胶体金法检测胃幽门螺旋杆菌(HP)抗体的临床应用
[摘要] 胶体金法检测胃幽门螺旋杆菌(H.pylori Antibody rapid Test,HP)定性检测试剂盒(胶体金法)采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术来定性检测血清或血浆中是否含有抗幽门螺旋杆菌抗体，可用于临床辅助诊断消化道胃幽门螺旋杆菌感染。
[关键词] 胃幽门螺旋杆菌； 胶体金法； 临床应用
[中图分类号] R378 [文献标识码] B [文章编号] 1005-0515（2012）-01-256-01
胃幽门螺杆菌(H.pylori Antibody rapid Test,HP)是专性生存在人类胃黏膜的病原菌，是慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的重要致病因子之一，是人胃内唯一能够产生大量尿素酶的细菌。因此，检测人血液样本中是否存在胃幽门螺旋杆菌尿素酶抗体是判断病人是否感染胃幽门螺旋杆菌的重要依据。
1 对象与材料
1.1 研究对象 体检健康组：在本院体检中心体检健康者420例，其中：男性：200例；女性：220例，年龄18-72岁。临床患者组：在本院就诊的门诊及住院患者45例，其中：男性：22例；女性：23例，年龄22-75岁。
1.2 采集与保存 利用胶体金法技术定性检测人胃幽门螺旋杆菌抗体可用人血清、血浆或全血。全血检测：由静脉抽取全血，将全血样品加入有抗凝剂(EDTA,枸橼酸及肝素)管中，混匀。全血应立即检测或保存在2-8℃下，但不得超过3天。血浆检测：由静脉抽取全血，将全血样品加入有抗凝剂(EDTA,枸橼酸盐及肝素)样品收集管中，离心分离血浆。小心将血浆吸出直接用于检测，也可在2-8℃冰箱内存放2周，或在-20℃冰柜中冷冻至一年。血清检测：采用静脉血3ml将全血放入试管里(内无任何抗凝剂)，等待血液凝固，离心分离血清，3000rpm，5-10分钟，小心分离并取出血清，血清样本可直接用于检测，2-8℃可保存放14天，-20℃可保存1年。
1.3 方法与试剂 手工操作法。胃幽门螺旋杆菌(H.pylori Antibody rapid Test,HP)定性检测试剂盒(胶体金法)。
1.4 试剂的主要成份 试剂主要由塑料片材、包被了抗人抗体的硝酸纤维素膜、包被了幽门螺杆菌抗原-胶体金结合物的聚酯膜、滤纸、玻璃纤维以及外面的塑料盒组成。
1.5 测定原理 胃幽门螺旋杆菌尿素酶抗原及其单克隆抗体分别固定于硝酸纤维素膜，并和包被有胶体金标记的胃幽门螺旋杆菌尿素酶抗原的玻璃纤维纸片及其他试剂组成。应用胶体金免疫层析技术，采用双抗原夹心的原理检测人血清/血浆/全血中的胃幽门螺旋杆菌尿素酶抗体。检测时，将血清/血浆/全血标本滴入试剂盒加样孔(S)内，血清/血浆/全血标本与预包被的胶体金颗粒结合的H.pylori抗原反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。等待紫红色条带的出现，测试结果在10-20分钟内读取。
2 检测结果判断
2.1 阳性 质控线(C线)和检测线(T线)各有一条红色线条出现。表明样本中存在胃幽门螺旋杆菌尿素酶抗体。
2.2 阴性 只有质控线(C线)有一条红色线条，而检测线(T线)无红色线条出现。表示样本中没有胃幽门螺旋杆菌尿素酶抗体或胃幽门螺旋杆菌尿素酶抗体低于检出水平。
2.3 无效 质控线(C线)无红色线条出现，表示失效。可能是由于操作不正确或试剂盒失效，此种情况应重新测试。
3 讨论 在健康体检者的420例测定中，检出胃幽门螺旋杆菌(H.pylori Antibody rapid Test,HP)阳性的71例占16.9%。在本院就诊的门诊及住院患者45例检测中，检出胃幽门螺旋杆菌(H.pylori Antibody rapid Test,HP)阳性的8例占17.7%。经健康体检者与门诊及住院患者比较差异不显著，提示健康人群与患者的HP感染率相近，而在感染过程中可能由于各种因素如发生基因变异或机体免疫力下降使部分HP具有致病力。胃幽门螺旋杆菌(HP)是从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜分离的一种革兰氏阴性杆菌，一般情况下定植于胃黏膜，经数周或数月引发慢性胃炎、浅表性胃炎、数年或数十年后发展成十二指肠溃疡、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡、淋巴增生性胃淋巴瘤等疾病，并且是胃腺癌与胃淋巴瘤的诱发因素之一。HP在胃黏膜繁殖后，能产生丰富的尿素酶，有极强的分解尿素的作用，尿素分解后产生的氨对黏膜产生毒性作用，致使黏膜损伤，破坏胃黏膜。
胶体金法检测胃幽门螺旋杆菌(HP)抗体，优点是用血清/血量少、方便、快捷、操作简单、不受条件的限制，特别适用于大批量体检，便于在基层医院推广使用。
参考文献
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