实验11 蛙坐骨神经干动作电位的观察
浙江大学实验报告
课程名称：动物生理学实验
实验项目：实验11 蛙坐骨神经干动作电位的观察 实验日期：2016年 月 日（周 ）
姓名 学号 班级： 第 组，同组者：
实验地点：紫金港生物实验中心311
[实验目的]
1、学习电生理学实验方法。
2、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形，并了解其产生原理。 3、测量神经干动作电位产生的阈强度和顶强度。 [实验原理]
1、两栖类一些基本的生命活动和生理功能与温血动物类似，而离体组织器官所需的生活条件比较简单，并且易于控制和掌握，因此在生理实验中常用两栖类离体组织器官作为实验标本。
2、神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。
3、神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随着刺激强度的变化而变化的。
[实验材料]蛙 常用手术器械 蛙板 任氏液 培养皿 烧杯 神经屏蔽盒 Medlab 生物信号采集系统
[实验步骤]
一、蛙坐骨神经干标本制备 1．毁脑、脊髓。
2．去躯干上部及内脏和皮肤 将前半躯干、皮肤和内脏一并拉剥弃之，仅保留一段腰背部脊柱及两后肢，并将其放入盛有任氏液的培养皿中。
3．洗净手和所用过的用具，以防沾染标本。
4．平分标本 沿脊柱正中线至耻骨联合中央将标本分为两半。放入任氏液中。 5．游离坐骨神经 任取一标本，用玻璃分针游离坐骨神经腹腔段。然后换至背侧向上，持玻璃分针沿坐骨神经沟（股二头肌及半膜肌肌间沟）小心分离坐骨神经大腿段，用剪刀剪去神经干上各细小分支（切忌撕扯）。坐骨神经下行至腘窝处分为两支：内侧为胫神经，走行表浅；外侧为腓神经。沿胫、腓神经走向分离至踝部，尽量将神经干标本剥离长一些，要求上自脊神经发出部位，下沿腓神经与胫神经一直分离到踝关节附近，剪断侧支。尽量将神经干周围的组织剔除干净(剥离时切勿损伤神经干) ，结扎坐骨神经干的脊柱端及胫、腓神经的足端，游离神经干。
6、将坐骨神经干标本浸入任氏液中5分钟，以稳定其兴奋性。 二、仪器联接和调试
打开Medlab 生物信号采集系统软件，选通道1作为记录信号的通道, 选通道4用于刺
激信号的监视通道（应用Q9三通将刺激输出分成两路，一路用于刺激标本，一路输入4通道）并用高阻抗导线将通道输入口与神经屏蔽盒的引导电极相连，用刺激导线将Medlab 的刺激信号输出口与神经屏蔽盒的刺激电极相连。将神经屏蔽盒内所有电极用浸有任氏液的棉球擦净。用镊子夹住已制备好的神经标本的一端, 将其放置于电极上（脊椎端位于刺激电极方向），用滤纸片吸去标本上过多的任氏液。
神经干动作电位观察和记录的仪器连接
三、动作电位的观察和记录 1．测定参数
2．实时调节Medlab 生物信号采集系统和刺激器的延迟，使动作电位波形正好出现在显示屏的适中位置。同时调节刺激强度求出在相应刺激波宽下动作电位产生的阈强度和顶强度。
3．双相动作电位的观察： 计算双相动作电位时程及上升相、下降相宽度及幅值，计算自伪迹起点至动作电位起点所需的时间。
4．把神经干方向倒转后，动作电位发生何变化？
5．单相动作电位的观察： 用镊子将两个记录电极之间的神经夹伤（或滴加普鲁卡因），此时显示屏上呈现单相动作电位，观察其形状并计算时程、幅值及伪迹至单相动作电位起点所需时间。 [注意事项]
1、 免污染、压挤、损伤和用力牵拉神经，不可用金属器械触碰神经干。
2、在操作过程中，应给神经滴上任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。
[实验结果]
（附图）(正常双相动作电位、倒转后双相动作电位、单相动作电位)
[分析讨论与心得]
[思考题]
1、 神经干动作电位的图形为什么不是“全或无”的?
2、 在神经干引导的双相动作电位的上、下相图形的幅值和波形宽度为什么不对称?
3、 当刺激强度达到一定值时，神经干动作电位的幅度就不再增大，为什么？