微生物课后思考题答案(四 五 六章)
. 第四章
1 某学生利用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌,在酪素培养基平板上发现有几株菌的菌
落周围有蛋白水解圈,是否能仅凭蛋白水解圈与菌落直径比大,就断定该菌株产胞外蛋白酶的
能力就大,而将其选择为高产蛋白酶的菌种,为什么?
答:不能。因为,(1)不同微生物的营养需求、最适生长温度等生长条件有差别,在同一平
板上相同条件下的生长及生理状况不同;(2)不同微生物所产蛋白酶的性质(如最适催化反应
温度、pH、对底物酪素的降解能力等)不同;(3)该学生所采用的是一种定性及初步定量的方
法,应进一步针对获得的几株菌分别进行培养基及培养条件优化,并在分析这些菌株所产蛋白
酶性质的基础上利用摇瓶发酵实验确定蛋白酶高产菌株。
2 如果要从环境中分离得到能利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物,你该如何设计实验?
答:A从苯含量较高的环境中采集土样或水样;B配制培养基,制备平板,一种仅以苯作为惟一
碳源(A),另一种不含任何碳源作为对照(B);C将样品适当稀释(十倍稀释法),涂布A平板;D
将平板置于适当温度条件下培养,观察是否有菌落产生;(5)将A平板上的菌落编号并分别转接
至B平板,置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气中C02的自养型微生物
);(6)挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落,在一个新的A平板上划线、培养,获得
单菌落,初步确定为可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物;(7)将初步确定的目标菌株
转接至以苯作为惟一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵实验,利用相应化学分析方法定量分析
该菌株分解利用苯的情况。
3 某些微生物对生长因子的需求具有较高的专一性,可利用它们通过“微生物分析”?
(microbiological assay)对样品中维生素或氨基酸进行定量。试设计实验利用某微生物对某
一? 样品维生素B他的含量进行分析。
答:A将缺乏维生素B。:但含有过量其他营养物质的培养基分装于一系列试管,分别定量接入
用于测定的微生物;B在这些试管中分别补加不同量的维生素B,:标准样品及待测样品,在适
宜条件下培养;C以微生物生长量(如测定0D㈣。。)值对标准样品的量作图,获得标准曲线;
D测定含待测样品试管中微生物生长量,对照标准曲线,计算待测样品中维生素B.:的含量。
第五章
1 从乙醛到乙醇的路径被阻断,仅仅阻断的是无氧呼吸的最后一步,即糖酵解过程中产生的
NADPH中的氢将乙醛还原为乙醇。但是在有氧的情况下,糖酵解过程中产生的氢将不再用于把
乙醛还原为乙醇,而是直接运送到线粒体中进行氧化产生水,即不经过从乙醛到乙醇的这一阶
段,因此可以在有氧条件下的葡萄糖平板上存活。
2 厌氧性微生物:丙酮酸可以生成乳酸或乙醇。好氧性微生物:丙酮酸继续氧化分解为水及二
氧化碳。
在葡萄糖转化为丙酮酸后,厌氧微生物和无氧条件下的兼性厌氧微生物可以不同的途径将丙酮
酸转化为多种发酵产物。乳酸细菌可以将丙酮酸还原为乳酸。酵母菌将丙酮酸脱羧形成乙醛,
再由乙醛还原形成乙醇。丁酸弧菌属 ( Butyrivibrio ) 、真杆菌属 ( Eubacterium ) 和羧
状芽孢杆菌属( Clostridium )的一些种如丁酸羧菌( C.butyricum )、克氏羧菌 (
C.kluyveri ) 等,通过将丙酮酸脱羧并辅酶 A 化形成乙酰 -CoA ,然后 2 个乙酰 -CoA 缩
合为乙酰乙酰 CoA ,在经过多个步骤形成丁酸。也可由多种肠道细菌将丙酮酸发酵为包括甲
酸、乙酸、乳酸、琥珀酸、乙醇、丙三醇、 2, 3- 丁二醇、 3- 羟丁酮等多种有机酸和醇的
混合酸。
第六章
1 对于像细菌肥料这样的实际样品,取样是非常重要的,取时要分布均匀。其次是所选用的 选择性培养基,缓冲液的pH,还有培养的时间和温度。
并不是活性菌越多就越好,而是不同组分的微生物的比例要保持一致,如果得到的活性菌 很高,有可能是某一种细菌占了主导地位,并且抑制了其他细菌的生长,肥料的品质也会 下降。