部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究
药物析分杂 志
,
一
部分
马 兜铃科 药 材 中马 兜 铃
酸跃华
周’
,
的含测量定研 究
’ ,
周
娟
’
,
黄莎
莎,
,
,
玉伍娥 ,
,
王
杜野 曦 路晓 才金
,,
,
’“
国 家食 品 药 监督品 理管局 药 品审评中 北 京心四 川
大 学 华 药西学院 成
都四川 省 药 品检 验 所 成
都沈 阳药科
学大沈 阳
摘
要
目 的
在 有已文 献 报道 的 基 础 通 过上比 较研 究 一 步进优 了 实化 验条件 立 灵 敏 建度 重高现 性 的好马 铃 兜
酸
、,
,
,
、
量 测
含谱柱色
·
定方 法 并 对 分 部 马铃 科兜 兜马 铃 属细辛 属 的 药材 中 马兜 铃 柱 酸测波检
长,, ,
的
含量 行进测定 至
一
。
方法 采 用 效高液 色谱 相
法一
。
流动相
林碳 钱 用酸稀 盐 酸调
进量样在
二
睛
,
乙,
流
二
一
速’
柱温
二
℃
。
结 马果兜铃 酸
围 内范性 线关系 良 好 回归方 为
。
、程
,
法 的方回 收率
,
为结
论建立 的 含 量测定 方法 准 确 灵 敏专属 性 强 现重,
,
性好、为 含 兜马铃
,
的 酸药材 及制 剂 的 量 控制质 研等 究提 了 供 可借 供 鉴的实验 方 法 同时 检 测 结 也 为果相 关 马 兜 铃科 药 材。
的 合
理使 用提 供 了 考参关
词键马 兜铃酸
含
量 定测 效液 相高色 谱法文献
标码 文识章编 号一
一中
分 类 图号
一
一
一,
,
,
一
,一
,,
一
,,
一
,
,
,
二
,
贾
盯,
,
,,
,
一
,
,
一
【,
、
林
一
】
一
·一,
℃
,
,
叮
,
,
马兜铃 酸
主存要在 马于铃兜
。
木通 药 标用准 通的知 》禁止 关 通木 药 在 材 市 场 流 通 中上成 处 药 中 含 方 的有 关木 以通木 替换通
,
,
科 的
马 兜铃属 和 细 辛属 物植中
辛细 种
属。
据不
全统完 中
,
计,
国法 定药 标材 收准 的载 马铃 属 兜中 药 材 有共 巧 种
年
以月国药 监注
」
,号
文 发 布 关 于《加 强
,
国 、食 品家药 品 监 督 管 理局 在
年
防己等
种 药
及 其材制 剂 监 督管 理 通知 》 取消
广
月 以 药国监 仁注第一
作者
〕
号
文发 布 《关 于 取 关
消一一
防
己 和 青 木香的 药用 标 用准防 己 土木 香 分 别 换替
嗒
一
、
药
分析物杂 志,
、,
,
广防 己 青 木香 同 时规 定 含 兜马铃 寻 骨风 仙天藤 朱
砂 莲 的中 药 剂 制严格 按 处 方管 理药 目 除前
国了家 令禁 明止使用 的 关 通木、
、
、对
照 适品 量 加甲 醇制
成得
。
即,
林
·
一
’的
液溶
,
,
、
、
“,
防
己 青香外 细
木,
、
供试
品溶
,液,
取 宜 宾防 己粉碎
一
过,
一,
,
号 取筛, ,
辛 马 兜
铃
天 仙 收藤 于 载 国中 典药,
版一年部
,
,
精称密定 精 加密 人 醇尹,
酸,
,,
, 寻骨风 收载 卫于生 部标部准 中药 材 第 册 一其
品种余收载 于各地 地方 材标药 准 作 为方地 用习药
。
材称
重 定 量 加热 流回醇
液
,
一
放 冷称再定 重量 用
,甲
甲酸
。 汉
·
补
足 减 的 垂 量失摇 匀 滤 过 取续滤
一
使
用
离’心
。
取 上液清即 得
,
。
含
马 兜 铃酸 的 药中 材大部 分 已 有 兜马 铃酸 含量
定测方 法文献的 道报 但较少 对 量 测含定 方法 进行 全 面 系 的考统察 定力 法主 要 有法多 一
’
。、
一
实 验条件 的 定确
,
色 谱
条 件的 确定马
兜铃酸
,
。
前 文目 献 道报的 马 兜铃 酸 含 测
￡
【
量
测定波 长 的 选
择一
取 马兜铃 酸
法
川
’一’
、
法一
、对 照
适品 量 乙以睛
碳
酸 溶 液钱用 稀盐 制 成 一定浓 的对 照 度品
,
溶毛 细
管电泳 法、
其等中 以,
,
应法用 法
,最
酸
调至
一
本
究研以宜 防宾 为代己药材表采用
,
在液在
,
,
波 长
范 围 进内 行 光 扫 描 谱别
分,
以
分度 最离 低测 检 限及定 量 限 为指 标 对 流 相 进动
,波
长处 吸 有收 中
,
其
,
,
行
考
对察样 的品前 处 方理法 和 件条 行 了进 究研“
,”
,
最 大为 收吸波 长 选 择故
测的定 波 长。
作
为 马铃兜酸
并
按 中 照国药
典
年 版,一 部 附录新 增的 药中 质进 行含了量 定测
标量 分 准析 方法 验证 指 导 原 则
流动相 的 筛选
对
已有 文 献报 道 的 流动 进相
一
一
法方学证验 以期 建立 具有较 好测 检 敏灵度 重和 现性 的含测 量定 方 铃酸法、
。
行综 合
分析选 定 比 较 试
①验乙
睛一
,
种用 较应为
泛·的流 动相 进
行此外
对部药分 进行材了 马兜。
,
’
磷
二 氢钠溶酸
液
的含量 测 定以考察 该方 法 适 用的 性
,
用磷 酸调水
一至
。
至
乙②睛
采用 马 兜 铃
酸
一、
仪 器
试及 样 药
碳品钱溶液 用酸稀 酸盐调
,③甲
对
照品 定 量
高效限液 相 谱 仪
检色测
器
,。
紫外
醇
一
醋酸
,
,谱工色作 站 北 普 析 京通
溶
液对 醇 溶
液种 流
相 的检动测 限 信 噪比
林法·
仪用有 器 责限 任 公 司 外 可紫见 分 光 光 度
马仪兜铃 酸
信噪 法 比进行 考察 采 用 马兜 铃 酸混 合 对 品照甲 一
’
对
种 流
动 中相 马兜酸铃。
对 品 照批
号
,
一、
购购于 国美
马、 兜酸铃,
的
离度分行进察考 的测检限
、为
结果 流相动
,
,于 中国
品药 生 制物 检品 定 所 马兜铃 酸 混合 照 品 含对兜 马 铃
酸
、
兜马铃
,酸 ,
马①兜铃 酸 马铃兜酸
品 中 马铃兜酸
量定 限为在 样
流动
相兜铃酸马
的分离度
为
,公 司 醇 乙 甲睛 为色 谱纯 其他 试剂 均 分为析
宜宾 纯防 己采 四 川 于 省宜 宾地 区 琪县 经 川四省 食品
品药 检所 验主 任药 师 黎 跃 成鉴定 为 马兜 铃
科与 相邻 峰的分 度 离为的检
限 测
、
②为马 兜 铃酸,
定限量为 样
在流 相动在样 。
马 兜酸
铃马
铃兜酸
的分 离度
为,
植
物川 南 马 兜
铃人
。
。 品中马 兜 酸铃
与 相
邻 的峰分 离 度为
检的测限 为
、的
燥 根干、
其 他
试、
③ 马 兜
铃酸,
定 量限为 后最
至
验 样 品 分别来 源 于四 川省 食 品 品 检 药验所 标 本 室四 川
大 华 学 西药学 院 标本 乐 室山 市药 检品 所 标验本 室 西广壮族 自 治区药 品 检验 所 花 荷 中池药材 专恤 、
马兜
酸
一铃
马兜
铃酸
分的离为度
品 中
兜铃 酸马
与 邻相峰 分 离的度 为 。
、
、
确定
乙以睛
碳酸铰溶
液 用稀 盐调酸为流动
市场相
等。
试验 用 药材 样 均 品 黎经跃 成 主 药任师 定
鉴
,〔
。
色谱 条件
品样前 处理 方法 的 确定
谱色
柱协
取 溶提 剂 的 察
号筛考 取,
取
宜 宾防 己碎粉过
,
流 动,
相
碳一酸钱 溶 用 液盐 酸 调
,稀
至
,
甲
密 称 定精分 别采 用 不 同 溶 剂 「的,
、
乙
睛流速
。
·
一
’
测检
波醇
一甲
酸
、、
‘
醇甲甲醇
一
一
甲一
、酸
甲
一醇
、
长
柱温 溶液
制
备兜马酸铃
℃
乙 醇
三 氯 甲烷
一
醋
酸
一
、甲
醇
水
,氯二 甲
甲醇
烷醋酸,
进
〕 行
考照 对品 溶液
精 密
称 取 马 兜 酸铃
超察处声理
,功
率频率
按
药物
析 杂 志
分“”
,
一
项 色谱下 条 进 件 行测 定结 果 马 兜铃 酸 ,
含
,量 ,
溶品液
各
,林
,
按
“
”
项下 谱色件进 行条 定测以 ,
,
分
别
为,·
,
,,
对
照 品 的 样 浓进度 为 横 坐标 以 应 的对峰 面积 为 纵 坐
标得 峰出 面 积与进样 的量线性 关 系回 归 程
方,
一
’。
结
果 表 以明 醇甲,
一
酸
甲、
三
氯 烷甲
一
,
甲醇
一
醋酸,
为提取溶
一
为
,
,
的剂 测 结定 果 高 故最 察 考 取 提 法方时 选 择甲醇
酸甲
和 三 氯烷甲。
一
甲醇
醋酸
,
巧
同
,
线性
范 围
重为 复 性 考
察
一时进
行 比较号筛 取
,
表取
宾宜 防 粉 己 过碎,
,
号
筛
,取
提取方 的考察
法, ,
取 宜宾
防 己 碎粉过
的取提 剂 及 溶 提
,
取份
取 量样在
,
,
一
,
范围
内
“按”
,
“
”
项 精称密定按表 “
下
的方法 制 备 试 供品 溶 按
液项下
色谱 件进 条为
方
进法提行取按
,,
”
项
下 色谱 件条进 行 测定 结果 的 方的 测 定结一
,
行测 定 结 马 果兜 铃 酸
·
含量取
,
表
明 采 用式 索 提 取和加 热回
流,
一
’
,
重为现 考 察性、
。 测法定 结 果 无明显 差 异 声 处超 理
取宾 防 己 宜 四在川 省药检
“所”
果偏 低 甲
醇
酸,
一
酸甲
,和
三氯 烷
。
甲
甲醇
一
醋
中
药室 实 室验四 川 大 学华 药西 学院 实 验 室和沈 阳 医
大学实科验 室 分 按
别
提取结,也果 无显明差异
一
考 虑三到氯
项
下 的 方法 制 备 供。
甲
烷毒性 较 大 最 后选 定以 甲 醇
表甲酸
。为
提 试品液 溶按,
“
”
项 下 色条 谱件进 行测 定
, ,
果结马
取 溶·剂 采 加 用 回热 流方的法 进 提行
取 不同提取 方法的 考察 结果
《兜取铃酸 平均 ·
量 含分别为
·
一
’
一
’
,
为
。
确 度 考准察
马 兜 酸铃 取 提法方一
取 已测
含量含量
,·
含量
甲
醇一
一
。
,
一。 。
。
。·。 。
。
一一
’
宜 的 防宾 己 样品 约”
份
平均 分为
,,
二, 抓 烷
甲一
醋酸
,
甲醇
一
。 二
一
酸甲一
「
。
,〕
几
,
,。
一组 组 每别分加 人 马 兜铃酸
“
,
对
品照 溶适液量 按
“ ”
、 〔
、
」《 毛
〕
项
下 的 方法 制供试 溶备液 按
。
项
下 谱条色
索
式 取
、提, ‘
,
进 行 件测定
为表
。
果 结 见
表,
平
加样 回 均收率
一
, 一
、、
。
。
·
加
回 收样试验 考 察结 果
加
热回 流 ,
卜一比
加
人 马铃 兜酸超
声 处卫【
一
,七‘
的
以
、,
平
均 收 率回,
《
。
、
,卿
味
‘
,,
‘ 、八勺、 气
乙 尹气了 「气
〔
【
提… 取 时 的间考察
取宜 防 己 粉宾碎 过
, ,
,号
取 筛约, ,
,
,
精,密称 精 定密 加 人醇甲,
一
甲
酸,
,
用耐性 试验 稳 性定考察 溶 浓液为
度林,
分 别 在不 提同 取讨 进间提行取
含按量, ,
, 密 吸 取 精 兜马 铃
酸·
照对 品 下项 谱
色
,而
“
,’
项 下 色谱
条 件
进哪,
, ,,
一
’
林
,
及试 品溶 液
供测行 定结果 兜马酸
,铃
。,
分
别
·为
,
分别在 和
,,
,
按
“
”
,
一
。’
结
果条件
进 测行
定
,,
计算峰 面 值 积的
别分
为表明
热加 流
回
,
,一
测 定果 结没有 明 的
显。
差。异 最 后确定 热 回加 时流 间
为流相 动比 的例 考察品
溶液 在 动 相流
取
同 宜 宾 一防己 供
方试学法验 证
碳酸钱
溶 液稀盐用酸
。调
线性
范 围的 察
量 加 甲醇 考制 成 度 浓
一为,
, ,,,
密称精 马兜取铃取酸
,,
适
,
,
至
时按“
”
一
乙 不睛 同 比
列
,项
色下谱 条 件 进 测 定
行 ,,
果结 马铃兜
·
,酸
,
,
,
含
量 分 别
为。
一
’
为。
,
,
,
,,
,
,
哪
·
一
’
的
系 列对照 溶 液
品。
精密
吸取上述对照
结 果
表明该 方 法 耐 用 较好性流 动相中 变 化 的 考 取 察同一宜 宾防
一
己供 品 试溶液 在流 动相,
药
物 分析杂志
,
碳
酸钱液溶,
一乙
睛
液溶 别分采 用不 色 谱柱
,
同,
不同
,,
·
·
,时
按 为
“
”
项
下谱色
,
,
林
条,件 进行 定测结 果 马兜 铃酸
一含 量
分 别为
。
。
林
,,
,
’结
卜
果按」 为
”“
项
下 色 条谱件进 行 测
,定
,
。
结 果 马
铃兜·
表
明该 方 法耐用性较好
,
。
酸
含
分量为别
二
。
。
一
’
酸铰碳溶液 浓 度 考察的液
在流动相 碳 钱酸 用稀 盐酸调 睛
时 按
的 酸钱碳不 同 浓度
“”
取 一同供 品试
至溶
,
果 结 明 表方 法 耐该 用
,
性一
乙
,
较
好
论结的 用 耐 性好较 样品测定
根据,以 上考察 的 结果 可 知 方法
该
。
项 色下谱条件进测行定
,
,
。
果 结马·
铃兜 酸一
量分别含 为为
。
’
。
。结表果明 该方法 耐
“用
’取药材 ,按
,
”项
下的 方法 制 供备 试 溶 品
液,
,
性 较好
按’项 下的 谱色 件 条 进 测 定行 按外 标法 以 峰面
不同牌品色谱 柱考察的
取同一 供 试 品
积 计表 样 算 品含量 结果 见
表
。
品样定测果
结
丁学拉名 一
名
称
样品 号
收
标 载
, ,准
〔 药 用位部
马
兜铃酸
一
含
量。
一
”
厉了 之
。〔
乙
冕
犷防己
,, ,「、 、,
四川
省 中 药材 标
准
周或根块 根
〔 ,
。
,
, 》。
即
乙乙‘人
,
四川川省 中 材 药标 准,
根或
根块
。。
一川四省 中 药 标 材准
,或 根块
根
。 〕
一
川 四 中 省 材 药标准 一
根 块或根
一
川
,
了 （〕
训
玉
,
淮
通四川省 药 中材 标
准
,几
藤
茎一
一
四川省
中药 材标 准,
膝
茎四川
中药材 省 准标
藤茎一
。
,
词“几 臼
￡
‘
广元 己
群防
引四川
中省 药材 标
准
一,
根块 或
一
根。。、
,
】四
川省 中 材药 准
,
标
或根根
块
。
四川 省 中 药 标材准
‘
根 块或根
一
二。
,四川 省 药 材 标 准
中
以,
根
或 块
一根
一
川 省四 件 药 材标
准,,
根
或 块
一根
。
,
心
记一
八瀚,
优
宜宾
防己
目
四 川省中 药 材 准标,
根
或 块
根一
。一
’勿
。
‘
她
比 以
马
兜
中铃 国 典
药〕以
年
版一 部
果实 加
药 物分 析 杂
志
一,续表
一拉
学丁名
称
样名号品
载标收 准
一药用 部位
二
马兜 铃
含量酸
肠
用一
。
肠
湍
口寻
骨 风
川 省四中 材药 标
准增
补
版 地 分卜 部
一,耐
卫
生 部 部 标准
中药
材 第 一 册 罗
,
全草
口, ,
朱
砂
一
莲
川四 省 药 中 材 标准,
块
根
占门
祝‘ 岑
细辛北
中
国药 典
年
一版部
全草
《
闷
一
中国
典药一 即
年版
一
根 及根茎部
叶苔 辛细
四川
省 中药材标 准
增三版补
草全
,
,
一
四 川省中 材药标 准 增补
版 一,
一
全
草南 细 坪
一辛
四川〕 省中 药标材
。
‘
冷
,、
草
卜
却全门
已
君
乃
似
湘细 辛
石湖
南
二省〔
,
药
材标准
全,草
一
‘
‘遥
鳍
面
慈 姑山
广
酉中 材药 准
标 一
,一
邵
草全
的药 马材 铃兜 酸,
,
含量 相较 对高便 于 进 行方法
。,
学, 研究 故以 宜宾防 己为对象 进 行研究 人
,声
本 研 究
在查 阅 大量 国内外 文 献料 的 资基础 上以
马 兜铃酸
三
王
与马 兜铃
酸
的分 离 度马 兜 铃
,
、
酸 的 检测限 定及 量 为评 价 限指标 对
九 万 骊下几
丽‘
法定马
,测
石在
图
‘
兜铃
酸酸调
用 常
的,
种流 动 相进 行 了 比较研 究 研
一究
结
果 表明 流动相乙 睛
图
碳酸铰
液 溶稀用
的盐适应 性 较 好
。
材样 品 的药
值至
,
马兜铃
酸
对照
,
占、
冕
本研 究 对 品样 的 前 理处 方 进法 行了 较 全 面 的研 在 综究 合分 国析 外 内文 献 报道 所 用采 提 取 溶 剂
基 础 上的选 择
、
寸防己 ,
号样
品罗
,
目目
,
,
厂
元防
己
一
号样 品
荞‘ 辛
细北辛
细样 号
,
产品 号样 万
,
,
种提 取 溶 剂进 比较行研 究 同时 对
。提取
法方提取 时 进间 行了考 察酸
一
,
确定 以醇
一甲
一甲
淮通
宾宜己防马
兜 酸
铃号样 品日
,提取为 剂 溶加 热 回 流 提取
。为
样甲
醇
号 占
、
样
品的 前 理处 法
研方 结果究 表明 三氯 甲烷
醇
一甲
醋酸
一
水
,
的提取效、率 与 甲
一讨
论 研 究 采本 用的 宜 宾 防 己为 自 采 集 行 并经鉴 定
醇
甲
酸
基本 , 致 的一 他其 取溶提剂 提取
甲效
一醇
相 率 较 对低 考 虑 三到氯 甲
烷醋酸
一一
药
物分析志
杂,
,
的
性 毒 较 大 醇
,甲
一
水
,取提 杂的质 相较对一
功效 同 的 其相 他药 材代 以替 避免不 良 反应 的 发
,生
。
多故 进行 方 法 研 究学时 采 甲用醇 为提 取溶 剂
。
甲酸
梁,于 马 兜铃 酸
,在 马
兜 铃科的 药 材 中 相对较 的 含量
。
低或不 故 此含次 试验 未 测 定 兜马铃 酸
相 的同色 谱 峰 可 能有 杂 质 扰 干故
,,
由
于马 兜铃 科植 物所含 成 分
各 不相 同 保 时 留与马 兜铃间酸参考
文 献飞
在
对 不同 种属的 植物 进 行 含量 测 研定究 时 需对 色
仃
〕
,
』
,
歇
,
,
、
出
,
〔
,“
一
〕
谱峰
的 专 属性进 行 研 究 检测
器 马 对铃兜 此酸外还 采 用
铃 确认 酸 马 为兜 铃酸
,
。
本
试验 中 用采二极 管 阵
,
,列
一
‘
书
‘·
对
品 照及样 品 中 相 同 留 时保
。,
行
,
,
,
,
,
间 的色 谱 进峰行 了 谱光扫 描 确 认 二 者 的 一致
一
性￡
一
,
。
·
对法宜 宾 防 己样品 中 与 马兜
出,
一
一
丈“
对
照品相 同 保 留 时 间 的 色 谱峰进 行 了 考 察。
,
金 理
一
了
,
,
『
,」
,
,翎
‘拓
一 一,
样
品 含量 测 定结果 表 明 马 兜铃 药属 材 中马 兜
铃酸 、
“
龟
一,,
咭
张〕兰 翻 」,
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,含 的量 高 于细辛 属 药 材 以根 及 根 茎 人 药 含的 量较 高同一 植物 来
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崔晓
红‘
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马
兜 铃属 药材 马中 铃 兜酸
哀志芳
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飞
。,
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源不 同 的药用 部 位 可 都 含能有 马 兜铃
酸
其
材 及 其但制 剂 中 马兜铃 酸
〔
〔 、
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法测定
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药
分布情
有况待进 一 步 究
研
。
的
含
带尸
药物
析
」
马 分 铃兜 酸 急的性 毒 长性期毒 性 实 验研 究结 果
以 及 有 马含 铃兜酸 的 品药 临 床研 究 结 显果 马 示兜
,
、
志
杂
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姜
旭
丽 双
,由
,
一
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几
刊
心 〔。
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铃
酸 叮 起引 脏肾毒
性
一
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此 测次 定 用样 品 为均国家现
,
一
一
定不测 同了
二
吞
地‘
‘
行药中材 标 准 或 地 力 中 药 材 标 准 收 载 的品种 兜马铃属
,
青木香 和 细 辛中 马 兜铃酸
, ,
的,含量
种
药材 细 辛
属
,
、
种 药材 均 检
测 出 马兜铃酸
的量含
药杂 志
,
,
,
‘
一
,
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竺由
历于 史原 因 材 药标准 中 均 未规 定 兜 铃 酸 马
的
〔
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飞
‘
了
一
·
一
〕
控
制 标指 该 究研 建为立 药 材 中 马 兜 铃
、
酸
一一
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,
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,
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测定
方法及 定制合理 限度 定规 合 的理 材 药使用剂 量和 时间 提 供了 实验基 础 和 参 数考
,
据
,
卜付 水
吞
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, 万
赵、
·
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萍。
文
,陈
,
本验首试次 对 细湘 辛、
二
层 扫 描薄法 定 测龙胆 泻 肝 丸 中 当铃兜酸 的 含 景药 物分 杂 志析, ,
‘
,
,
苔叶 细辛
、
,
妇 慈姑
,
鳍
种已有 法
月一
一定
材标药准 的 马兜 铃 科 药 材 行 进 了 兜马铃 酸
的 ,
即仃
,
滩
,
含
量测定 为合用 理药以 及 相关 品 种 的 全安 评价 提
供
参 了依 考据
。
再 次并 实 证马 兜
铃 属植 物 中 有 含马。
,
,
,
之
〔,
兜
铃酸的 遍普性
除了 中 成 药 产 生中 应 尽量 避免使
,,
仃,,
,
用 马含兜铃酸 的 药 材 在地 习 方 药用材 的使 中用 也 充分应关 注 马含兜 铃 酸药 材 使的用 状 尽 况 量 用
改
文本于
三左
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