桑白皮提取物对糖尿病大鼠神经生长因子_碱性髓鞘蛋白表达的影响
中国中医基础医学杂志
760
Chi nese Journal of Basic M edicine i n Traditional Chinese Medicine
2007年第13卷第10期
20071Vol. 13. No. 10
=实验研究>
桑白皮提取物对糖尿病大鼠神经生长因子、
碱性髓鞘蛋白表达的影响
*
马松涛, 张效科
(成都医学院基础医学院, 四川成都 610082; 陕西中医学院, 陕西咸阳 712083;
成都医学院第一附属医院, 四川成都 610082)
关键词:糖尿病神经病变; 神经生长因子; 碱性髓鞘蛋白
中图分类号:R28515 文献标识码:B 文章编号:1006-3250(2007) 10-0760-01 神经生长因子(NGF) 与糖尿病神经病变(DPN) 早期发病相关, 而且作为神经营养因子重要组成部分的神经生长因子对周围神经元的发展及维持非常
[1]
重要。已有实验证明, 无论是糖尿病动物模型还是糖尿病神经病变患者, 其组织或血中的NGF 水平均明显降低, 提示NGF 参与DPN 的发病过程。此外, NGF 对神经髓鞘的雪旺细胞也有调节作用, 由此而参与神经的功能维持、结构完整以及损伤后的再生。同时MB P 作为组成神经髓鞘的主要成分蛋白,
[2、3]
对维护神经功能的完整性起着重要的作用。本实验通过桑白皮提取物对糖尿病大鼠神经生长因子和碱性髓鞘蛋白的影响, 观察桑白皮提取物对糖尿病周围神经病变的治疗作用。
1 材料与方法111 实验动物
SD 大鼠80只, 雌雄各半, 体重200g ? 20g, 由成都中医药大学实验动物中心提供。健康SD 大鼠60只, 体重200g ? 20g 。动物于自然光线、自由饮水摄食条件下适应性喂养1w 。大鼠禁食12h 后, 按200mg P kg 的量, 用生理盐水将四氧嘧啶稀释成50mg P ml 的溶液, 分两次腹腔注射, 每日1次。72h 后眶静脉取血, 用葡萄糖氧化酶法测血糖, 凡血糖\1617m mol P L 纳入实验。将成模大鼠48只按血糖值的高低随机分为模型组、桑白皮高剂量组、低剂量
组正模
常型
别组组
n 107889
面积(L m 2) 27109? 512815118? 5166
**
组、弥可保对照组, 每组12只。另设10只鼠龄、体重相匹配的大鼠作为正常组。
112 给药方法
造模5d 后开始进行治疗。正常组及模型组:生理盐水10ml P kg 灌胃, 每日1次。高剂量治疗组:桑白皮提取物11875g P kg, 相当于成人公斤体重用药量的15倍。桑白皮提取物01625P kg, 相当于成人公斤体重用药量的5倍。弥可保组300L g P kg 灌胃, 相当于成人公斤体重用药量的10倍。每天1次, 以上各组连续给药8w 。
113 观测指标及测试方法
坐骨神经神经生长因子及碱性髓鞘蛋白的测定:每张切片取3个视野, 在奥林巴斯B X50光学显微镜(200@) 观察下, 运用Mias -2000型图形图像分析系统, 计算坐骨神经神经生长因子及碱性髓鞘蛋白阳性染色的面积、平均光密度、积分光密度及平均黑度, 以备统计分析。
114 统计方法
所有数据用SPSS 1010处理, 结果计量资料以均数? 标准差表示( x ? s ) , 各组间样均数比较用方差分析。
2 实验结果
211 各组大鼠坐骨神经神经生长因子(NGF) 的表达变化
积分光密度8011100? [1**********]111? 1089172
v v
**v
**
表1 各组大鼠坐骨神经神经生长因子的表达变化比较( x ? s )
平均光密度152160? [1**********]? [1**********]? 9154**138116? 10182*
v
平均黑度122140? 1314590162? 10165**99165? 9154**104186? 10182*115184? 14106v v #
#
弥可保组小剂量组大剂量组
18149? 5101**21109? 4128*24122? 3103v v #
6045112? 1134121**
6811119? 975126v v 7345123? 1075158v v #
142114? 14106v v #P
v v
注:与正常组比较:*P
(下转第763页)
(
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上药物通过改善胰岛功能, 促进胰岛素分泌, 改善胰
岛靶器官敏感性, 并抑制糖的吸收而共同发挥降糖作用。
由结果可知, 中药可改善糖尿病大鼠胰岛形态, 抑制STZ 对糖尿病大鼠胰岛B 细胞的损伤, 或促进损伤B 细胞的恢复, 从而增加STZ 诱导糖尿病大鼠模型胰岛内B 细胞的数量。因此, 益气健脾活血法可治疗糖尿病的机理与其恢复胰岛内分泌功能, 增加胰岛素的分泌, 从而降低血糖有关, 通过降低血糖, 抑制高血糖诱发的糖尿病并发证的出现和糖尿病的进展。
参考文献:
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收稿日期:2006-12-12
果优于弥可保组(P 0105) ; 弥可保组亦有一定的增加神经生长因子表达的作用, 说明用药各组均有一定的促神经生长因子表达或促神经营养作用。
212 各组大鼠坐骨神经碱性髓鞘蛋白(MBP) 表达变化
积分光密度12014141? 2222153
**
6414141? 1631116*
9314175? 2101141*
9457135? 1925148*
10090193? 2132111
v v v v v
#
(上接第760页)
由上表可以看出, 模型组大鼠坐骨神经神经生长因子各项指标均明显低于正常组, 与正常组比较有显著差异(P
组正模
常型
别组组
n 107889
面积(L m 2) 60169? 10153
**
36143? 8134
表2 各组大鼠坐骨神经碱性髓鞘蛋白的表达变化比较( x ? s )
平均光密度181174? [1**********]? 8159**168131? 8122v 168142? 11145v 178192? 11166v v
v
平均黑度22103? 1318083162? 8159**99118? 8122**105169? 11145*
P
v v v
弥可保组小剂量组大剂量组
48149? 7103*47145? 8164*55136? 7111v #
114126? 11166v v #
注:与正常组比较:*P
v v
P
从上表可以看出, 糖尿病模型组周围神经组织
碱性髓鞘蛋白的面积、平均光密度、积分光密度及平均黑度都明显低于正常组, 与正常组比较有显著差异(P 0105) , 弥可保组与小剂量组的效果相当, 说明用药各组均能减轻其神经病变或有一定的促进神经修复作用。
3 讨论
神经生长因子(NGF) 为神经营养因子的重要组成部分, NGF 对神经髓鞘的雪旺细胞有调节作用, 参与神经的功能维持、结构完整以及损伤后的再生。
碱性髓鞘蛋白为神经髓鞘的主要成分蛋白, 对维护
神经功能的完整性起着重要的作用。本实验结果表明, 桑白皮提取物有一定的促进神经生长因子的表达, 增加髓鞘蛋白的表达作用, 能够使糖尿病周围神经病变得到一定程度的减轻和修复。
参考文献:
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2004, (3) .
收稿日期:2006-07-14作者简介:马松涛(1964-) , 男, 四川自贡人, 副教授, 医学博士, 从事糖尿病药物开发研究。