正交实验法优选鱼腥草胰蛋白酶抑制剂的提取工艺
【】 目的 研究 鱼腥草中胰蛋白酶抑制剂活性成分的最佳提取条件。 方法 以提取液对胰蛋白酶的抑制率为指标，采用正交试验法对提取温度A、溶剂用量B、pH值C、提取时间D4个因素进行优选研究，并以优选出的提取方案进行验证实验。结果因素B对提取效果有极显著的 影响 ，因素A、C均有显著的影响，因素D影响不显著。结论鱼腥草中胰蛋白酶抑制活性成分有效部位的最佳提取工艺为A1B2C3D2。 论文联盟编辑。 论文代写
【关键词】 鱼腥草 胰蛋白酶抑制剂 正交实验 论文代写
Abstract:ObjectiveTo optimize the extraction procedure for trypsin inhibitor from Houttuynia cordata Thunb.．Methods The inhibition rate of trypsin activity was used as screening parameter, we employed the orthogonal design method to test the effects of four factors, including temperature of extraction solution A, volume of extraction solution B, pH value of extraction solutionC and time of extraction D, on the extraction of trypsin inhibitor.ResultsFactor B performed the most significant effect on the extraction, and factors A and C came the next and factor D the last. ConclusionThe optimum extraction technology is A1B2C3D2 when the inhibition ratio of trypsin activity is considered as preferential parameter. 论文代写
Key words:Houttuynia cordata Thunb.; Trypsin inhibitor; Orthogonal design 毕业论文网
蛋白酶抑制剂protEinase inhibitor, PI是一类能够抑制蛋白水解酶活性的物质，广泛存在于动植物和微生物中［1］。其中胰蛋白酶抑制剂Trypsin inhibitor, TI具有重要的药用价值,对急性胰腺炎、肺气肿、抗休克、防治脑水肿和脑缺血等都有很好的临床 治疗 效果，还有研究表明对 HIV 和肿瘤的治疗也有重要意义［2］。因此，从传统中药中筛选具有TI活性的材料有很广阔的 应用 前景和市场价值。 论文代写
鱼腥草为三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的地上部分，具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋之功效，是临床应用极其广泛的中药之一［3］。本实验根据前期筛选的结果，利用鱼腥草为材料对从鱼腥草中提取TI的工艺进行优化，找出最佳的提取条件，为今后的 工业 化生产TI提供基础性数据。 论文网
1 仪器与试剂 代写论文
1.1 试剂胰蛋白酶 北京麒麟宏伟公司 、大豆蛋白酶抑制剂国药集团化学试剂有限公司、苯甲酰DL精氨酸对硝基苯胺BAPNA上海三杰生物技术有限公司、三羟甲基氨基甲烷、无水氯化钙、盐酸、三氯乙酸、氢氧化钠等为国产 分析 纯 鱼腥草。 毕业论文网
1.2 仪器可见光分光光度计7202B 、离心机LD4 、精密pH 计、水浴锅、精密 电子 天平FA2016N。 代写论文
2 方法 代写论文
2.1 鱼腥草中胰蛋白酶
抑制活性成分提取的正交实验设计根据 文献 ［4～6］及预实验结果，本实验采用双蒸水作为提取TI的溶剂。称取干燥的鱼腥草全草5 g，粉碎，在平行操作条件下，选用L934正交实验表进行提取实验，以胰蛋白酶活性大小为指标，进行9次实验，每次实验重复3次正交因素水平见表1，然后过滤并收集滤液，减压浓缩到100 ml。 表1 因素水平略 论文网
2.2 鱼腥草中胰蛋白酶抑制活性成分对胰蛋白酶的抑制率测定方法采用苯甲酰DL精氨酸对硝基苯胺BAPNA法［7］ 取胰蛋白酶液1 ml，加药材提取液1 ml在37℃水浴保温5 min，加入BAPNA溶液5 ml，37℃水浴保温10 min后，立即加1 ml三氯乙酸30%终止反应，用分光光度法在410 nm条件下测定吸光度。按下列公式 计算 样品提取液的抑制百分率 i=ArAbr AsAbsArAbr×100% 毕业论文
式中 i —抑制百分率 Ar —标准溶液的吸光度 Abr—含标准溶液的空白对照液的吸光度 As—样品溶液的吸光度 Abs—含样品溶液的空白对照液的吸光度。 代写论文