血型鉴定.不规则抗体筛查及交叉配血步骤
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
一. 血型鉴定
1. 排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO 正定型试管、患者ABO 反定型试管、患者RhD 定型试管。
2. 标本准备 分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者2%-5%红细胞悬液。
3. 加样
ABO 正定型：1滴（50ul ）抗A 、抗B 试剂加1滴（50ul ）患者红细胞悬液。 ABO 反定型：1滴（50ul ）患者血清加1滴（50ul ）反定型试剂红细胞。
RhD 定型：1滴（50ul ）抗D 血清加1滴（50ul ）患者红细胞悬液。
4. 结果判断
离心（2档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO 、RhD 血型结果。
二. 不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）
1. 排管标记01、02、03及自身对照管
2. 加样 各试管分别加入相应的患者血清2滴（100ul ）及筛选细胞1滴（50ul ）。
3. 结果观察
离心（2档），观察结果
先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。 各试管分别加入低离子介质0.65ml ，轻轻混匀（参照试剂说明书）
各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul ）混匀，离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液，留约0.1ml ，轻轻混匀
肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）
各试管分别加入重悬液2滴（100ul ），轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min 内消失
显微镜检查
三. 交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）
1. 标本准备
分离供血者血浆与红细胞
三次洗涤，制备供血者2%-5%红细胞悬液
2. 排管标记
排管，主侧、次侧及自身对照管
3. 加样
各试管分别加入相应的备检血清2滴（100ul ）及2%-5%备检红细胞悬液1滴（50ul ）
4. 结果观察
离心（2档），观察结果
先看上清液有无溶血
轻轻混匀，肉眼观察有无凝集
结果判断并记录
各试管分别加入低离子介质0.65ml ，轻轻混匀（参照试剂说明书）
各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul ）混匀，离心
先观察上清液有无溶血
弃去上清液，留0.1ml ，轻轻混匀
肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）
各试管分别加入重悬液2滴（100ul ），轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min 内消失
肉眼观察阴性者，显微镜检查
记录交叉配血结果
A 、B 、O 试验红细胞悬液的制备
1. 分别采取已知A 、B 、O 三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液（见表格）
红细胞悬液的配置
悬液浓度（%） 压实红细胞（滴） 盐水（滴） 2 1 2.0ml （40） 5 1 0.8ml （16） 10 1 0.4ml （8） 20 1 0.2ml （4）
2. 为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上健康成人血液，按A 、B 、O 型分别混合后，按上法制备。