌空气。

（2）微生物培养基通常采用高压蒸汽灭菌，即在压力为100kPa ，温度为121℃条件下，灭菌15至30min ，然后待培养基冷却至50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板。

（3）菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；一般将pH 控制在5．8左右，温度控制在18至22℃，并每天光照12h 。

（4）根据植物原料的特点，植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等．提取橘皮精油，常采用压榨法．为提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

考点：果酒和果醋的制作、提取芳香油

【名师点睛】果酒制作需要在缺氧且温度为18℃～25℃的环境中进行，而果醋制作要在有氧且温度为30℃～35℃的环境中进行．微生物培养基通常采用高压蒸汽灭菌，即在压力为100kPa ，温度为121℃条件下，灭菌15至30min ．菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；一般将pH 控制在5．8左右，温度控制在18至22℃，并每天光照12h ．根据植物原料的特点，植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等．提取橘皮精油，常采用压榨法．为了提高出油率，首先将橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

12．（1）蒸馏、压榨、萃取（3分）

延长蒸馏时间（2分）

柠檬烯 （1分） 石灰水浸泡（2分） 过滤（1分）

（4）温度太高（1分） 干燥时间太长（1分） 回流冷凝装置（2分） 纸层析法（2分）

【解析】（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨、萃取等。

玫瑰精油的提取中，如果要提高品质，就需要延长蒸馏时间。

橘皮精油的化学本质主要是柠檬烯。提取的操作流程是石灰水浸泡、漂洗、压榨、过滤、静置等。

（4）胡萝卜素的提取中，温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。提取装置要在加热瓶口安装回流冷凝装置。提取的胡萝卜素可用纸层析法鉴定。

【考点定位】植物中有效成分的提取。

13．（1）不能 醋酸菌是好氧细菌，而果酒发酵为无氧环境，醋酸菌无法生存 （2）霉菌 （3）既分裂也分化 （4）过滤 胡萝卜素分解 有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸

【解析】（1）在酒精发酵旺盛时，说明发酵环境是没有氧气的，而醋酸菌是好氧细菌，醋酸菌无法生存，所以此时即便存在醋酸菌也是不能把果汁中的糖发酵为醋酸。（2）工业中，果胶酶是由霉菌发酵生产的。（3）在植物组织培养过程中，若先使用细胞分裂素，后使用生长素，实验结果是细胞既分裂也分化。（4）采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤依次是：粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩。温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂往往有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸；萃取后需将原料中不溶于萃取剂的成分滤去。

【考点定位】利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用、植物的组织培养、运用发酵加工食品的基本方法

14．（1）1/3 缺氧、呈酸性

（2）刚果红染色法 发酵产纤维素酶

（3）无性繁殖 细胞分裂素和生长素

（4）水蒸气蒸馏 无水硫酸钠

【解析】

试题分析：（1）在葡萄汁装入消毒发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，其目的是使发酵瓶中留有一定量的氧气，让酵母菌早期进行有氧呼吸，快速繁殖，当氧气消耗完后进行酒精发酵，在此过程中因产生的CO 2溶于水，使发酵液的PH 越来越低，绝大多数微生物无法适应这一环境而受抑制，使得发酵液具有缺氧、呈酸性的特点。

（2）刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红—纤维素复合物就无法形成，据此可知：筛选纤维素分解菌，常用刚果红染色法。为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。

（3）一般的说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。但为了提高成功率，往往要添加植物激素，其中关键性的激素是细胞分裂素和生长素。

（4）玫瑰精油和茉莉油等挥发性强的芳香油，通常用水蒸气蒸馏法提取。提取茉莉油流程是：茉莉花＋水→水蒸气蒸馏→油水混合物→油水分层→无水硫酸钠→过滤→茉莉油，即A 、B 过程分别表示水蒸气蒸馏、无水硫酸钠。

考点：果酒的制作、微生物的培养与应用、植物有效成分的提取。

15．（1）氯苯 氮源

（2）乙

（3）显微镜 稀释涂布平板 >

（4）原核 核糖体

【解析】

试题分析：（1）为了获得能降解氯苯的微生物菌种，应选用以氯苯为碳源的培养液进行选择培养，在该培养液中，只有能降解氯苯的微生物才能生长，而其他微生物则不能生长。培养液中除含有碳源外，还应含有氮源、无机盐和蒸馏水等。

（2）依题意可知：微生物乙在含有氯苯的培养液中从实验开始到停止生长所用的时间较微生物甲、丙短，说明微生物乙分解氯苯的能力比甲、丙更强，所以应选择微生物乙作为菌种进行后续培养。

（3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以一般前者得到的结果大于后者。

（4）选定的菌种没有具膜细胞器如线粒体等，则该菌种属于原核生物。组成原核生物的原核细胞有核糖体，而核糖体是蛋白质合成的场所，所以该菌种产生的降解氯苯的酶蛋白是在核糖体上合成。

考点：微生物的培养与应用、原核细胞的结构与功能。

16．（1）氮源 生长因子

（2）平板划线法 稀释平板涂布法 灼烧灭菌

（3）检测培养基pH 的变化 脲酶

（4）S

【解析】

试题分析：（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源、生长因子和无机盐。

（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法和稀释平板涂布法两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是灼烧灭菌。

（3）土壤中分解尿素的细菌合成的脲酶可将尿素分解成氨，氨会使培养基的PH 升高，因此可以通过检测培养基pH 的变化来判断细菌是否分解尿素。

（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，因大试管的容积与所含有的培养物质的量一定，所以土壤细菌将呈现S 型增长。

考点：微生物的培养与应用、种群数量的变化。

17．（1）碳源 氮源

（2）pH

（3）高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌

（4）对接种环灼烧灭菌 相交（相接、相连、交叉等）

（5）酚红

【解析】

试题分析：（1）微生物的营养成分主要有：碳源、氮源、水和无机盐等。

（2）微生物的培养需要考虑温度、pH 和氧气等条件。

（3）培养基由于含有微生物生活所必需的水，所以只能用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种环或涂布器属于金属接种工具，可以用灼烧灭菌。

（4）平板划线法接种时，为保证每次划线都不能有杂菌污染，每次划线前都要对接种环灼烧灭菌；平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线相交（相接、相连、交叉等）。

（5）酚红指示剂可以检验尿素分解菌。

考点：微生物的分离和培养

【名师点睛】微生物的营养成分主要有：碳源、氮源、水和无机盐等。大多数微生物是异养生物，在培养微生物时需要满足其生长的温度、pH 和氧气等条件。常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法、干热灭菌、灼烧灭菌等。酚红指示剂可以检验尿素分解菌。

18．（1）豆腐上长出毛霉 加卤汤装瓶

（2）15～18 湿度 毛霉孢子

（3）抑制微生物的生长

（4）酒 香辛料

【解析】

试题分析：（1）制作红方的实验流程：①豆腐上长出毛霉→②加盐腌制→③加卤汤装瓶→④密封腌制．

（2）在实验流程①豆腐上长出毛霉中，首先将豆腐块平放在笼屉内，笼屉中的温度应控制在15～18℃，并保持在一定的湿度．5天后豆腐块表面布满毛霉菌丝，这些毛霉来自空气中的毛霉孢子．

（3）在实验流程②加盐腌制操作中，向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬．同时，盐还能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

（4）在实验流程③加卤汤装瓶用到的辅料中，卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。 考点：制作腐乳的科学原理及影响腐乳品质的条件

【名师点睛】腐乳的制作：

1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉．毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。

2、传统的腐乳制作过程中，豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子；而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量。

3、腐乳制作过程中，加盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬和抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

4、卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，酒的含量一般控制在12%左右，若酒的含量过高会延长腐乳成熟的时间，若酒的含量过低，则不能抑制杂菌污染。

5、装瓶时，操作要迅速小心．加入卤汤后要用胶条将瓶口密封，封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。

19．（1）干燥 不适合 水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出 纸层析 标准的胡萝卜素

（2）时间 水浴 滤去不溶物

（3）稀释涂布平板法 灭菌（防止杂菌污染） 碳源 氮源

【解析】

试题分析：（l ）提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和干燥．由于水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出，所以胡萝卜素的提取不适合用水蒸气蒸馏法提取．鉴定胡萝卜素的方法是纸层析法，需要用标准的胡萝卜素样品作为对照。

（2）胡萝卜素不是很稳定，温度过高、干燥时间过长会导致其分解，因此干燥过程应控制好温度和时间，防止高温分解胡萝卜素。萃取过程中宜采用水浴方式加热以防止温度过高。萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是将原料中的固体物滤去。

（3）酵母菌有两种接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法接种。接种时要严格灭菌，避免混入杂菌，故接种时需要先灼烧接种环。蔗糖含碳作为碳源，硝酸盐含氮作为氮源，因此

培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌提供碳源和氮源。

考点：从生物材料中提取某些特定成分

【名师点睛】胡萝卜素的化学性质稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等脂溶性有机溶剂，常采用萃取法提取．胡萝卜素的提取流程为：胡萝卜-粉碎-干燥-萃取-过滤-浓缩-胡萝卜素．影响酶活性的因素主要有温度和pH ；种微生物常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法。

20．（1）有氧呼吸 无氧呼吸

（2）需氧型 糖 乙酸

（3）碳源、氮源、水和无机盐 高压蒸汽灭菌法 平板划线法、稀释涂布平板法 18～25℃

【解析】

试题分析：（1）果酒的酿造原理是先使酵母菌进行有氧呼吸，以增加酵母菌的数量，然后再通过密封无氧呼吸获得果酒。

（2）过程②为生产果醋过程，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

（3）培养基包括碳源、氮源、水和无机盐等基本成分；原料称重溶解后，需调节PH ，然后进行高压蒸汽灭菌操作；微生物常用的接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法；酵母菌生存的适宜温度是18～25℃，因此培养时，温度要控制在18～25℃。

考点：酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋

【名师点睛】酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

21．（1）洗涤剂

（2）水蒸汽蒸馏法

（3）植物 微生物的发酵 萃取法 胡萝卜素易溶于有机溶剂 过滤 纸层析法

【解析】

试题分析：（1）若以花菜为实验材料，进行DNA 的粗提取与鉴定实验，为了使花菜细胞破碎释放DNA ，应加入一定量的洗涤剂和食盐，进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

（2）因玫瑰精油属于挥发性强的芳香油，所以通常采用水蒸汽蒸馏法提取。

（3）工业生产上，提取天然β—胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的岩藻中获得，三是利用微生物的发酵生产。因胡萝卜素易溶于有机溶剂，所以从胡萝卜中提取胡萝卜素常用萃取法，该方法的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩。提取的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行鉴定。

考点：DNA 的粗提取与鉴定、植物有效成分的提取。

22．（1）纤维素酶和果胶酶 （单答果胶酶给分，单答纤维素酶不得分）

（2）1/3 橙 灰绿

（3）醋酸（杆）菌 高压蒸汽灭菌 30～35

（4）氧气充足（有氧）

【解析】

试题分析：（1）果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，在果汁加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊，因此在果汁加工过程中，为提高出汁率和澄清度，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。

（2）鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，其目的是使发酵瓶中留有一定量的氧气，让酵母菌早期进行有氧呼吸，快速繁殖，以增加酵母菌的数量，当氧气消耗完后进行无氧呼吸产生酒精。在酸性条件下，橙色的重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。

（3）过程乙是醋酸发酵，使用的菌种是醋酸（杆）菌；在纯化菌种时，常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌；醋酸菌是一种好氧菌，在氧气充足的条件下才能进行旺盛的生命活动，醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，因此在果醋的制作过程中，需将培养温度控制在30～35℃范围内。

（4）当氧气充足、缺少糖源时，醋酸（杆）菌可以先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 考点：果酒和果醋的制作、微生物的培养与应用。

23．（1）单核期和双核期 材料的选择 培养基的组成 镜检 醋酸洋红法

（2）70%的酒精

（3）先使用生长素，后使用细胞分裂素 胚状体

【解析】

试题分析：（1）被子植物的花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段。诱导花粉植株能否成功受多种因素的影响，其中材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素。选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用方法有醋酸洋红法。

（2）接种前，通常用体积分数为70%的酒精和质量分数为0．1%氯化汞溶液对花蕾进行消毒。

（3）为了有利于细胞分裂而不分化，两种激素的使用顺序为：先使用生长素，后使用细胞分裂素。花粉植株产生的途径有两种：一种是花粉分化形成愈伤组织，另一种是形成胚状体。 考点：植物组织培养技术。

24．

（1）醋酸洋红法（1分） 单核 完全未开放

（2）愈伤组织

（3）酚红 刚果红

（4）设置未接种的空白培养基在相同的条件下培养 空白培养基上没有长出菌落

【解析】

（1）确定花粉发育时期最常用的是醋酸洋红法，对于不易着色的是用焙花青-铬矾法。一般来说在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧。为此通常选择完全未开放的花蕾，成功率最高。

（2）花粉形成植株有两条途径，一是通过胚状体，而是通过愈伤组织两种途径，这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于植物激素的种类及配比浓度。

（3）以尿素为唯一氮源的培养基上加入酚红指示剂，如果指示剂变红说明含有能分解尿素的细菌。如果以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料，出现透明圈可以确定含有纤维素分解菌。

（4）检测培养基是否合格应设置未接种的空白培养基在相同的条件下培养，如果空白培养基上没有长出菌落，说明培养基制备成功，否则需要重新制备。

【考点定位】本题考查植物组织培养和微生物的分离相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

225（1）1:4（1分） 水蒸气蒸馏 使油水分离 无水Na 2SO 4

（2）醋酸洋红法 MS固体 （3）胚状体 培养基中激素的种类及其浓度配比

【解析】

（1）盛花期的玫瑰花含玫瑰精油的量最高，在用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油时，玫瑰花瓣和清水的质量比是1：4；玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易容于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，玫瑰精油的提取宜采用水蒸气蒸馏法提取，所得到的是油水混合物需要利用分液漏斗将其分离；为了是油水分离，通常加入一定量的NaCl ；为了吸收其中水分，还要加入无水硫酸钠。（2）若进行玫瑰的花粉组织培养，为了确定花粉时期最常用的方法是醋酸洋红法。若进行玫瑰的组织培养，则需要制备MS 固体培养基。（3）花药中的花粉可以通过脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体再将其诱导分化成植物体，两条途径主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。

【考点定位】从生物材料中提取某些特定的成分、植物的组织培养

【名师点睛】解决本题需要熟悉以下需提供基础知识：

（1） 玫瑰精油的提取采用水蒸气蒸馏法，油水分层后可用分液漏斗将油水分开；

（2） 薄荷油和玫瑰油均容易挥发，可采蒸馏法提取；

（3） 盛花期的玫瑰花含玫瑰精油的量最高，在用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油时，玫瑰花瓣和清水的质量比是1：4。

26．

（1）灭菌 倒平板

（2）选择 脲酶（催化尿素分解的酶）

（3）需要（1分） 判断培养基是否被杂菌污染

9（4）2．4×10 当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落

【解析】

（1）用稀释涂布平板法统计的菌落数，制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL 后，还要进行灭菌和倒平板。

（2）该培养基中含有尿素为唯一氮源，是选择培养基，提供氮源的是尿素，细菌体内有脲酶，能利用尿素。（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时需要设置对照组，主要用于判断

培养基是否被杂菌污染。（4）1毫升原土壤样液中上述微生物数量=（180+220+320）

69÷3×10×10=2．4×10个，用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低的原因是培养基上的菌落可能是由两个或多个细菌形成的。

【考点定位】微生物的分离和培养、培养基对微生物的选择利用

【名师点睛】解答本题需掌握：

1、培养微生物时，培养基中需要加入碳源、氮源、无机盐、水，还需要满足微生物生长对PH ，特殊营养物质以及氧气的要求．如培养乳酸菌需要加入维生素，培养霉菌需要把PH 值调到酸性等；

2、能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N 源，进一步利用，只含有尿素作为N 源的培养基对微生物具有选择作用。

27．

（1） 随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后不再增加

（2）防止玫瑰精油随水蒸气挥发而流失

（3）压榨 提高出油率

（4）萃取 反

（5）甲

【解析】

（1）玫瑰精油提取过程中，当原料量等其他条件一定时，提取量随随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后不再增加。

（2）提取玫瑰精油的过程中为防止玫瑰精油随水蒸气挥发而流失，需进行冷却处理。

（3）橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用压榨法提取橘皮精油，其中将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡的目的是提高出油率。

（4） 胡萝卜素易溶于有机溶剂，从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是萃取法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成反比。

（5）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，右图为鉴定结果示意图，由于乙是标准胡萝卜素样点的位置，则甲、乙中属于胡萝卜素层析带的是甲。

【考点定位】玫瑰精油、橘皮精油、胡萝卜素的提取

28．（1）不宜 青蒿素不易挥发且对热不稳定

（2）粉碎 干燥温度 青蒿素分解

（3）直接 基因 自动结束生命

【解析】

试题分析：（1）水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出，所以水蒸气蒸馏法不适用提取青蒿素。

（2）由于青蒿素易溶于有机溶剂，不溶于水，从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用萃取法，并且通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和干燥，以提高效率；干燥过程应控制好温度和时间，以防止青蒿素分解。

（3）青蒿素是从野生植物黄花蒿中提取，作为一种治疗疟疾的药物，属于直接价值。细胞凋亡是由基因所决定的细胞自动结束生命的过程。

考点：从生物材料中提取某些特定成分

【名师点睛】对于脂溶性植物色素，一般不溶于水，易溶于酒精、乙醚和氯仿等有机溶剂．故常用有机溶剂萃取该类植物激素。提取过程：植物材料→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→鉴定。

29．（1）碳源氮源

（2）不需要不属于

（3）平板划线法和稀释涂布平板法

（4）琼脂加盐腌制延长

【解析】

试题分析：（1）豆腐块能为毛霉提供水、无机盐、碳源和氮源等四大类基本营养物质。

（2）民间制作腐乳不需要灭菌，若发酵好的豆腐上布满了菌丝，则这些菌丝不属于同一物种。

（3）分离和纯化微生物最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

（4）该流程中扩大培养时使用的培养基与毛霉菌种分离时使用的培养基最大的区别是后者培养基为固体培养基，其中加入了琼脂．当豆腐坯接种孢子悬浮液经培养长出菌丝后，对豆腐坯进行的A 处理是加盐腌制．腐乳在制作后期装瓶时可加入酒和多种香辛料配制的卤汤，酒的含量控制在12%左右，若酒的含量过高会导致腐乳的成熟时间延长，若酒的含量过低会导致杂菌污染。

考点：微生物的分离和培养；制作腐乳的科学原理及影响腐乳品质的条件

【名师点睛】1、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、腐乳的制作

（1）原理

①腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。

②毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。

（2）腐乳发酵中杂菌的控制

①事先用馒头放在温暖潮湿处培养毛霉，当馒头上长出青点（青霉菌落）、黄点（黄曲霉菌落）、红点（红曲霉菌落）时，及时用镊子和解剖针剔除，保留白毛让其生长黑色孢子。 ②消毒：将豆腐块加热，杀死表面的微生物，防止其他微生物的干扰。

③接种：将上述馒头上的孢子弹在豆腐块上，并用灭菌后的食品袋罩上，放在适宜的温度下培养．

（3）配制卤汤时酒量的控制：加酒的目的之一是杀死微生物．如果过少，达不到杀死微生物的目的，导致豆腐腐败；若过多，不但杀死了微生物，而且会因酒精度过高抑制了酶的活性，从而影响腐乳的成熟，同时还会因酒精含量过高而影响腐乳的风味．一般应控制在12%左右．

提醒：腐乳制作过程中盐、香辛料、酒精均可起到抑制杂菌生长的作用，由于越接近瓶口，微生物污染越重，故豆腐加盐时，越近瓶口处盐用量越多。

30．

（1）既要增大微生物与粮食中有机物的接触面，又要有一定透气性便于接种发酵和蒸馏 消灭杂菌（消毒灭菌） 使淀粉分子在高温下破坏分解有利于微生物利用

（2）防止温度过高烫死酒曲中的酵母菌等微生物 接种菌种

（3）18-25℃ 适宜温度

（4）该温度为酒精的沸点 水

【解析】

（1）酿酒前对粮食适当粉碎成小颗粒状态，可以增大微生物与粮食中有机物的接触面，可以增加透气性，便于接种发酵和蒸馏。温蒸汽条件下蒸一段时间，可以消灭杂菌。淀粉属于多糖，通过糖化，将其分解为小分子，有利于微生物的利用。

（2）温度过高会烫死酒曲中的酵母菌等微生物。

（3）酵母菌的最适生长温度为18-25℃左右，因此密封后将酒缸温度保持在18-25℃左右。

（4）蒸馏法获得酒精，主要让酒精挥发出来，蒸馏的温度应控制在78℃，说明78℃为酒精的沸点。蒸馏出的原浆酒酒精浓度高达95％以上，可以用水稀释酒精的度数。

【考点定位】酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋

【名师点睛】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：