李萍[紫外线杀菌试验]
紫外线杀菌试验
生物科学121 李萍12640112
一、实验目的
1、了解紫外线的杀菌作用原理。
2、学习紫外线杀菌试验方法。
二、实验原理
1)紫外线杀菌属于射线杀菌的一种 ;
2)杀菌波长240nm-280nm,265nm-266nm 范围最强,此范围与DNA 吸收光谱一致;
3)其杀菌机制:短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。不同的菌,紫外线的杀菌时间不同 ,杀菌的效果不同。不同的菌,紫外线的杀菌时间不同,对于一般的细菌只要很短的时间,对于有芽孢的菌,它本身抗逆性非常强,因此杀灭的时间会相对更长一些
4) 特点:杀菌作用强、穿透能力很弱、适用于空间消毒和表面消毒
三、实验材料和用具
培养24-48h 的大肠杆菌
5皿牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 接种环 酒精灯 紫外灯
四、实验步骤
(1)制平板---取无菌平皿5个,将已熔化并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中,使冷凝成平板。
(2)标记---在平板底部标记姓名、日期、班级、实验室号及紫外照射时间(30s,60s,90s,120s,150s)。
(3)接种---用接种环取细菌密集接种于培养基上。
(4)紫外线处理---将紫外灯光开灯预热3min 。再将上述平皿置于紫外灯下, 将平板按照时间顺序在紫外灯下方摆成一排,并用平皿盖遮住细菌涂布面的一半。
(5)培养---每隔30s 取出一块平皿,放入37℃温箱中孵育18-24h , 注意事项
1. 在使用过程中,应保持紫外灯表面的清洁。
2紫外线对皮肤和眼睛有损伤作用,应注意防护。
五、预期结果:
1. 盖子盖住的琼脂表面,可见大肠杆菌形成的菌落。
2. 直接暴露于紫外线下的琼脂表面无菌生长或只有少量菌生长,且随着照射时间的延长,杀菌效果越好,残余菌越少。
六、实验结果及分析
结果分析: 紫外线对微生物有强烈的致死作用,其杀菌机制是短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。五皿培养皿左半边为无皿盖,右半边为有皿盖,由图可知,从30s-150s ,所长菌从多到少,但长得都较多。紫外灯照射时间不同,效果不同,30s 下,紫外灯照射对菌生长无明显影响,长的菌都较多。随着时间增加,紫外灯照射对菌生长有了抑制作用,起到的杀菌效果增强。从设置的时间上看,90s 后效果开始明显。对比有盖和无盖,当紫外灯照射相同时间,无皿盖的菌长的比有皿盖少。说明有盖能减弱紫外线对菌的杀菌作用,但从150s 下的那个皿可以看出,紫外灯对菌杀菌作用即使在有皿盖保护情况下,也会随着时间增加而增强。
总而言之,紫外线杀菌,且随着照射时间的延长,杀菌效果越好,残余菌越少。加皿盖能削弱紫外线对菌的杀菌作用。
不足点:
1、虽然已经能看出结果,但不明显,接种的菌还不够多,可利用涂布法进行改进。
2、设置的实验组不够多,应适当增长紫外线照射时间。