百分之三氯化钠三糖铁琼脂
品种名称:3%氯化钠三糖铁琼脂
编号:025103
用途:用于鉴别副溶血性弧菌的生化反应。
副溶血弧菌系弧菌科弧菌属,革兰染色阴性,兼性厌氧菌,为多形态杆菌或稍弯曲弧菌。本菌嗜盐畏酸。最适宜的培养基:温度为30℃—37℃,含盐2.5%—3%(若盐浓度低于0.5%则不生长),pH值为8.0—8.5。本菌对酸较敏感,当pH6以下即不能生长,在普通食醋中l一3min即死亡。在固体培养基上菌落常隆起,圆形,表面光滑,湿润。在3%一3.5%含盐水中繁殖迅速,每8~9min为一周期。对高温抵抗力小,50℃ 20 min;65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被杀死。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱,可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。
原理:
蛋白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类,其产酸时通过酚红指示剂测出,酸性呈黄色,碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢,与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁;较高含量的氯化钠维持弧菌均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
图:
培养基配方(每升):
蛋白胨20g
牛肉膏粉3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖1g
氯化钠30g
硫酸亚铁0.5g
硫代硫酸钠 0.5g
琼脂 12g
酚红0.024g
最终pH 7.4±0.2
使用方法:
1、称取本培养基87g,加入蒸馏水或去离子水1 L,加热搅拌溶解煮沸至完全溶解,分装试管(装量宜多些)。
2、将试管放入灭菌锅中,115℃高压灭菌15min,取出,制成高层斜面,备用。
3、挑取待检菌的新鲜纯培养物,穿刺接种后,再划斜面,置培养箱37℃培养18—24h。
4、观察结果。副溶血性弧菌在斜面上产碱,在底层产酸,不产气,不产硫化氢。
质量控制:
下列菌株接种斜面后,36±1℃培养物18—24h,结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 斜面/底部 产气 产硫化氢
副溶血性弧菌 VPL4-90 良好 K/A - -
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 A/A + -
鼠伤寒沙门氏菌 CMCC(B)50115 良好 K/A + +
铜绿假单胞菌 ATCC9027 良好 K/K - -
注:“A”为产酸,“K”为产碱。
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g