淀粉酶检测试剂盒(碘-淀粉比色法)
淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)
简介：
淀粉酶(Amylase，AMS) 又称1，4-α-D-葡聚糖水解酶，是水解淀粉和糖原的酶类总称。淀粉酶测定方法主要分为天然淀粉底物方法和确定底物方法，前者的方法有碘-淀粉法，后者有以麦戊糖底物的方法，以4-NP-G 为底物的方法。
Leagene 淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法) 其检测原理是血清或血浆等样本中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等，碘液与未被水解的淀粉结合，生成蓝色复合。该试剂盒通过分光光度计检测660nm 处吸光度值，可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀粉酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考) ：
1、 KI 工作液： 4℃避光可保存一个月。 2、 准备样品：
① 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离
心取上清，-80℃冻存，用于AMS 的检测。
② 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后，
可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-80℃冻存，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。 ③ 高活性样品：如果样品中含有较高活性的AMS ，可以使用生理盐水或PBS 等进行
稀释，也可以采用ALP Assay buffer稀释。
④ 样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算
单位蛋白重量组织或细胞内的AMS 含量。
3、 AMS 检测：按照下表设置空白管、测定管、待测样本，溶液应按照顺序依次加入，并
注意避免产生气泡。如果样品中的淀粉酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行孔。 如果使用分光光度计，反应体系设置如下：
如果使用酶标仪，反应体系设置如下：
4、 轻轻混匀，分光光度计或酶标仪检测660nm 处吸光度，分光光度计比色杯光径1.0cm ，
蒸馏水调零，读取各管吸光度值(即A 测定和A 空白) 。一般应数小时内检测完毕。
计算结果：
液体样本AMS 活力(U/dl)=(A 空白-A 测定)/A 空白×80×稀释倍数 组织AMS 活力(U/mg)=(A mg/ml}
空白-
A 测定)/A 空白×80/{取样量(0.1ml)×待测样本蛋白浓度
参考区间(37℃，健康人) ：
血清淀粉酶活性：80～180U/dl 尿液淀粉酶活性：100～1200U/dl
注意事项：
1、 本试剂盒亦可用酶标仪进行检测，但检测的样本数相应增多。 2、 待测样品中不能含有AMS 抑制剂，同时需避免反复冻融。
3、 本试剂盒亦适用于其他样品的AMS 测定，尿液检测应先作20倍稀释后测定。 4、 AMS Assay buffer如果出现浑浊或絮状物，应弃用。 5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。