制备型高效液相色谱法分离纯化绿原酸
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制备型高效液相色谱法分离纯化绿原酸 作者：王锐
来源：《科学与财富》2013年第12期
摘 要：使用高效液相色谱的制备技术，来对杜仲叶进行提取，经过分离纯化技术处理之后，便从其中得到了具有活性成分的绿原酸。同时，针对制备色谱中所涉及到的洗脱剂组成、洗脱方式、洗脱时间、浓度等多个方面来进行相应的参数优化。在实际分离纯化绿原酸的过程中，其最为良好的操作方法为以下：采用流速梯度进行洗脱，流速先为28mL/min，然后为45mL/min流动相为15%的有机酸B 和0.1%的有机酸E （体积分数）测定波长为254nm 进样体积为10mL 进样量为2500mg 。通过该工艺分离纯化，制备回收率为83.3%，相对标准偏差为
3.1%，绿原酸的纯度达98.61%，同时可得到杜仲叶黄酮、桃叶珊瑚甙等副产品。 关键词：绿原酸；高效液相制备色谱；纯化流速；梯度；洗脱
现目前，我国的在杜仲叶片上所进行的绿原酸分离研究工作，还由于多个方面原因的影响，导致其分离研究的试验还仅仅只是停留在一个试验性的阶段。目前应用较为普遍的技术便是直接利用硅胶、多级萃取等措施，最后利用重结晶的方式，才能够从萃取物中获得少量的纯化绿原酸，其大型的绿原酸制备技术研究一直没有得到进展。但我国从杜仲叶中发现了大量的绿原酸，其含量几乎能够和金银花媲美，并且该类药物的价格低廉。下文主要是使用现代化的新型设备来对杜仲叶之中所存在的绿原酸进行了分离纯化试验。
1 实验
1.1仪器与试剂
1.1.1仪器
实验仪器为：HGS 型制备液相色谱仪改性C18填料HGS 型紫外检测仪六通进样阀TL-ó型流量调节仪MN 型记录仪。Biotronik 液相色谱分析仪BT8200UV 检测器BT8100高压泵Dynamic 混合器C-R6A 数据处理仪冷冻干燥机旋转蒸发仪Explorer 电子天平756MC-Vis 分光光度计KQ-100E 超声波发生器。
1.1.2试剂
实验试剂为：甲醇，分析纯，有机酸A ，B ，C 和D ，分析纯有机酸E ，分析纯绿原酸标准样品水。
1.2色谱条件
1.2.1制备色谱条件