化妆品卫生学评价进展

公共卫生与预防医学２００５年第１６卷第３期

ＪｏｆＰｕｂ

ＨｅａｌｔｈａｎｄＰｒｅｙ

Ｍｅｄ

２００５，Ｖ０１．１６，Ｎｏ．３・６３・

・监督监测・

化妆品卫生学评价进展

何瑞

沈峻

［ｅｐ图分类号】Ｒ１１５【文献标识码】Ａ【文章编号】１００６—２４８３（２００５）０３—００６３—０３

随着人们生活水平的提高，化妆品与人们日常生活关系日益密切，化妆品的安全性和美容护肤效果越来越引起广大消费者的关注和国家监督管理部门的高度重视。１９８７年我国颁布了《化妆品卫生标准》（ＧＢ７９１６—８７）和《化妆品安全性评价程序和方法》（ＧＢ７９１９—８７），２００２年卫生部制定颁布了《化妆品卫生规范》。多年来我国卫生监督机构按法规规范要求，对化妆品进行监督检测，以保障化妆品的安全性和某些功效的确切性。目前大量新型原料开始在化妆品中使用，如胶原、海藻提取物、动物腺体和胚胎提取物等动物性原料ｎ矗’和一些植物提取物如茶多酚。），这些成分有可能给消费者带来潜在健康危害。游玉娥等“’报道了６４例益生素霜引起皮肤过敏病例，这些都给化妆品安全性评价提出更高要求，同时化妆品功效的细化也为化妆品原有评价方法提出了新的标准。为此，探索新的化妆品安全性评价方法和功效学评价方法是规范化妆品市场，保障消费者权益，美化生活的当务之急。１安全评价

我国《化妆品卫生监督条例》把化妆品定义为以涂抹、喷洒或其他类似方法散布于人体表面任何部位（皮肤、毛发、指甲、口唇等），以达到清洁、消除不良气味、护肤、美容和修饰目的的日用化学工业产品。美国《联邦食品、药品、化妆品法案》把化妆品定义为专门为清洁、美化、增加吸引力或者改变人体外表之目的而不影响人体机构和功能的物品。化妆品直接作用于人体表面不应损害皮肤细胞正常的生理功能，还应该增加皮肤对机械性、化学性、物理性刺激物的保护作用。通过不同的试验技术，观察化妆品原料、产品对动物、人体细胞生理方面、酶学方面的影响，可以评价化妆品对人体的安全性。

１．１动物试验

家兔和豚鼠对刺激物的反应性较人敏感，将其试验结果外推到人，是获得人体安全性试验数据的重要方法。卫生部《化妆品卫生规范》（２００２年版）规定的方法有一次皮肤涂抹试验和多次皮肤刺激试验，判断试验物对皮肤刺激性的有无或强弱；眼刺激试验进行眼刺激强度评价；皮肤变态反应试验，判断动物重复接触化妆品后皮肤是否产生过敏反应｝皮肤光毒性试验，判断皮肤一次性接触化妆品后暴露于紫外线下是否产生光毒性。１．２人体试验

人体斑贴试验是模拟人体致敏过程，预测受试物的潜在

作者单位；４３００７９武汉，湖北省卫生厅卫生监督局

万　

方数据致敏原性。将受试物０．０３ｍｌ或０．０３ｇ敷在受试者背部或前臂屈侧皮肤上，未做斑贴的背部或前臂屈侧作对照，记录受试者的皮肤反应，如皮肤脱屑、皲裂、水疱、色素沉着等，结合化妆品试用情况以及动物试验结果，作出是否安全的评价。１．３动物替代试验

传统的研究方法是通过动物试验来外推可能对人造成的相关危害，从保护动物的角度出发，目前化学品安全性评价需要向非整体动物的实验方法的方向转化。这些替代实验方法主要包括离体的组织器官和组织细胞培养方法、分子生物学方法等。利用细胞培养模型评价化妆品的有效成分是反映表皮细胞增殖、分化、衰老的一个简单快速的客观方法。’。日前利用体外细胞培养技术，进行化妆品安全性评价的方法主要有两种ｏ）。

１．３．１乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）渗出法细胞受损时有乳酸脱氢酶从细胞中渗出，测出的乳酸脱氢酶含量可反映细胞破坏程度，乳酸脱氢酶释放实验是一种快速灵敏的检测细胞损伤的实验方法。

１．３．２

ＭＴＴ法细胞存活和生长通过四唑盐比色实验来

反映化妆品对皮肤角质细胞的刺激作用。此方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测，其特点是灵敏度高、重复性好、操作简单。经济、无放射性污染。欧盟国家已将这种方法列为化妆品安全性评价程序的检测方法。２功效评价２．１祛斑

为了清除皮肤的瘢痕和表面缺陷，使皮肤露出清新完美的肤色。白１９８８年Ｗｅｉｓｓ首次证明祛斑维生素Ａ对改善老化皮肤粗糙和细皱纹有良好的促进作用以来，皮肤科专家发现ＡＨＡｓ可减弱角质细胞间的粘连性，使过多堆积的角质细胞脱落下来，从而消除细小皱纹，淡化或消退色斑。这些发现使ＡＨＡｓ在美容业和皮肤科临床广泛应用。

皮肤细胞再生增长率一般采用丹磺酰氯测定法。受试者是２８～５５岁，身体健康、无慢性皮肤病史的女性。在左、右前臂上涂抹含５％丹磺酰氯医用凡士林，接触２４ｈ。在受试者一侧涂抹ＡＨＡＳ制品，另一侧作为对照。每天检查以确定荧光斑消失所需的天数。Ａ为对照部位荧光斑消失的天数，Ｂ为受试部位荧光斑消失的天数，Ｇ为皮肤细胞再生长率，则

Ｇ一（Ａ－－Ｂ）／Ａ。

２．２保湿性

为了防止皮肤干燥皲裂，保湿剂是护肤品的必备原料之一，如甘油、多糖、透明质酸等在化妆品中常被用作保湿剂。

已报道的保湿剂性能评价方法包括红外线法、电导法、差示

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扫描法。但目前我国保湿剂吸水保湿性能的测定尚无国家标准。

刘玉兰等疆３提出通过吸湿保湿实验来评价化妆品的保湿性。将样品放在由饱和的硫酸氨水溶液作为相对湿度（ＲＨ）８１％，２０＂Ｃ恒温干燥器中，经４０ｈ后精确称取质量，求出吸湿率（％）一１００（ｍ。一ｍ。）／ｍ。。ｍ。为样品放置前质量，ｍ。为放置后的质量。保湿实验：将上述吸湿后的试样继续放置在由饱和碳酸钾水溶液作为ＲＨ４３％，２０℃恒温干燥４８ｈ，保湿率（０Ａ）一ｉｏｏｍ。／ｍｏ。式中ｍ。为样品含水质量，ｍ。为放置后样品含水质量。此方法简单可行，观察了相对湿度对吸湿和保湿效果的影响，但受温度、日光等环境条件的影响，结果不太稳定。２．３防晒性

紫外线根据其波长可分为ＵＶＣ、ＵＶＢ、ＵＶＡ三个区段。ＵＶＣ段可被臭氧分子吸收，不对人体产生危害。ＵＶＢ段是导致晒伤的根源，轻者出现灼痛、红肿，重者产生红斑、水肿及水疱。ＵＶＡ段不引起急性晒伤，但可达到皮肤的真皮层，使皮肤晒黑。针对ＵＶＡ、ＵＶＢ对机体的损伤特点不同，对化妆品防晒性的卫生学评价可分为ＵＶＡ、ＵＶＢ防晒性评价。

２．３．１

ＵＶＢ的卫生学评价对ＵＶＢ主要用防晒指数ＳＰＦ

（Ｓｕｎｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ）的大小来评价。ＳＰＦ的定义是使用防

晒化妆品的最小红斑量ＭＥＤ与未使用防晒化妆品的最小红斑量ＭＥＤ的比值。ＳＰＦ的测定方法分为生物体内法和生物体外法。

２．３．１．１生物体内法美国采用ＦＤＡ建议方法，用水杨酸芋醇脂（Ｈｏｍｏｓａｌａｔｅ）为统一标样，选择前臂曲侧为试验部位，受试面积约为４０ｃｍ２，样品涂量为２ｍｇ／ｃｍ２。采用日光或氙灯微光源，对受试者的皮肤进行照射，测定红斑量计算ＳＰＦ值。Ｎｏｄａ等ｎ∞比较不同光源测试对ＳＰＦ值的影响，结果显示氙灯是最适合的光源。在实验操作过程中，对ＭＥＤ的判断有较大的主观性。其中Ｋｅｆｋｅｎｓａ”定义ＭＤＥ为引起边缘清晰红斑的剂量，而另一种定义ｎ２’为刚好引起可见红斑的剂量。人体试验是评价化妆品防晒性卫生学评价不可代替的一种方法，测定ＳＰＦ值最可靠。但由于受受试者肤型、肤色、皮肤表面情况出汗等因素的影响，个体差异很人。生物体内法可模拟人体涂抹化妆品后对肌肤的实际防护情况，因而人体试验可与生物体外法相结合来综合评价化妆品。

我国《化妆品卫生规范》中规定了ＳＰＦ的测定方法：随机选取２０名无光敏史、无化妆品过敏史的受试者，测定每位受试者涂抹化妆品前的ＭＥＤ，用氙灯模拟日光，用ＵＶＢ辐照计测定发光强度。根据受试者的ＭＥＤ值和化妆品ＳＰＦ的估计值，计算各个剂量，从低到高依次照射规定时间，即刻观察皮肤反应，以出现可见红斑的最低的剂量作为ＭＥＤ，个体ＳＰＦｉ一涂化妆品的ＭＥＤ／不涂化妆品的ＭＥＤ。

２．３．１．２生物体外法Ｆｅｒｇｕｓｏｎｏ∞的透光试验是取透明膜５０ｃｍ２把化妆品涂抹均匀，氤灯直接照射，用波长为２７０ｎｍ的探头测出透光强度，未涂抹化妆品的透明膜作为对照。样品ＳＰＦ值一未涂化妆品透光强度／涂化妆品透光强

万　

方数据度。这种方法所用的透明膜是一种皮肤模拟制品，上面有纹理和小孔，与人体皮肤结果相似。同人体试验相比，这种透光试验的试验条件易于控制，结果重现性好，减少了人体试验个体差异对结果的干扰，并且为人体试验提供ＳＰＦ的估计值，使人体试验更科学合理。也可用新生ＳＤ大鼠表皮透光试验０４’。ＳＤ大鼠断颈后取皮、固定，均匀涂抹化妆品，剂量为２ｍｇ／ｃｍ２作透光测定，样品ＳＰＦ一未涂化妆品透光强度／涂化妆品透光强度。鼠皮试验同人体试验相关性好ｎ”。由于鼠皮试验比透明膜模拟试验复杂，现更倾向用透明膜模拟试验。杜小豪等“用吸光度进行化妆品的功效性卫生学评价。根据样品处理方法的不同，可分为薄膜法、加垫薄膜法、胶带法、溶液法。这些方法都是在紫外分光光度计上测定２８０～３２０ｎｍ的吸光度。近年来，相关仪器得到较大的发展，如美国Ｏｐｔｏｍｅｔｒｉｃｓ公司生产的ＳＰＦ一２９０测定仪，这种仪器具有操作简单、快速、测定成本低、结果与人体试验相关性好等优点。

２．３．２

ＵＶＡ防护与卫生学评价ＳＰＦ只表示产品对ＵＶＢ

的防护，随着人们对ＵＶＡ危害性认识的加深，人们在寻找对ＵＶＡ的防护评价方法。１９９０年美国的ＣＴＦＡ推荐ＵＶＡ评价方法为防护因子ＰＦＡ和快速色素转暗法。目前国际上

普遍采用的是ＰＦＡ（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ

Ｆａｃｔｏｒｔｏ

ＵＶＡ）法。一定强

度的ＵＶＡ照射在皮肤上，在一段时问后皮肤会出现比较稳定的黑化，使皮肤持续性黑化所用的紫外线量为最小持续黑化量ＭＰＰＤ（Ｍｉｎｍｕｍ

Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ

Ｐｉｇｍｅｎｔ—ｄａｒｋｅｎｉｎｇＤｏｓｅ）。

ＰＦＡ一涂化妆品后的ＭＰＰＤ／未涂化妆品后的ＭＰＰＤ。２．４美白性

化妆品的增白效果是指减少因日晒引起的色素沉着，抑制黑色素合成，降低肤色。化妆品美白作用的主要作用点是酪氨酸酶、黑素细胞和黑素的代谢。

２．４．１酪氨酸酶活性测定酪氨酸酶是一种膜结合蛋白，有酪氨酸羟基酶和多巴羟基酶两种酶活性。多巴醌是一种有色物质，可用紫外光谱来观察和测定。将含酪氨酸的磷酸盐缓冲液加入酪氨酸酶溶液，用７２１分光光度计４７５ｎｍ处测ＯＤ值，用不加样品及不加酶的试管作对照，酶活力抑制率（％）一（１一△Ａ７／ＡＡ）１００％，△Ａ’为加入美白剂后的吸光度，ＡＡ为空白对照管的吸光度。生化酶法较简单成熟，酶来源可以从蘑菇中得到，也可以从Ｂ１６黑色瘤细胞中得到ｎ”。体外酶法能快速对化妆品美自效能进行筛选。

２．４．２黑色素含量测定Ｂ１６黑色素细胞已逐渐应用于化妆品美白剂的功能性评价。方法如下：Ｂ１６黑色瘤细胞用０．１％葡萄胺培养至完全白化，再加入茶碱，促进细胞回复到黑色素合成状态。对细胞颗粒进行离心操作，用４２０ｎｍ测吸光度，计算黑色素含量。此方法经典，比体外生化法更客观、更接近使用效果，同时较人体试验快捷、简便。但由于需要专门将细胞破碎，提取黑色素进行比色分析，导致操作步骤比较复杂，实验要求高，应用受到一定的限制。

我国的化妆品的卫生学评价还停留在对皮肤和细胞的近期损害的安全性评价阶段。随着人们美容观念的提高，对

（下转第６６页）

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２．１．４悬浮剂在原料购进时，没有实行应索取该产品合格证后方能购买使用的原则，而造成原料不合格。２．２控制措施

针对上述危害关键控制点分析，组织实施ＨＡＣＣＰ系统的操作人员，采取了相应的措施。

２．２．１

采用危害分析关键控制点判断对确定各种原辅料、紫外线杀菌、桶盖的消毒，灌装环境作为关键控制点，强化从业人员的卫生知识培训，严格执行操作规程，结果显示，对这些ＣＣＰ采取控制措施前后，微生物污染状况有很大的区别。

从调查过程中可以看出，果味型饮料各生产环节中均存在不同程度的微生物污染，但根据果味饮料生产工艺的特点，即产品形成后必须经１０５～１２０＂Ｃ消毒。因此，不论生产环节是否存在微生物污染，但终产品仍符合国家卫生标准。这样的生产工艺使这类产品不仅在口味上和营养价值上受到一定的影响，还应对其潜在的危害予以一定的关注。在生产过程中应用ＨＡＣＣＰ，它的最大优点是强调预防为主，使食品生产企业以终末产品检验为主要标准的控制观念，转变为在生产环境下鉴别并控制住潜在危害的预防性方法。加强生产过程的卫生监督，实现与国际标准接轨，摒弃传统依靠终末产品检验的自身卫生管理模式。因此，这类型饮料生产过程中实施ＨＡＣＣＰ系统更显得重要。【参考文献】

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［３３

建立控制措施的标准①防止或最大限度地减少污

染；②杀灭微生物；③抑制细菌和霉菌的生长。

２．２．２控制措施①对车间空气进行消毒，增加紫外线灯管的密度，对紫外线强度达不到的灯管进行更换。②对操作人员进行卫生知识培训，提高操作人员卫生意识，做到勤洗手消毒，工作服做到勤洗勤换。③更换不合格加工原料，把好原料的进货渠道。④对生产容器及灌装管道在每批次生产完毕后必须用清水冲洗，再用蒸气消毒。⑤对各关键控制点做好经常的监测。

３检查ＨＡＣＣＰ的实施效果

在落实好各项控制措施后进行检查，并对各环节采样监测，核查ＨＡＣＣＰ的实施效果。现场检查情况比实施ＨＡＣＣＰ前有很大的改观，各生产车间的空气消毒设施完备，布局合理，清洗消毒池得到很好的利用。工作人员进入车间时能自觉地对手和鞋进行消毒和清洗，更衣室配备了衣服清洗设备。原料车间各种原料的进货渠道登记清楚，悬浮剂的品种也已更换。从实施控制措施后检测数据（表１）显示ＨＡＣＣＰ系统的实施取得了良好的效果，各工艺环节的卫生状况得到了明显改善。不定期对其产品的随机抽检，结果也表明微生物指标均符合国家标准。４讨论

在果味型饮料的生产过程中，运用ＨＡＣＣＰ理论与方法，对果味型饮料生产过程进行了全面、细致的调查和分析。

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（本文编辑：万美）

（上接第６４页）

化妆品的卫生学检验也应由安全性评价扩大到功效检验，从动物实验、人体实验向细胞实验、离体实验发展。寻找客观的化妆品功效评价方法，是规范化妆品市场，保护消费者利益的需要，是一项急需开展的研究工作。【参考文献】

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万方数据　

化妆品卫生学评价进展

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

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公共卫生与预防医学

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