制药企业常用消毒剂消毒效果验证
中国医药工业杂志ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ２０１１，４２（８）
制药企业常用消毒剂消毒效果验证
ＶａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆＤｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎＥｆｆｅｃｔｏｆＣｏｍｍｏｎＤｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓｉｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙ
陈宁，李书平
（深圳九新药业有限公司，广东深圳５１８０４９）
ＣＨＥＮＮｉｎｇ，ＬＩＳｈｕｐｉｎｇ
（ＳｈｅｎｚｈｅｎＧｏｓｕｎ
ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ
５１８０４９）
摘要：对酸性苯酚、碱性苯酚、７５％乙醇、７０％异丙醇、Ｏ．１％新洁尔灭、１．５％双氧水、杀孢子剂、１．５％雷克特合能８种消毒剂的消毒效果进行验证。结果表明，酸性苯酚、碱性苯酚、１．５％双氧水、杀孢子剂对微生物的杀灭能力较强。７５％乙醇、７０％异丙醇、０．１％新洁尔灭对白色念珠菌和枯草芽孢杆菌杀灭能力较弱，需和其它消毒剂配合使用。１．５％雷克特合能消毒剂对微生物的杀灭能力较弱。关键词：消毒剂；微生物；杀菌中图分类号：Ｒ９５３
文献标志码：Ｃ
文章编号：１００１－８２５５（２０１１）０８—０６４０－０３
生产车间良好微生物控制系统是通过定期使用和剂效果确认、消毒剂挑战试验、消毒剂有效期试验、清洁剂消毒效果确认等方面。１试验材料１．１消毒剂（表１）
消毒剂和规定的消毒程序来实现的，所以必须对消
毒剂的杀灭能力及消毒程序进行验证。本研究验证
了我公司使用过的８种消毒剂和相应消毒程序的中
表１８种消毒剂
品名
生产厂家
批号浓度配制方法
１．２中和剂
Ｌｅｔｈｅｅｎ肉汤培养基（ＢＤ公司，批号８２９８５３２）。
芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＣＭＣＣ（Ｂ）６３５０１和白色念珠菌
（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ）ＣＭＣＣ（Ｆ）９８００１，均购自中国食品药品检定研究院。
取上述培养２４ｈ的新鲜菌种，制备ｌＸｌ０５～１Ｘ
１０６０ｆｕ／０．１
１．３菌液
大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）ＣＭＣＣ（Ｂ）４４１０２、金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）ＣＭＣＣ（Ｂ）２６００３、枯草
ｍｌ的菌液及５０～１００
ｃｆｕ／０．１
ｍｌ的菌悬液备用。
表皮葡萄球菌（Ｓｔａｐｈ３’ｌｏｃｏｃｃｕｓｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）和蜡样芽孢
收稿日期：２０１１－０５—１９
作者简介：陈宁（１９６８一）。女，高级工程师，从事药品检验研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｎｉｎｇ＠ｇｏｓｕｎｃｈｉｎａ，ｔｏｎｉ
杆菌１（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ１）均为车间环境监测分离菌株。
制备１×１０３ｃｆｕ／Ｏ．１ｍｌ的环境菌菌液待用。
中国医药工业杂志Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ
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・Ａ６９・
１．４验证材质
彩钢板、环氧树脂板和ＰＶＣ板（均与洁净室墙面或地面材质一致）：不锈钢板；铝片；塑料袋；聚四氟乙烯膜。上述材质均剪裁成５ｃｍｘ５ｃｍ大小。
置４组平行试验，分别为：消毒剂＋菌悬液（Ｉ
组）、中和剂＋菌悬液（ＩＩ组）、中和剂＋消毒剂＋菌悬液（Ⅲ组）和菌悬液＋生理盐水（Ⅳ组）。每
步操作均应充分振荡混合，以上液体混合作用后，采用薄膜过滤法（０．４５ｐｍ滤膜）检查剩余微生物
２试验方法…
２．１中和剂中和效果确认
分别取５０～１００
ｃｆｕ／Ｏ．１
数量。要求：Ｉ组无菌生长或生长数量远小于ＩＩ
ｍｌ的菌悬液各０．１ｍｌ，
组；ＩＩ组、ⅡＩ组与Ⅳ组相比，微生物回收率大于７０％，即Ⅱ组或ＩＩＩ组微生物回收数量除以Ⅳ组微生物回收数量＞７０％。试验结果见表２。
消毒剂用量为１０ｍｌ，除杀孢子剂中和剂使用量为
５００
ｍｌ外，其余消毒剂中和剂使用量为１００ｍｌ。设
表２中和剂中和效果结果／ｃｆｕ
由表２可见，Ｌｅｔｈｅｅｎ肉汤培养基可以中和除雷克特合能消毒剂外的７种消毒剂，除杀孢子剂需
种细菌均具有强杀灭力，但１．５％双氧水腐蚀性强，杀孢子剂具有强烈刺鼻味道；酸性苯酚消毒剂和碱性苯酚消毒剂对４种细菌均具有大于３个ｌｏｇ值的杀灭能力；醇类消毒剂７５％乙醇、７０％异丙醇和０．１％新洁尔灭可有效杀灭大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，但对白色念珠菌和枯草芽孢杆菌杀灭能力较弱，
使用Ｌｅｔｈｅｅｎ肉汤培养基５００ｍｌ中和外，其余６种
消毒剂均使用Ｌｅｔｈｅｃｎ肉汤培养基１００ｍｌ中和。消毒剂的微生物检验也可使用此法中和后再进行检验。
２．２消毒剂微生物挑战试验幢１
取１０５～１０６
ｃｆｕ／Ｏ．１
可与其它消毒剂配合使用；１．５％雷克特合能消毒剂对４种细菌的杀灭能力较弱。２．３消毒剂有效期试验
为考察消毒剂在有效期内的稳定性及消毒效
ｍｌ菌悬液各０．１ｍｌ，分别
接种至含消毒液１０ｍｌ的试管中，每种菌接种２管，
盖紧试管塞，振荡，室温放置１０ｍｉｎ后，将试管内
消毒液（杀孢子剂除外）转至含中和剂１００ｍｌ的瓶中，杀孢子剂则转至中和剂５００ｍｌ中，振荡混匀，薄膜过滤后取出滤膜，将滤膜贴于ＴＳＡ培养基平皿上，白色念珠菌２３～２８℃培养７２ｈ后计数，其它菌液３０～３５℃培养４８ｈ后计数。结果见表３。
由表３结果可见，１．５％双氧水、杀孢子剂对４
力，分别于消毒剂贮存的ｄ５、ｄ７和ｄｌＯ取样，照
“２．２”项下方法进行消毒剂微生物挑战试验，结果表明，消毒剂贮存１０ｄ后消毒效力未发生变化。２．４消毒剂消毒效果确认口１
为验证各消毒剂在实际环境消毒中的效果，吸取“１．３”项下６种菌种１×１０３／０．１ｍｌ悬浮液０．１ｍｌ
－Ａ７０・
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表３消毒剂挑战试验结果１’
大肠杆菌
消毒剂
．
消毒剂作用后
一一
菌数下降
会黄色葡萄球菌消毒剂作用后菌数下降
枯草芽孢杆菌消毒荆作用后
菌数下降
自色念珠菌
消毒剂作用后
菌数下降
堕塑量生生
９８
２３２
坦ｇ笪：
４．０５．７５．５５．７５．１５．７３．７５．４
堕鎏重丝垒
１１０５３０ｌｌ４００３６０７００２９２０
．
！！ｇ笪：：
４．７４．０５．７４．１４．１３．９
堕堕量丝生
４５４０４４０００３５００２９００１３０００１１
垫墨笪：
４．０４．１５．１２．１２．２２．２１．６４．７
堕壅量生垫
１６０５１０２２００２５００３０００１５０００１８
！！￡笪：：．
４．０５．５５．２２．８２．８２．７２．０４．９
酸性苯酚碱性苯酚杀孢子剂７０％异丙醇０．１％新洁尔灭１．５％雷克特合能
７５％乙醇８
２２２０
５．２
５．４
１．５％双氧水４
注：”大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌的加菌量分别为１．０ｘ１０６、５．０ｘ１０６、５．０ｘ１０５和１．５ｘ１０６ｃｆｕ：２’菌数下降ｌｏｇ值＝ｌｏｇ加入菌量／消毒剂作用后菌液计数
涂布于验证材质（模拟板）上，每种菌涂布２块，
涂布面积为５ｃｍｘ５ｃｍ，用经注射用水润湿的丝光毛巾将模拟板擦拭一遍，再用经消毒剂润湿丝光毛巾擦拭两遍，用ＴＳＡ培养基接触皿取样、培养并计数。结果表明所选用的８种消毒剂配合适当的清洁消毒方式，对普通环境表皮葡萄球菌具有很好
生产中应定期更换消毒剂，也可根据环境中监控到的微生物种类有针对性的选择消毒剂。
参考文献：
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［２］李芙，张晋，过琴媛，等．疫苗生产中消毒剂消毒效果的
验证［Ｊ］．中国生物制品学杂志，２００８，２１（１２）：１１２４．１１２４．
［３］
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剂（７５％乙醇、７０％异丙醇）对蜡样芽孢杆菌１不能彻底杀灭，在日常生产消毒中应与１．５％双氧水、杀孢子剂配合使用。３结果
不同微生物对消毒剂的耐受性不同，因此医药
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－矗婚婚・景・而《、婚・晶・矗・矗ａ６ｑ矗ｑ矗・矗・矗・矗－景・矗・凸《、ｑ翕婚皤・景－暴－龠－每婚－暴－§－景－Ｓ婚・酋・６《＾ｑ晶・昏・岛・西婚舔－Ｓａ矗秭・§ａ６・景・矗．‘最（上接第６３９页）
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ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔｅｓｔｅｒａｓｅ
ｅｓｔｅｒ
ｐｒｏｄｒｕｇｓ：ｄｉｆｆｕｓｉｏｎａｎｄ［２９］ＷａｎｇＪＪ，ＬｉｕＫＳ，ＳｕｎｇＫＣ，ｅｔａ１．Ｓｋｉｎｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｏｆ
ｅｓｔｅｒ
ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎ
ｈｕｍａｎｓｋｉｎ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍＳｃｉ，２００２，ｂｕｐｒｅｎｏｒｐｈｉｎｅａｎｄｉｔｓｌｉｐｉｄ
ｐｒｏｄｒｕｇｓｆｒｏｍｌｉｐｉｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：
ｌｉｐｉｄｃａｒｒｉｅｒｓ
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ｅｍｕｌｓｉｏｎ，ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ
ａｎｄ
ｓｏｌｉｄｌｉｐｉｄ
ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ［Ｊ］．ＪＭｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ，２００９，１３：１－１４．