大剂量碘化油肝动脉插管化疗栓塞治疗肝癌的实验研究

·2084·%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%南方医科大学学报(J%South%Med%Univ)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%2009;29(10)

大剂量碘化油肝动脉插管化疗栓塞治疗肝癌的实验研究

吕良山1，马清涌2，刘亚民3（西安交通大学医学院第一附属医院1消化内科，2肝胆外科，3周围血管科，陕西西安710061）

摘要：目的评价大剂量碘化油经肝动脉化疗栓塞（TACE ）对兔VX2肝移植瘤生长及转移的影响。方法48只荷VX2肝移植瘤兔随机分成三组，每组16只。A 组为对照组：经肝动脉灌注0.5%ml生理盐水；B 组为常规剂量碘化油TACE 组（常规剂量组）：经肝动脉灌注5%mg%阿霉素与常规剂量碘化油的混悬液；C 组为大剂量碘化油TACE 组（大剂量组）：经肝动脉灌注5mg%阿霉素与大剂量碘化油的混悬液。B 组和C 组碘化油用量（ml ）分别为肿瘤体积（cm 3）乘以0.5和1。经股动脉穿刺插管，依分组情况行介入治疗，比较不同处理组肝移植瘤TACE 后2周的增长率、坏死率及肝内转移、肺转移的发生率。结果介入治疗前各组肿瘤平均体积之间无显著性差异（P >0.05）；介入治疗后常规剂量组及大剂量组肿瘤增长率明显降低（P

文献标识码：A

文章编号：1673-4254(2009)10-2084-04

Transcatheter arterial chemoembolization with high -dose iodized oil for hepatic VX2tumor in rabbits

L 譈Liang-shan 1,%Ma%Qing-yong2,%LIU%Ya-min3

Department%of%Gastroenterology1, %Department%of%Hepatobiliary%Surgery2, %Department%of%Peripheral%Vascular%Medicine3, %First%Affiliated%Hospital,%Xi'an%Jiaotong%University%College%of%Medicine,%Xi'an%710061,%China

Abstract:Objective To%evaluate%the%effect%of%transcatheter%arterial%chemoembolization%(TACE)%with%high-dose%iodized%oil%on%hepatic%tumor%growth%and%metastasis%in%rabbits. %Methods Forty-eight%rabbits%with%implanted%VX2%tumor%were%randomly%divided%into%control%group,%routine%dose%iodized%oil%TACE%group%and%high-dose%iodized%oil%TACE%group%to%receive%perfusion%through%the%hepatic%artery%with%0.9%%saline, %5%mg%adriamycin%with%routine-dose%iodized%oil, %and%5%mg%adriamycin%with%high-dose%iodized%oil,%respectively.%The%%tumor%volume,%tumor%necrosis,%intrahepatic%and%lung%metastasis%were%examined%2%weeks%after%TACE.%Results No%significant%difference%was%found%in%the%tumor%volume%between%the%3%groups%before%TACE%(P >0.05).%The%rabbits%receiving%TACE%with%iodized%oil,%especially%at%the%high%dose,%showed%significantly%reduced%tumor%volume%as%compared%with%the%control%group%(P

Key words:iodize%oil;%embolization；liver%cancer;%metastasis%%%%%

经肝动脉化疗栓塞（transcatheter%arterial%一［8-13］。本实验设计大剂量碘化油和常规剂量碘化油

chemoembolization,%TACE）已成为我国中晚期原发性

肝癌最主要的治疗方法。碘化油是目前最理想的栓塞剂，碘化油化疗栓塞被认为是肝癌TACE 的标准方案［1-7］。碘化油的用量直接影响到化疗栓塞的效果，足够的碘化油才能达到充分的血管栓塞。TACE 可使肿瘤体积缩小，坏死率增加，患者生存期延长，但TACE 后肝内转移和肺转移是影响其疗效的最主要因素之

%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%收稿日期：2009-07-11

作者简介：吕良山（1972-），男，主治医师，主要从事消化系统疾病的基础与临床研究，电话：029-85323922，E-mail:%[email protected]%%

TACE 治疗兔VX2肝移植瘤，并与对照组比较，旨在评价大剂量碘化油TACE 对兔VX2肝移植瘤的疗效

及肝内转移、肺转移的影响，为大剂量碘化油化疗栓塞的临床应用提供依据。

1%%材料和方法1.1%%实验材料

1.1.1%%实验动物日本大耳白兔60只，体质量2.5~3%kg ，雌雄不限，由西安交通大学实验动物中心提供。所

有动物随机编号，分笼饲养，饲养于本校清洁级实验

第10期

吕良山,%等.%大剂量碘化油肝动脉插管化疗栓塞治疗肝癌的实验研究

·2085·

动物中心。VX2瘤株种兔2只由第四军医大学唐都医院介入放射科馈赠。

1.1.2%%实验药品、器材和设备38%超液态碘化油，法国Gaubert 公司；阿霉素，意大利法玛西亚普强公司；SP 微导管导丝，美国Cook 公司；桡动脉穿刺针，美国Cook 公司；多排螺旋CT 机，美国通用电气公司；多

功能数字减影血管造影机，美国通用电气公司。

1.2%%实验方法

1.2.1%%兔VX2肝移植瘤模型的制作无菌条件下剥离携带有VX2肿瘤的种兔后腿外侧肌肉内的实体瘤

块，切除肿瘤组织，取瘤块近包膜质硬、脆、灰白色部分，用眼科剪在短时间内剪碎，制成约1~2%mm3大小的肿瘤组织块备用。实验动物称重麻醉，开腹暴露肝脏，用16%G针头、1%ml针筒抽吸1~2%mm3大小的瘤块混悬液约0.1%ml（含3~5瘤块) ，在肝左中央叶注入，针尖刺入深度约1.5%cm，拔针后立即用明胶海绵块压迫1~2%min，缝合腹壁关腹。术后3%d每日肌注青霉素4×105%U及庆大霉素4×104%U。

1.2.2%%实验动物分组及不同处理模型建立两周后，行胸部和腹部CT 平扫及增强扫描。筛选出肿瘤大小基本一致（直径约1.6%cm），瘤灶无明显坏死、无肝内转移及肺转移动物48只，随机分成A ，B ，C 三组，每组16只。A 组为生理盐水灌注组(对照组) ：经肝动脉灌注生理盐水0.5%ml；B 组为常规剂量碘化油TACE 组（常规剂量组）：经肝动脉灌注5%mg阿霉素与常规剂量碘化油的混悬液；C 组为大剂量碘化油TACE 组（大剂量组）：经肝动脉灌注5%mg阿霉素与大剂量碘

化油的混悬液。常规剂量组和大剂量组碘化油用量（ml ）分别为肿瘤体积（cm 3）乘以0.5和1。

1.2.3%%介入手术操作方法荷瘤兔右侧腹股沟区脱毛

消毒，经股动脉搏动处纵行切开皮肤，暴露股动脉，直视下18%G桡动脉穿刺针穿刺股动脉，超选择性插管技术插入肝总动脉内图像采集，观察肿瘤血供及肿瘤染色情况，然后依分组情况将生理盐水、化疗药物碘化油混悬液经导管缓慢注入，常规剂量组和大剂量组碘化油用量分别为(0.76±0.15)%ml和(1.56±0.21)%ml，注射完毕后用生理盐水0.5%ml缓慢冲洗导管，拔管后缝合伤口后回笼。

1.3%%结果判定和观察指标

介入治疗两周后存活动物行胸腹CT 薄层平扫及增强薄层CT 扫描。然后处死动物，观察肝脏标本及双肺标本，用10%福尔马林固定肝脏标本及双肺标本。

1.3.1%%肝原位移植瘤增长率和坏死率的评估根据介入治疗两周后腹部CT 平扫及增强扫描系列图像资料，测量肿瘤及肿瘤坏死区最大径(a)、与之垂直的短

径(b)，按下列公式计算肿瘤体积、肿瘤坏死面积、肿瘤增长率及肿瘤坏死率。肿瘤体积=0.5ab2；肿瘤坏死面积=（π/4）ab 2；肿瘤增长率=(治疗后肿瘤体积-治疗前肿瘤体积)/治疗前肿瘤体积×100%；肿瘤坏死率

=肿瘤坏死面积/肿瘤面积×100%。肿瘤坏死CT 平

扫表现为比瘤体实质更低密度区；增强扫描无血管充盈，无“肿瘤染色”征象；碘化油沉积区可认为是肿瘤坏死区。

1.3.2%%肝内转移和肺转移的评估CT 平扫及增强扫

描观察肝内及双肺有无转移灶；肉眼观察完整肝脏标本及双肺标本表面有无转移灶：固定肝脏标本及双肺标本以5%mm层厚切开，肉眼观察肝脏及双肺有无转移灶。若CT 检查或标本肉眼观察没有或不能确定，随机取材制作6张切片HE 染色后镜下观察有无转移。将距离移植瘤瘤灶超过2%mm的病灶判定为转移灶，门静脉内或肝静脉内瘤栓也判定为发生肝内转移。

1.4%%统计学方法

计量资料采用均数±标准差来表示。不同处理组间肝脏移植瘤从2周末到4周末的增长率、坏死率多组计量资料比较用方差分析；组间两两比较采用

SNK-q 检验；不同处理组间肝内转移、肺转移的计数资料比较采用Pearson%Chi-square卡方检验；统计以SPSS13.0软件进行。

2%%结果

2.1%%实验动物一般观察

介入治疗术后8%h内大剂量组与常规剂量组各死亡1只，均死于异位栓塞；余36%h内实验组动物精

神萎靡，食欲不振，口唇耳廓轻度发紫，耳廓动脉充盈差，以大剂量组为著，36%h后症状逐渐改善，3%d后正常。

2.2%%不同处理组介入治疗前肿瘤体积及介入治疗2周后肿瘤体积、肿瘤增长率、肿瘤坏死率比较（表1）

介入治疗前3组动物肿瘤平均体积之间无显著性差异（P >0.05)。介入治疗两周后对照组及常规剂量组肿瘤体积均比介入治疗前显著性增加（P

照组由于未接受任何治疗，肿瘤体积增加更加显著（P 0.05）。常规剂量组与对照组相比肿瘤的坏死率有显著性差异（P

2.3%%不同处理组介入治疗后肝内转移、肺转移比较（表2）

南方医科大学学报(J%South%Med%Univ)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%第29卷·2086%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%·

大剂量组与对照组相比肝内转移数、肺转移数及总转移数均无显著性差异（P >0.05）。常规剂量组与大

剂量组及对照组相比肝内转移数、肺转移数及总转移数均有显著性差异（P

表1%%不同处理组介入治疗前后肿瘤体积、肿瘤生长率、肿瘤坏死率比较

Tab.1Comparison of the tumor volume, tumor growth rate and necrosis rate between the 3groups

Group Control%groupRoutine%dose%groupHigh%dose%groupF P

Tumor%volume%before%therapy（mm 3）Tumor%volume%after%therapy（mm 3）Growth%%rate（%）Necrosis%rate（%）

94.77±12.2395.11±14.7895.88±13.460.0920.913

412.34±98.44157.34±23.89101.22±13.7014.3680.001

361.11±66.94%%64.65±12.87%%7.01±2.98285.5580.000

31.38±3.2346.21±7.31%%87.34±10.09153.7200.000

表2%%不同处理组介入治疗后肝内转移、肺转移比较

Tab.2Comparison of intrahepatic and lung metastasis after the therapy between the 3groups

Group Control%groupRoutine%dose%groupHigh%dose%group

Rabbits 161515

Intrahepatic%metastasisNum 8126

%50.0080.0040.00

Lung%metastasisNum 6116

%37.5073.3333.33

%

Intrahepatic%and%lune%metastasisNum 8127

%50.0080.0046.67

3%%讨论

碘化油作为一种载体携带化疗药物，并选择性的沉积在肿瘤组织内，不仅阻塞了肿瘤供血，且缓慢释放抗癌药物，提高了化疗药物在肿瘤局部的浓度，从而杀伤肿瘤细胞，是肝癌TACE 最常用的栓塞剂。碘化油的用量直接影响到栓塞后的疗效，但准确估计碘化油用量以取得最大的疗效和最小的不良反应是非常困难的。以往研究对碘化油剂量的估计是以肿瘤最大直径或最大面积为依据［3,%6,%12,%15-17］，但肿瘤是以体积而存在的，肿瘤体积与单纯肿瘤最大直径或最大面积的数值不是成正比关系的。本实验根据肿瘤最大径和最小径，按公式计算出肿瘤体积，再按肿瘤体积计算碘化油用量。许多实验研究［16-17］兔VX2肝移植瘤行

致的栓塞了供瘤动脉及其分支，而且栓塞了肿瘤边缘的门静脉分支，对瘤灶本身及周围的微转移灶、静脉内瘤栓均有治疗作用。

通过本实验观察到，大剂量组比常规剂量组

TACE 术后肝内转移和肺转移的发生率显著降低，说

明大剂量碘化油TACE 同常规剂量碘化油TACE 相比，对兔VX2肝移植瘤肝内转移和肺转移的发生有一定的抑制作用。分析可能有以下原因：（1）常规剂量碘化油TACE 不足以完全栓塞VX2肝移植瘤的血供，栓塞后未坏死肿瘤细胞之间连接松散，易脱落发生血行转移［18］；（2）大剂量碘化油TACE 栓塞了VX2肝移植瘤栓塞前已发生的转移灶和静脉内癌栓的血供，抑制了其生长；（3）大剂量碘化油TACE 明显抑制VX2肝移植瘤的生长，肿瘤细胞脱落入血发生转移的能力降低；(3)%大剂量碘化油TACE 栓塞了瘤周门静脉和肝静脉的细小分支及其可能存在的肝动-静脉瘘，使瘤细胞失去转移的通路。有关大剂量碘化油TACE 抑制兔VX2肝移植瘤肝内转移和肺转移的机制还需进一步研究。参考文献：

［1］

TACE 时碘化油用量多固定于某一定值，如0.8%ml、1%

ml ，本实验根据预实验经验，常规剂量组、大剂量组碘化油用量毫升数分别是肿瘤体积的0.5、1倍，这样

根据实验结果，常规剂量组术后仅瘤灶内有碘化油沉积，瘤灶中心沉积较致密；而大剂量组术后全瘤灶内碘化油充填且密实均匀，并可见病灶周围部分肝组织及门静脉内碘化油沉积，达到了实验的设计要求。

本实验发现，移植瘤术后2周各组肿瘤平均体积无显著性差异，TACE 后2周各实验组VX2肝移植瘤体积较对照组均明显缩小，说明TACE 可抑制

Taieb%J, %Barbare%JC, %Boussaha%T, %et%al. %Management%of %hepatocellular%carcinoma.%Where%are%we%now?%What's%next［J ］?%Bull%Cancer,%2009,%96(1):%19-34.

VX2肝移植瘤生长。实验组中肿瘤的生长率有显著性差异，大剂量组肿瘤的生长率更低，说明TACE 时增加碘化油用量对兔VX2肝移植瘤治疗作用更加明

显。大剂量碘化油TACE 可起到肝动脉和门静脉双重栓塞的目的，携带有化疗药物的碘化油不但均匀一

［2］Ji%SK,%Cho%YK,%Ahn%YS,%et%al.%Multivariate%analysis%of%the%predictors%

of%survival%for%patients%with%hepatocellular%carcinoma%undergoing%transarterial%chemoembolization:［3］

%focusing%on%superselective%

chemoembolization ［J ］.%Korean%J%Radiol,%2008,%9(6):%534-40.Takayasu%K,%Arii%S,%Ikai%I,%et%al.%Prospective%cohort%study%of%

第10期

吕良山,%等.%大剂量碘化油肝动脉插管化疗栓塞治疗肝癌的实验研究

·2087·

transarterial%chemoembolization%for%unresectable%hepatocellular%carcinoma%in%8510%patients ［J ］. %Gastroenterology, %2006, %131(2):%461-9.

［4］Ji%SK,%Cho%YK,%Ahn%YS,%et%al.%Multivariate%analysis%of%the%predictors%

(3):%393-400.

［11］Padhani%A. %Unresectable%hepatocellular%carcinoma:%serial%early%

vascular%and%cellular%changes%after%transarterial%chemoembolization［J ］.%Radiology,%2009,%250(2):%324-6.

［12］Satake%M,%Uchida%H,%Arai%Y,%et%al.%Transcatheter%arterial%chemoem-%

of%survival%for%patients%with%hepatocellular%carcinoma%undergoing%transarterial%chemoembolization:

%focusing%on%superselective%

chemoembolization ［J ］.%Korean%J%Radiol,%2008,%9(6):%534-40.［5］Chen%XM,%Luo%PF,%Lin%HH,%et%al.%Protect%of%interventional%treatment%

bolization%(TACE)%with%lipiodol%to%treat%hepatocellular%carcinoma:%survey%results%from%the%TACE%study%group%of%Japan［J ］.%Cardiovasc%Intervent%Radiol,%2008,%31(4):%756-61.

［13］Guo%WJ,%Li%J,%Chen%Z,%et%al.%Transient%increased%expression%of%VEGF%

for%hepatocellular%carcinoma［J ］.%Chin%German%J%Clin%Oncol,%2005,%4(2):%112-5.［6］

and%MMP-1%in%a%rat%liver%tumor%model%after%hepatic%arterial%occlusion ［J ］.%Hepatogastroenterology,%2004,%51(56):%381-6.［14］Ueno%K, %Myazono%N, %Nishida%H, %et%al. %Transcatheter%arterial%

Ueno%K,%Myazono%N,%Nishida%H,%et%al.%Transcatheter%arterial%chemoembolization%therapy%using%iodized%oil%for%patients%with%unresectable%hepatocellular%carcinoma:%evaluation%of%three%kinds%of%regiments%and%analysis%of%prognostic%factors［J ］.%Cancer,%2000,%88(6):%1574-9.

chemoembolization%therapy%using%iodized%oil%for%patients%with%unresectable%hepatocellular%carcinoma:%evaluation%of%three%kinds%of%regiments%and%analysis%of%prognostic%factors［J ］.%Cancer,%2000,%88(11):%1574-81.

［15］Graf%H,%J üngst%C, %Straub%G, %et%al. %Chemoembolization%combined%

［7］Brown%DB, %Geschwind%JF, %Soulen%MC, %et%al. %Society%of%interventional%radiology%position%statement%on%chemoembolization%of%hepatic%malignancies［J ］. %J%Vasc%Interv%Radio,%2006,%17(1):%217-30.

with%pravastatin%improves%survival%in%patients%with%hepatocellular%carcinoma ［J ］.%Digestion,%2008,%78(1):%34-8.%

［16］Gu%T,%Li%CX,%Feng%Y,%et%al.%Transarterial%gene%therapy%for%hepatocellular%

［8］Lion%TC, %Shih%SC, %Kao%CR, %et%al. %Pulmonary%metastasis%of%heaptoceblar%

carcinoma%

associated%

with%

transarterial%

chemoembolization ［J ］.%J%Hepatol,%1995,%23(5):%563-8.

carcinoma%in%a%rabbit%model［J ］.%World%J%Gastroenterol,%2007, %13(14):%2113-7.

［17］Sun%ZG, %Chen%XP, %Huang%ZY, %et%al. %The%effects%of%lipiodol-%

［9］Lin%SC,%Shih%SC,%Kao%CR,%et%al.%Transcatheter%arterial%embolization%

treatment%in%patients%with%hepatocellular%carcinoma%and%risk%of%pulmonary%metastasis［J ］. %World%J%Gastroenterol,%2003,%9(6):%1208-11.

［10］Shen%H,%Agarwal%D,%Qi%R,%et%al.%Predictors%of%outcome%in%patients%

hydroxyapatite%nanoparticle%on%apoptosis, %proliferation, %and%angiogenesis%in%hepatic%tumor:%experiment%with%rabbits ［J ］. %Zhonghua%Yi%Xue%Za%Zhi,%2007,%87(6):%409-13.

［18］Padhani%A. %Unresectable%hepatocellular%carcinoma:%serial%early%

with%unresectable%hepatocellular%carcinoma%receiving%transcatheter%arterial%chemoembolization［J ］.%Aliment%Pharmacol%Ther,%2007,%26

vascular%and%cellular%changes%after%transarterial%chemoembolization［J ］.%Radiology,%2009,%250(2):%324-6.

（上接2083页）参考文献：

［1］胡亚美,%江载芳,%诸福棠.%实用儿科学［M ］.%7版.%北京:%人民卫生

出版社,%2002:%1167-206.［2］

Korean%Med%Sci,%2005,%20(4):%542-7.

［4］陆权,%陆敏.%肺炎支原体感染的流行病学［J ］.%实用儿科临床杂

志,%2007,%22(2):%241-3.

［5］袁红英,%张青晓,%李泽芬,%等.%呼吸道感染患儿肺炎支原体和衣原

体感染状况研究［J ］.%新乡医学院学报,%2003,%20(4):%254-5.［6］杨亚静,%艾涛,%王译,%等.%急性呼吸道感染227例的病原学研究

［J ］.%实用儿科临床杂志,%2002,%17(3):%233-4.

［7］陈彩霞,%单晔,%葛乃蕾,%等.%婴幼儿喘息与呼吸道合胞病毒肺炎支

原体感染及过敏的关系［J ］.%中国实用儿科杂志,%2007,%22(12):%

Rastawicki%W,%Kaluzewski%S,%Jagielski%M,%et%al.%Epidemiology%of%Mycoplasma pneumoniae in%Poland%28%years%of%surveillance%in%warsaw%1970-1997［J ］.%Eur%Suroeill,%1998,%3(10):%99-100.

［3］Yu%I,%Yoo%Y,%Kim%DK,%et%al.%Distribution%of%antibody%time%to%

Mycoplasma pneumoniae in%Korean%children%in%2000-2003［J ］. %J%

908-10.