临床实验室定量测定室内质量控制工作指南

临床实验室定量测定室内质量控制工作指南

（讨论稿3）

Guideline for Internal Quality Control in Clinical

Laboratory Quantitative Measurement

(Draft 3)

卫生部临床检验中心

(二零零一年三月)

1前言

1.1 范围

1.2 术语

1.3 室内质控的目的

2 开展室内质控前的准备工作

2.1 人员培训

2.2 操作文件的建立

2.3 仪器的校准和保养

2.4 质控品的选择

2.5 质控品的正确使用与保存

3 室内质控方法的设计

3.1功效函数图法

3.2 简易质控法

3.3 操作过程规范（OPSpecs）图法

3.4 确定质控品浓度水平

4 室内质控的实际操作

4.1设定靶值

4.2设定控制限

4.3 特殊情况的处理

4.4更换质控品

4.5绘制质控图及记录质控结果

4.6质控规则的应用

4.7失控情况处理及原因分析

5 室内质控数据管理

5.1每月室内质控数据处理

5.2每月室内质控数据的保存

5.3每月上报的质控数据图表

5.4室内质控数据的周期性评价

次 目

6 参考文献

附录1. 美国CLIA'88能力比对检验的分析质量要求

附录2. 临床化学质控血清一般技术要求

附录3. 常用质控规则及意义

附录4. 用功效函数图对质量控制方法的设计实例

附录5. 简易质控法应用实例

附录6. 应用OPSpecs图设计室内质控方法的原理

附录7.临床实验室（定量测定）室内统计质控计算机模拟软件（QCCS）

附录8. 临床实验室（定量测定）室内统计质控规则设计、评价和应用软件（QC Easy）

1 前言

临床实验室要获得可靠的测定结果，需要建立一个全面的质量管理体系。在全面质量管理体系中，实验室内质量控制（以下简称室内质控）是一个重要的环节。它控制着自吸取样本至获得测定结果并对结果进行分析的整个测定过程，是保证高质量操作的必要措施，所有临床实验室的向患者提供报告的所有定量测定项目必须开展室内质控。《临床实验室定量测定室内质量控制工作指南》是为帮助临床实验室做好室内质控工作而制订的操作规程性文件。

1.1 范围

本指南的内容包括建立室内质控的目的，开展质控前应进行的准备工作，质控方法的设计，开展室内质控的具体操作方法及质控数据的管理等。本指南可做为临床实验室对定量分析项目开展室内质控时的操作指南。

1.2 术语

质量控制（质控）：为达到质量要求所采取的作业技术和活动。（1）质量控制包括作业技术和活动，其目的在于监视过程，并排除质量环中所有阶段中导致不满意的原因，以取得经济效益。（2）质量控制和质量保证的某些活动是相互联系的（GB/T 6583 1994）。

室内质控：实验室内为达到质量要求的操作技术和活动。（1）在医学实验室，室内质控的目的在于监测过程，以评价检验结果是否可靠，以及排除质量环节中所有阶段中导致不满意的的原因。（2）广义上室内质控适用于得出检验结果所有步骤的活动，从临床需要考虑，从收集标本，检测直至报告测定结果。

室间质量评价：由第三方机构采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果，并发现实验室本身不易发现的不准确性，了解各实验室之间结果的差异，帮助其校正，使其结果在具有可比性。这种评价是一种回顾性评价，旨在建立实验室间结果的可比性。 校准物/校准品：准备用于建立一个或多个定量值的任何物质。

控制限：判断质控品测定的允许范围的上、下限，通常以标准差的倍数表示。

质控规则：从质控品的测定数据分析该批测定操作是否合格的判断标准。用符号AL(或A-L)

表示, 其中A是测定的标本数或超过控制限(L)的质控测定值的个数，L是控制限。当质控测定值满足规则要求的条件时，判断该分析批违背此规则。

操作过程规范（OPSpecs）图：显示测定方法的不精密度、不准确度和已知质量保证水平达到规定质量要求需要采用的质控方法之间的关系的一种线性图。

精密度：在一定条件下进行多次测定时，所得测定结果之间的符合程度，通常表示测量结果中随机误差的大小。

准确度：是测量结果中系统误差与随机误差的综合，表示测量结果与真值的一致程度。 偏倚：指测定结果与真值的偏离程度。

变异系数：测定结果的标准差与平均值的百分比值，通常用CV%表示。

溯源性：通过一条具有规定不确定度的不间断比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是国家标准或国际标准联系起来的一种特性。

在控：质控结果在控制限之内。

失控：质控结果在控制限之外。

误差检出概率(Ped)：对常规测定过程中分析误差的检出概率称为误差检出概率。

假失控概率(Pfr)：当测定操作正确进行，除了方法的固有的误差外，在没有其它误差加入情况下如果质控过程中出现了失控信号,称为

1.3 室内质控的目的

室内质控是由实验室的工作人员采用一系列统计学的方法，连续地评价本实验室测定工作的可靠程度，判断检验报告是否可发出的过程。室内质控的目的是检测、控制本实验室测定工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高常规测定工作的批间、批内标本检测结果的一致性。

2 开展室内质控前的准备工作

2.1 培训实验室工作人员

在开展质控前，每个实验室工作人员都应对质控的重要性、基础知识、一般方法有较充分的了解，并在质控的实际过程中不断进行培训提高，在实际工作中培养一些质控工作的技术骨干。

2.2 建立标准操作规程

实施质控需要有一套完整的标准操作规程文件（SOP）做保障。例如仪器的使用、维护操作规程，试剂、质控品、校准品等的使用操作规程等。所有临床实验室都应建立一套较完整的SOP。

2.3 仪器的检定与校准

对所用分光光度计、量具要定期进行计量检定。对测定临床样本的仪器要按一定要求进行校准，校准时要选择合适的（配套的）标准品；如有可能，校准品应能溯源到参考方法或/和参考物质；对不同的分析项目要根据其特性确立各自的校准频度。

2.4 质控品的选择

质控品是保证质控工作的重要物质基础。根据质控品物理性状可有冻干质控品、液体质

控品和混合血清等；根据有无测定值可有定值质控品和非定值质控品。实验室可根据各自的情况选用以上任何一种质控品作为室内质控品。但做为较理想的质控品至少应具备以下一些特性：

（1）人血清基质，分布均匀；

（2）无传染性；

（3）添加剂和调制物的数量少；

（4） 瓶间变异小；

（5） 冻干品其复溶后稳定，2-8℃时不少于24小时，-20℃时不少于20天；某些不稳定成分（如胆红素、ALP等）在复溶后前4小时的变异应小于2%；

(6) 到实验室后的有效期应在1年以上。

判断质控血清质量的详细技术指标可参见附录2。

2.5 质控品的正确使用与保存

在使用和保管质控品时应注意以下几个方面：

（1） 严格按质控品说明书操作；

（2） 冻干质控品的复溶要确保所用溶剂的质量；

（3） 冻干质控品复溶时所加溶剂的量要准确，并尽量保持每次加入量的一致性；

（4） 冻干质控品复溶时应轻轻摇匀，使内容物完全溶解，切忌剧烈振摇；

（5） 质控品应严格按使用说明书规定的方法保存，不使用超过保质期的质控品；

（6） 质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定

3 室内质控方法的设计

各临床实验室可根据各自的情况及测定项目的不同选用不同的室内质控方法。

3.1 功效函数图法

功效函数图(Power function graph)为分析批失控概率（误差检出概率和假失控概率）与该批发生随机或系统误差大小关系的图，即表示统计功效与分析误差大小(临界随机误差△RE和临界系统误差△SE)的关系。在临床实验室难以进行这种特性的实验研究，因为必须控制许多变量。然而，计算机模拟研究就很容易地获得这种信息，所建立的研究模型包括所考虑的因素及变量。利用功效函数图可以评价不同质控方法的性能特征和设计质控方法，同时功效函数图也是建立OPSpecs图的基础。

3.1.1确定质量目标

这是设计质控方法的起点。质量目标可以用总允许误差(TEa)的形式表示。目前中国尚未确立各项目的总允许误差。美国和欧州分别提出了各项目的可接受的允许误差范围，如各实验室不能自行确定各项目的TEa时，可暂时参考美国临床实验室改进修改法案（CLIA'88 ）能力比对检验(PT)的评价限(见附录1)，将来有必要根据中国的实际情况，制定出我国临床检验定量测定项目的TEa。

3.1.2评价分析方法

对本实验室定量测定的项目逐一进行评价，确定每一项目的不精密度（用CV%表示）和不准确度（用Bias表示）。

3.1.3计算临界系统误差

临界系统误差△SEc = [(TEa - |bias| ) / s ] - 1.65）

3.1.4绘制功效函数图

功效函数图描述了控制方法的统计

3.1.5 评价质控方法的性能特征

质控方法的性能特征包括误差检出概率和假失控概率评价。通常误差检出概率达90%以上，而假失控概率在5%以下就可满足一般临床实验室的要求。

3.1.6选择质控规则及测定质控结果个数

根据评价的结果，选择的质控方法既要有高的误差检出概率和低的假失控概率，又要简单、方便计算。

图1. 利用功效函数图设计室内质控方法流程图。

3.2 简易质控法

对采用上述设计方法比较困难的实验室也可采用简易法进行质控方法的设计。

3.2.1 确定质量目标

以TEa作为质量目标，确定TEa的方法同3.1.1。

3.2.2评价分析方法

对本实验室定量测定的项目逐一进行评价，确定每一项目的不精密度（用CV%表示）和不准确度（用Bias表示）。

3.2.3计算临界系统误差

临界系统误差△SEc = [(TEa - |bias| ) / s ] - 1.65）

3．2．4将

3．2．5决定使用哪一个质控选择表格用作选择质控方法（见表1和2）。

3．2．6 利用△SEc值作为表格的行。

3．2．7利用你判断的稳定性作为表格的列。

3．2．8查出表格的质控规则和质控结果个数。

3．2．9 使用功效函数图来验证其性能。

3．2．10 选择最终需要执行的质控规则和质控结果个数。

表1.单规则固定限控制方法设计表格

单规则固定限 质控设计表格

过程稳定性(误差发生率，f)

差 >10%

中等 2-10%

良好

过 程 (△SEc) 能 力

12.0s N=3-6 12.5s N=6-8

12.0s N=2 12.5s N=4 13.0s N=6

(12.0s N=1) 12.5s N=2 13.0s N=4 13.5s N=6

2.0s | 3.0s

12.0s N=2 12.5s N=4 13.0s N=6

12.0s N=1 12.5s N=2 13.0s N=4 13.5s N=6

12.5s N=1 13.0s N=2 13.5s N=4

>3.0s

12.0s N=1 12.5s N=2 13.0s N=4 13.5s N=6

12.5s N=1 13.0s N=2 13.5s N=4

13.0s N=1 13.5s N=2

表2. Westgard多规则方法质控设计表格

Westgard多规则 质控设计表格

过程稳定性(误差发生率，f)

差 >10%

中等 2-10%

良好

过 程 (△SEc) 能 力

13s/22s/R4s/41s/12X N=6

13s/22s/R4s/41s/8X N=4

13s/22s/R4s/41s N=2

2.0s | 3.0s

13s/22s/R4s/41s/8X N=4

13s/22s/R4s/41s N=2

13s/22s/R4s/(41sW) N=2

>3.0s

13s/22s/R4s/41s N=2

13s/22s/R4s/(41s) N=2

13s/(41s) N=2

3.3 OPSpecs图法

OPSpecs一词是Operational Process Specifications的缩写，指的是实验室测定工作的操作过程要求。此法为Westgard近年提出的一种图示法，是测定方法的不精密度、不准确度和已知质量保证水平达到规定质量要求需要采用的质控方法之间的一种线条图。应用OPSpecs图可简化设计质控方法的过程。只要将测定方法的不精密度和不准确度标记在OPSpecs图上，就能直接查出选择的质控方法保证质量水平的能力。

3.3.1确定质量目标(Quality Goals)

以TEa作为质量目标，确定TEa的方法同3.1.1。

3.3.2 评价分析方法

对本实验室定量测定的项目逐一进行评价，确定每一项目的不精密度（用CV%表示）和不准确度（用Bias表示）。

3.3.3绘制OPSpecs图

根据各项目的TEa、不精密度、不准确度，画出OPSpecs图。可使用

3.3.4评价质控方法的性能特征

质控方法的性能特征包括误差检出概率和假失控概率评价。通常误差检出概率达90%以上，而假失控概率在5%以下就可满足一般临床实验室的要求。

3.3.5选择质控规则

质控规则是解释质控数据和判断分析批控制状态的标准。以符号AL(或A-L)表示, 其中

A是测定质控标本数或超过控制限(L)的质控测定值的个数，L是控制界限。当控制测定值满足规则要求的条件时，则判断该分析批违背此规则。可从OPSpecs图上得到适合的质控规则。常用的质控规则及意义见附录3。

3.3.6 确定测定质控结果个数

根据OPSpecs图给出的信息确定各项目测定质控结果的个数。

图2. 利用OPSpecs图设计室内质控方法流程图。 有关OPSpecs图设计方法的 原理参见附录4。

3.4室内质控品浓度水平

在选择质控品浓度水平这个数问题上，我们建议三级及三级以上医院的临床实验室，定量测定每批（不超过24小时）至少使用两个浓度水平的质控品。

二级、一级医院临床实验室，定量测定每批（不超过24小时）至少使用一个浓度水平（医学决定性水平）的质控品

3．2．6 利用△SEc值作为表格的行。

3．2．7利用你判断的稳定性作为表格的列。

3．2．8查出表格的质控规则和质控结果个数。

3．2．9 使用功效函数图来验证其性能。

3．2．10 选择最终需要执行的质控规则和质控结果个数

表1.单规则固定限控制方法设计表格

单规则固定限 质控设计表格

过程稳定性(误差发生率，f)

差 >10%

中等 2-10%

良好

过 程 (△SEc) 能 力

12.0s N=3-6 12.5s N=6-8

12.0s N=2 12.5s N=4 13.0s N=6

(12.0s N=1) 12.5s N=2 13.0s N=4 13.5s N=6

2.0s | 3.0s

12.0s N=2 12.5s N=4 13.0s N=6

12.0s N=1 12.5s N=2 13.0s N=4 13.5s N=6

12.5s N=1 13.0s N=2 13.5s N=4

>3.0s

12.0s N=1 12.5s N=2 13.0s N=4 13.5s N=6

12.5s N=1 13.0s N=2 13.5s N=4

13.0s N=1 13.5s N=2

表2. Westgard多规则方法质控设计表格

Westgard多规则 质控设计表格

过程稳定性(误差发生率，f)

差 >10%

中等 2-10%

良好

过 程 (△SEc) 能 力

13s/22s/R4s/41s/12X N=6

13s/22s/R4s/41s/8X N=4

13s/22s/R4s/41s N=2

2.0s | 3.0s

13s/22s/R4s/41s/8X N=4

13s/22s/R4s/41s N=2

13s/22s/R4s/(41sW) N=2

>3.0s

13s/22s/R4s/41s N=2

13s/22s/R4s/(41s) N=2

13s/(41s) N=2

3.3 OPSpecs图法

OPSpecs一词是Operational Process Specifications的缩写，指的是实验室测定工作的操作过程要求。此法为Westgard近年提出的一种图示法，是测定方法的不精密度、不准确度和已知质量保证水平达到规定质量要求需要采用的质控方法之间的一种线条图。应用

OPSpecs图可简化设计质控方法的过程。只要将测定方法的不精密度和不准确度标记在OPSpecs图上，就能直接查出选择的质控方法保证质量水平的能力。

3.3.1确定质量目标(Quality Goals)

以TEa作为质量目标，确定TEa的方法同3.1.1。

3.3.2 评价分析方法

对本实验室定量测定的项目逐一进行评价，确定每一项目的不精密度（用CV%表示）和不准确度（用Bias表示）。

3.3.3绘制OPSpecs图

根据各项目的TEa、不精密度、不准确度，画出OPSpecs图。可使用

3.3.4评价质控方法的性能特征

质控方法的性能特征包括误差检出概率和假失控概率评价。通常误差检出概率达90%以上，而假失控概率在5%以下就可满足一般临床实验室的要求。

3.3.5选择质控规则

质控规则是解释质控数据和判断分析批控制状态的标准。以符号AL(或A-L)表示, 其中A是测定质控标本数或超过控制限(L)的质控测定值的个数，L是控制界限。当控制测定值满足规则要求的条件时，则判断该分析批违背此规则。可从OPSpecs图上得到适合的质控规则。常用的质控规则及意义见附录3。

3.3.6 确定测定质控结果个数

根据OPSpecs图给出的信息确定各项目测定质控结果的个数。

图2. 利用OPSpecs图设计室内质控方法流程图。 有关OPSpecs图设计方法的 原理参见附录4。

3.4室内质控品浓度水平

在选择质控品浓度水平这个数问题上，我们建议三级及三级以上医院的临床实验室，定量测定每批（不超过24小时）至少使用两个浓度水平的质控品。

二级、一级医院临床实验室，定量测定每批（不超过24小时）至少使用一个浓度水平（医学决定性水平）的质控品。

4 室内质控的实际操作

4.1设定靶值

4.1.1稳定性较长的质控品

在开始室内质控时，首先要设定质控品的靶值。各实验室应对新批号的质控品的各个测定项目自行确定靶值。靶值必须在实验室内使用自己现行的测定方法进行确定。定值质控品的标定值只能做为确定靶值的参考。

4.1.1.1 暂定靶值的设定

为了确定靶值，新批号的质控品应与当前使用的质控品一起进行测定。根据20或更多独立批获得的至少20次质控测定结果，计算出平均数，作为暂定靶值。

以此暂定靶值作为下一个月室内质控图的靶值进行室内质控；一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数（第一个月），以此累积的平

均数做为下一个月质控图的靶值。

重复上述操作过程，连续三至五个月。 4.1.1.2 常用靶值的设立

以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据计算的累积平均数作为质控品有效期内的常用靶值，并以此作为以后室内质控图的平均数。 对个别在有效期内浓度水平不断变化的项目，则需不断调整靶值。 4.1.2 稳定性较短的质控品

在3-4天内，每天分析每水平质控品3-4瓶，每瓶进行2-3次重复。 收集数据后，计算平均数、标准差和变异系数。对数据进行异常值检验。如果发现异常值，需重新计算余下数据的平均数和标准差。以此均值作为质控图的靶值。 4.2设定控制限

对新批号质控品应确定控制限，控制限通常以标准差倍数表示。 4.2.1 稳定性较长的质控品 4.2.1.1 暂定标准差的设定

为了确定标准差，新批号的质控品应与当前使用的质控品一起进行测定。根据20或更多独立批获得的至少20次质控测定结果，计算出标准差，并作为暂定标准差。 以此暂定标准差作为下一个月室内质控图的标准差进行室内质控；一个月结束后，将该月的在控结果与前20次质控测定结果汇集在一起，计算累积标准差（第一个月），以此累积的标准差作为下一个月质控图的标准差。 重复上述操作过程，连续三至五个月。 4.2.1.2 常用标准差的设定

以最初20次质控测定结果和三至五个月在控质控结果汇集的所有数据计算的累积标准差作为质控品有效期内的常用标准差，并以此作为以后室内质控图的标准差。 4.2.2 稳定性较短的质控品

至于标准差，你使用的数据量越大，其标准差估计值将更好。 由于这个原因，我们并未推荐使用4.2.1中的重复数据来建立新的标准差。而是采用以前变异系数（CV）来估计新的标准差。

以前的标准差是几个月数据的简单平均或甚至是累积的标准差。这就考虑了检测过程中更多的变异。标准差等于4. 2 .1的平均数乘以以前变异系数（CV）。 4.2.3 控制限的设定

控制限通常是以标准差的倍数表示。临床实验室不同项目（定量测定）的控制限的设定要根据其采用的控制规则来决定。 4.3 特殊情况的处理（ Grubbs氏法） 对于某些不是每天开展的项目、有效期较短的试剂盒的项目，用上述方法计算获得平均数和标准差有很大的难度。采用Crubbs氏法，只需连续测定3次，即可对第3次检验结果进行检验和控制。

具体计算方法如下：

（1） 计算出测定结果（至少3次）的平均值（x）和标准差（s）。 （2） 计算SI上限值和SI下限值： SI上限 = （x 最大值 - x ）/s SI下限 = ( x - x最小值 ) / s

（3） 查表3，将SI上限 和 SI下限 与SI值表中的数值进行比较

表3 SI值表

N n3s n2s n n3s n2s 3 1.15 1.15 12 2.55 2.29 4 1.49 1.46 13 2.61 2.33 5 1.75 1.67 14 2.66 2.37 6 1.94 1.82 15 2.70 2.41 7 2.10 1.94 16 2.75 2.44 8

2.22 2.03 17 2.79 2.47 9 2.32 2.11 18 2.82 2.50 10 2.41 2.18 19 2.85 2.53 11 2.48 2.23 20 2.88 2.56

当SI上限和SI下限 值〈 n2s 时，表示处于控制范围之内，可以继续进行测定，并重复以上计算；当SI上限 和 SI下限 有一值处于n2s 和 n3s 值之间时，说明该值在2s – 3s范围，处于“警告”状态；当SI上限 和 SI下限有一值 〉n3s 时，说明该值已在3s范围之外，属“失控”。数字处于“警告”和“失控”状态应舍去，重新测定该项质控品和病人样本。舍去的只是失控的这次数值，其它次测定值仍可继续使用。

当检测的数字超过20次以后，可转入使用常规的质控方法进行质控。 4.4更换质控品

拟更换新批号的质控品时，应在

根据质控品的靶值和控制限绘制Levey-Jennings控制图（单一浓度水平），或将不同浓度水平绘制在同一图上的Z-分数图，或Youden图。将原始质控结果记录在质控图表上。保留打印的原始质控记录。

4.6 质控方法（规则）的应用

将设计的质控规则应用于质控数据，判断每一分析批是在控还是失控。 4.7 失控情况处理及原因分析 4.7.1失控情况处理

操作者在测定质控时，如发现质控数据违背了控制规则，应填写失控报告单，上交专业室主管（组长），由专业室主管（组长）做出是否发出与测定质控品相关的那批患者标本检验报告的决定。 4.7.2失控原因分析

失控信号的出现受多种因素的影响，这些因素包括操作上的失误、试剂、校准物、质控品的失效，仪器维护不良以及采用的质控规则、控制限范围、一次测定的质控标本数等等。失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的那批病人标本报告可能作废。此时，首先要尽量查明导致的原因，然后再随机挑选出一定比例（例如5%或10%）的患者标本进行重新测定，最后根据既定标准判断先前测定结果是否可接受，对失控做出恰当的判断。对判断为真失控的情况，应该在重做质控结果在控以后，对相应的所有失控患者标本进行重新测定。如失控信号被判断为假失控时，常规测定报告可以按原先测定结果发出，不必重做。 当得到失控信号时，可以采用如下步骤去寻找原因：

（1）立即重测定同一质控品。此步是主要是用以查明人为误差，每一步都认真仔细得操作，以查明质控的原因；另外，这一步还可以查出偶然误差，如是偶然误差，则重测的结果应在允许范围内（在控）。如果重测结果仍不在允许范围，则可以进行下一步操作。 （2）新开一瓶质控品，重测失控项目。如果新开的质控血清结果正常，那么原来那瓶质控血清可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者被污染。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。

（3）进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否需要更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂以查明原因。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。

（4）重新校准，重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。

（5）请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试剂的原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援了

5 室内质控数据的管理

5.1每月室内质控数据统计处理 每个月的月末，应对当月的所有质控数据进行汇总和统计处理，计算的内容至少应包括： （1）当月每个测定项目原始质控数据的平均数、标准差和变异系数。 （2）当月每个测定项目除外失控数据后的平均数、标准差和变异系数。

（3）当月及以前每个测定项目所有质控数据的累积平均数、标准差和变异系数。

5.2每月室内质控数据的保存

每个月的月末，应将当月的所有质控数据汇总整理后存档保存，存档的质控数据包括：

（1）当月所有项目原始质控数据。 （2）当月所有项目质控数据的质控图。

（3）4.1项内所有计算的数据(包括平均数、标准差、变异系数及累积的平均数、标准差、变异系数等 )。

（4）当月的失控报告单（包括违背哪一项失控规则，失控原因，采取的纠正措施）。

5.3每月上报的质控数据图表 每个月的月末，将当月的所有质控数据汇总整理后，应将以下汇总表上报实验室负责人： （1）当月所有测定项目质控数据汇总表。 （2）所有测定项目该月的失控情况汇总表。

5.4室内质控数据的周期性评价 每个月的月末，都要对当月室内质控数据的平均数、标准差、变异系数及累积平均数、标准差、变异系数进行评价，查看与以往各月的平均数之间、标准差之间、变异系数之间是否有明显不同。如果发现有显著性的变异，就要对质控图的均值、标准差进行修改，并要对质控方法重新进行设计。 6 参考文献：

（1）IFCC Approved Recommendation on Quality Control in Clinical Chemistry. Part 4. Internal Quality Control. 1983.

（2）NCCLS C24-A Internal Quality Control Testing : Principles and Definitions; Approved Guideline. 1991 （3）Proposed Guidelines for the Internal Quality Control of Analytical Results in the Medical Laboratory, Discussion paper from the members of the External Quality Assessment(EQA) Working Group A.(Eur J Clin Chem Clin Biochem, 34: 983 - 999, 1996;

附录1.

美国CLIA'88能力比对检验的分析质量要求 ─────────────────────────────────────

分析物或试验 可接受范围 ───────────────────────────────────── 常规临床化学

谷丙转氨酶 靶值±20% 白蛋白 靶值±10% 碱性磷酸酶 靶值±30%

淀粉酶 靶值±30% 谷草转氨酶 靶值±20% 胆红素 靶值±6.84mmol/L(0.4mg/dL)或±20%(取大者)

血气PO2 靶值±3s 血气PCO2 靶值±5mmHg 或±8%(取大者) 血气PH 靶值±0.04 钙，总 靶值±0.250mmol/L(1.0mg/dL) 氯 靶值±5% 胆固醇 高密度脂蛋白胆固醇 肌酸激酶 肌酸激酶同功酶 肌酐 ±15%(取大者)

葡萄糖 ±10%(取大者)

铁 乳酸脱氢酶 LD同功酶 镁 钾 钠 总蛋白 甘油三酯 尿素氮 素N)

尿酸 内分泌

皮质醇 游离的甲状腺素 人绒毛膜促性腺激素(HCG) T3 uptake 三碘甲状腺素原氨酸 促甲状腺激素 甲状腺素 者)

毒理学

酒精，血 血铅 ±0.019ummol/L(4ug/dL)(取大者)

酰氨咪嗪(carbamazepine) 地高辛(digoxin) 靶值±10% 靶值±30% 靶值±30%

MB升高(存在或不存在)或靶值±3s 靶值±0.265umol/L(0.3mg/dL)或 靶值±0.33mmol/L(6mg/dL) 或 靶值±20% 靶值±20%

LD1/LD2(+或-)或靶值±30% 靶值±25% 靶值±0.5mmol/L 靶值±4mmol/L 靶值±10% 靶值±25% 靶值±0.71mmol/L尿素(2mg/dL尿 或±9%(取大者) 靶值±17% 靶值±25% 靶值±3s 靶值±3s或(阳性或阴性) 靶值±3s(方法) 靶值±3s 靶值±3s 靶值±20%或12.9%(1.0ug/dL)(取大 靶值±25%

靶值±10%或靶值±25% 靶值±20%或0.2ug/L(更大)

乙琥胺(ethosuximide) 靶值±20% 庆大霉素 靶值±25% 锂 靶值±0.3mmol/L或±20%(更大) 苯巴比妥(phenobarbital) 靶值±20% 苯妥英(phenytoin) 靶值±25% 扑痫酮(primidone) 靶值±25% 普鲁卡因酰氨(procainamid)

(及代谢物) 靶值±25% 奎尼丁(quinidine) 靶值±25% 茶碱(theophylline) 妥布霉素(tobramycin) 丙戊酸 血液学

细胞识别 白细胞分类 的3s 红细胞计数 血细胞容积 血红蛋白 白细胞计数 血小板计数 纤维蛋白原 激活部分凝血酶时间 凝血酶原时间 一般免疫学

a1-抗胰蛋白酶 抗核抗体 抗-HIV 补体3 补体4 a-甲胎蛋白 肝炎(HBsAg,anti-HBc,HBeAg) IgA IgE IgG IgM 传染性单核细胞增多(症) 类风湿因子 风疹(Rubella)

靶值±25% 靶值±25% 靶值±25% 在分类上90%或更大的一致 靶值±在不同类型白细胞百分数上 靶值±6% 靶值±6% 靶值±7% 靶值±15% 靶值±25% 靶值±20% 靶值±15% 靶值±15% 靶值±3s 靶值±2个稀释或(阳或阴) 反应或不反应 靶值±3s 靶值±3s 靶值±3s

反应(阳性)或不反应(阴性) 靶值±3s 靶值±3s 靶值±25% 靶值±3s 靶值±2个稀释或(阳性或阴性) 靶值±2个稀释或(阳性或阴性) 靶值±2个稀释或(阳性或阴性)

附录2

常用质控规则及含义

质控规则是解释质控数据和判断分析批控制状态的标准。以符号AL(或A-L)表示, 其中A 是测定质控标本数或超过控制限(L)的质控测定值的个数，L是控制界限。当控制测定值满足规则要求的条件时，则判断该分析批违背此规则。

常用质控规则有：( : 平均数；s：标准差) 12s : 一个质控结果超过 ±2s，为违背此规则，提示警告。 12.5s : 一个质控结果超过 ±2.5s，为违背此规则，提示存在随机误差。 13s: 一个质控结果超过 ±3s，为违背此规则，提示存在随机误差。 R4s: 同批两个质控结果之差值超过4s, 即一个质控结果超过 + 2s，另一质控结果超过 - 2s。也适用于超过 + 2.5s及 - 1.5s，为违背此规则，表示存在随机误差。

22s : 两个连续质控结果同时超过 + 2s 或 - 2s，为违背此规则，表示存在系统误差。 41s : 一个质控品连续的四次测定结果都超过 + 1s或 - 1s，两个质控品连续两次测定都超过 + 1s或 - 1s，为违背此规则，表示存在系统误差。

10x : 十个连续的质控结果在平均数一测，为违背此规则，表示存在系统误差。

附录3.

临床化学质控血清一般技术要求

1、总体要求

质控血清应能在不同方法之间获得其组分的可比较的标定值，质控血清应尽可能与人血清样本一致，减少基质效应, 调制物(如添加的代谢物及酶制品等)应尽可能的纯，反应速率尽量与人血清一致，并考虑合理的成本。 2、包装瓶

装质控血清的瓶子应坚固耐用，材料应为玻璃或惰性塑料，最好是棕色。须是平底瓶并有牢固的瓶塞，不需任何工具就能打开瓶塞。瓶塞应密封并有盖，要易于开启及盖上。在运输过程中不易被损坏。 3、技术规格

3.1 质控血清应满足质控基本要求，绝对不能含有变性的物质（如蛋白质、脂蛋白和酶），用湿化学分析方法没有或只有很小的基质效应。 3.2 制备质控血清的材料最好来源于人血。

3.3 保证质控血清中HIV I 、HIV II 抗体、乙肝表面抗原、丙型肝炎抗体或其它相应可能被感染因素应为阴性。

3.4 期望的成份、浓度、稳定性

质控血清须包含实验室室内质控所需项目。浓度应分别为参考值、病理值、医学决定性水平等。稳定性应在一年半以上。

3.5 添加剂及调制物

添加物和调制物的数量应尽可能的少。所有添加剂和调制物应有文件记录，尽管包含有类型、来源、含量和纯度；不能加入稳定剂和非生理性缓冲液；反作用剂和其他添加剂应在生理水平。

3.6 其他通用要求

●pH应为7.2 - 7.8（37℃时）；

●瓶间变异：酶类项目CV

● 原始质控血清残留柠檬酸盐应小于100μmol/L；

● 应说明质控血清中加入的其他物质，在质控血清中浓度与加入量应保持不变； ● 从质控血清到货日期计还需应有18个月的有效期； ● 最长复溶时间：≤30分钟；

● 复溶后的稳定性：稳定时间在2-8℃时不少于24小时，-20℃时不少于30天；不稳定成分（如胆红素、ALP）在复溶后前4个小时的变异应小于2%； ● 细菌记数：

● 吸光度检测达到如下标准：

340nm:

应附有质控血清稳定性文件记录，应有不同温度条件下的稳定性记录。 4、产品应附有产品使用说明书。

参考文献：

Adam Uldall. Elements of A Tender for Purchasing Costum-Made Control Serum. EQAnews 9: 10-11, 1998.

附录4. 用功效函数图对质量控制方法的设计实例

1．下表概括了在设计过程前三步所需要的资料。以允许总误差(TEa) 的形式规定临床质量要求。此处的允许总误差是根据美国CLIA'88能力比对检验评价限。在测定方法稳定性能的估计上, 我们采用长期室内质控数据来估计测定方法的固有不精密度或随机误差，方法的不准确度（偏倚）是根据参加澳大利亚病理化学质量保证计划确定（测定结果与靶值之间的偏差）。

表1.每一试验项目的允许总误差、分析的不精密度（变异系数）、不准确度（偏倚）、临界系统误差和临界随机误差

试验项目 单位

控制物浓度 允许总误差 CV(%) Bias(%) △SEc △REc 钙

mmol/L 3.34

0.250(7.5%) 2.09 0.03 1.79 2.17

葡萄糖 mmol/L 6.59 10% 1.29 0.68 5.57 4.38 尿 素

mmol/L 24.0 9% 2.01 0.09 2.78

2.69 尿

酸

mmol/L

292

17%

1.32

0.61

10.77

7.53

肌

酐

mmol/L

169

15%

2.12

3.83

3.62

3.19

总蛋白

g/L

49.6

10%

0.84

0.01

10.24

7.21

白蛋白

g/L

35.7

10%

1.19

2.91

4.31

3.61

胆固醇

mmol/L

3.2

10%

1.82

0.25

3.71

3.25

甘油三酯

mmol/L

1.5

25%

2.74

1.42

4.96

5.22

ALT

U/L

49.5

20%

2.16

1.66

6.84

5.15

AST

U/L

58.3

20%

2.39

0.04

6.02

4.65

乳酸脱氢酶

U/L

125

20%

2.20

4.50

5.02

4.27

肌酸激酶

U/L

224

30%

1.68

1.19

15.50

10.39

2.由计算机模拟程序(QCCS)确定候选控制方法的性能特征。通过图形插入法可估计假失控概

率和误差检出概率。

3.选择控制方法检出系统误差概率90%为目标， 同时维持尽可能低的假失控。

随机误差高检出率是其次考虑的目标。不同项目推荐的质控规则和质控结果个数见表2。

表2 每一试验项目的控制规则及质控结果个数

试验项目

控制规则

N

假失控概率

误差检出概率

钙

1-3s/2-2s/R-4s/4-1s/10-x

4

0.03

87

葡萄糖

1-3s

1

0.00

90

尿 素

1-3s/2-2s/R-4s/4-1s/10-x

2

0.01

98

尿 酸

1-3s

1

0.00

90

肌 酐

1-3s

2

0.002

90

总蛋白

1-3s

1

0.00

90

白蛋白

1-2.5s

1

0.01

90

胆固醇

1-3s

2

0.002

90

甘油三酯

1-3s

1

0.00

90

ALT

1-3s

1

0.00

90

AST

1-3s

1

0.00

90

乳酸脱氢酶

1-3s

1

0.00

90

肌酸激酶

1-3s

1

0.00

90

附录5. 简易质控法应用实例

本研究以胆固醇测定为例说明质控方法设计过程：

1. 胆固醇测定允许总误差TEa为10%

2. 胆固醇测定的标准差s=2%, 偏差bias=2%

3. 临界系统误差△SEc=2.35s

4.为了保守起见，将方法稳定性定为差

5．使用两种选择表格

6．选择中间行

7．选择左列

8．推荐的质控规则为1-2s,N=2; 1-2.5s,N=4和13s/22s/R4s/41s/8X , N=4

9．用临界误差图来验证其性能。误差检出为80%至90%范围内，注意1-2s,N=2具有较高的

假失控概率 - 大约9%。

10．使用的质控规则可为1-2.5s,N=4或13s/22s/R4s/41s/8X , N=4

表1 利用质控选择表格选择质控方法工作流程表

试验项目：胆固醇

试验者：王治国

日期：1998年8月

第一步：规定质量要求

在某一决定性水平

第二步：确定不精密度

不准确度

第三步：计算临界系统误差

仪器：Hitachi 7170A

实验室名称：检验中心临床化学室

TEa或TEPT 10%

Xc 200mg/dL(5.17mmol/L)

smeas 2%

Bias 2%

△ SEc=[(TE-|Bias|)/s]-1.65 =[(10-2)/2]-1.65=2.35

第四步：稳定性分类

差

中等

良好

F > 10%

F = 2-10%

F

第五步：选择质控表格

单规则

多规则

两者

第六步：利用△SEc选择表格行

上行

中行

下行

第七步：根据稳定性选择表格列

左

中

右

第八步：使用质控设计表格查出规则和质控结果个数

第九步：使用功效函数图来验证其性能

质控规则 质控结果个数 假失控概率（Pfr） 误差检

出概率(Ped)

13s/22s/R4s/41s/8X (2批) 4 0.03 0.97

13s/22s/R4s/41s/8X （1批） 4 0.03 0.87

1-2.5s 4 0.04 0.85 1-2s 2 0.09 0.85

第十步：选择质控方法

1-2.5s,N=4或13s/22s/R4s/41s/8X , N=4

应用OPSpecs图设计室内质控方法的原理

操作过程规范（Operational Process Specifications，简称OPSpecs）图显示的是测定方法

的不精密度、不准确度和已知质量保证水平达到规定质量要求需要采用的质控方法之间的一

种线条图。OPSpecs图可用于证实当前统计质控的方法是否适当，或选择新的控制方法是否

能达到分析质量要求。由于不需计算临界误差并减少了不必要的操作，应用OPSpecs图可

简化设计质控方法的过程。只要将测定方法的不精密度和不准确度标记在OPSpecs图上，

就能直接查出选择的质控方法保证质量水平的能力。

1. 规定操作要求

全面质量管理强调用

操作过程规范（OPSpecs)指的是实验室测定工作的操作过程要求（规范），简称为操作要求（规范）（Operational Specifications）。它表述了为达到允许的不精密度和不准确度所应采用的统计质控方法，以及保证常规操作能达到预期的质量要求的已知概率。换言之，OPSpecs图包含了测定方法所允许的标准差和偏差、质控方法等信息，通过这些信息可获得质量保证的水平，进而可保证测定结果能够满足医学上的质量要求。

如图1所示，OPSpecs图中y轴为允许偏差（%），x轴为允许标准差（%）。图中最高的斜线表示当测定方法非常稳定时的不精密度和不准确度的最大允许限，规定总误差为偏差(Bias) + 2s，此总误差常用于方法评价时判断是否可接受的标准。下面的三条斜线分别表示当测定方法不稳定存在系统误差时，需要用不同的质控方法（每条斜线代表一种质控方法）进行质控时的常规操作限。使用OPSpecs图时，将测定方法的不精密度和不准确度画在图上，确定实验室的操作点（Operational point），然后将它与不同质控方法的常规操作限比较。常规操作限高于操作点的质控方法是可采用的；它们可达到如图所规定的保证水平，且成为候选的质控方法。但最终选择还要考虑所需质控测定值个数、失控概率及执行的难易程度。 OPSpecs图是为快速评价保证每日常规测定操作能达到规定的质量要求所需常规操作条件（精密度、准确度和质控方法）而提供的简单图形工具。这种简化的方法是通过融合临界误差图和误差检出概率得到的。

2. 从质量-计划模型导出OPSpecs图

建立质量-计划模型时，应考虑可能影响实验室试验结果的因素：从临床的角度看有生物变异（个体内变异）、分析前变异及测定变异等。从测定角度看则局限于测定的变异，如测定的不精密度、测定的不准确度、基质偏差和质控等。

不论从测定或临床角度都需要把质量要求转化为常规测定操作中的不精密度、不准确度、质控规则和质控测定值个数以及它们之间的数学关系来表示。表示随机误差和系统误差的分量与美国CLIA88 PT标准之间的关系可用下式表示：

TEPT = | biasmeas + biasmatx | + △SEcontsmeas+ z△REcontsmeas （公式2-1） 其中TEPT是由CLIA88 PT规定的总允许误差；biasmeas是测定方法的偏差(稳定的不准确度)；biasmatx是由于干扰和测定方法缺乏特异性的基质偏差；smeas是测定方法的标准差(稳定的不精密度)，它与测定方法的灵敏度和检出限有关；△SEcont是系统误差的变化（不稳定的不准确度）和△REcont是随机误差的变化（不稳定的不精密度）；后两者可由质控方法检出，z是与超过质量要求概率有关的倍数（通常定为1.65，其最大缺陷率为5%）。 简化公式2-1，用biastotal 表示biasmeas + biasmatx，可得下式：

TEPT = | biastotal | + △SEcontsmeas+ z△REcontsmeas （公式2-2）

用自动分析仪器测定时，一般选择的质控方法是基于检出系统误差，把△REcont定为1.0，提供的简化模型如下：

TEPT = |biastotal |+△SEcontsmeas + zsmeas （公式2-3）

通过解决控制项（让△SEcont=△SEcrit ）可计算出多大的临界系统误差（△SEcrit）才能使测定方法达到要求的质量，以下式表示：

△SEcrit = (TEPT - |biastotal |)/smeas - z （公式2-4）

在用手工方法测定时，应选择检出随机误差的质控方法，

则 △SEcont=0.0，简化后的公式如下：

TEPT = | biastotal | + z△REcontsmeas （公式2-5）

通过解决控制项（让△REcont=△REcrit ）可计算出多大的临界随机误差（△REcrit）才能使测定方法达到要求的质量：

△REcrit = (TEPT - |biastotal |)/zsmeas （公式2-6）

这些公式对于理解分析过程的质量要求(TEPT)、测定方法性能（biastotal ，smeas）和质量控制方法性能（△SEcont，△REcont）之间的关系是很实用的。还有其它应考虑的因素：如由校准过程，参考物等引起的偏差和变异。建立了适当的质量-计划模型，如上面的公式，实验室可以确定常规测定过程中要求的实际工作条件。这些是操作的条件，是达到规定的分析质量的保证，包括有允许的不精密度，允许的不准确度和应采用质控方法（控制规则，控制测定结果个数和已规定的分析质量保证（AQA））。

3.功效函数图与OPSpecs图之间的关系

质控方法提供的质量保证水平与检出造成超过质量要求的临界分析误差的概率有关。在应用质量-计划模型时，从功效函数图（分析批失控概率与该批发生随机或系统误差大小关系图）可查出某一质控方法的△SEcont和△REcont值。

将这些值作为△SEcont代入公式2-3后，就可算出CLIA’88 PT的质量要求与测定方法不精密度、不准确度以及分析质量保证水平之间的关系。如将公式2-3重新整理以表示允许不准确度与分析质量要求，测定方法不精密度和质量控制性能的函数关系，可以看出OPSpecs图与质量-计划模型之间的一般关系，如下式：

biastotal = TEPT -（ △SEcont + z ）smeas

这一公式形式（y = a + bx）显示了不准确度（y轴，biastotal）与不精密度（x轴，smeas）的线性关系，y轴截距相当于TEPT ，负斜率依赖于质量控制方法性能。不同的△SEcont值对不同的质控规则、不同的质控测定值个数及不同的误差检出水平（分析质量保证，AQA）可获得不同的允许不准确度限。

4. 制作OPSpecs图

电子表格软件(Excel)能用于执行质量-计划模型要求的计算，并以图形方式表示结果。通过建立一系列smeas值表就可计算出相应的biastotal值，计算过程是相当容易的。△SEcont值相当于不同的质量保证水平，可从功效函数图中获得，这就提供了质量控制方法的规定输入量。其它输入量有质量要求、观测的不精密度和不准确度等。图形显示y轴为biastotal ，x轴为smeas。为了使图形可用于任何试验或项目，biastotal ，smeas均用靶值或医学决定性水平的百分数表示。目前已有专用软件问世，如质量控制QC Easy程序，就可用来绘制OPSpecs图。

在作OPSpecs图时，最常见的情况是在规定的质量要求下，使用具有规定的保证水平的各种质控方法取得所需的不精密度和不准确度。对不同的质量要求和不同的保证水平制作出不同的图形。最有用的OPSpecs图是90%和50%保证水平时的图。

5. 利用OPSpecs图选择控制方法应用举例

分析系统：宝灵曼试剂，Hitachi 7170A自动生化分析仪

测定项目：血糖、尿素

表1概括了在设计过程前三步所需要的资料。以总允许误差(TEa) 的形式规定临床质量要求。此处的总允许误差是美国CLIA'88能力比对检验所规定的评价限。对于测定方法的稳定性能, 我们采用长期室内质控数据来估计测定方法的固有不精密度，方法的不准确度（偏

倚）是根据参加澳大利亚病理化学质量保证计划确定的（测定结果与靶值之间的偏差）。

表1 每一测定项目的允许总误差、测定方法的不精密度（变异系数）、不准确度（偏差） ─────────────────────────────────

测定项目 单位 质控物浓度 允许总误差(CLIA'88) CV(%) Bias(%) ─────────────────────────────────

葡萄糖 mmol/L 6.59 10% 1.29 0.68 尿 素 mmol/L 24.0 9% 2.01 0.09 ─────────────────────────────────

根据QC Easy计算机软件得出不同允许总误差条件下，保证90%（或50%）误差检出的质量的 OPSpecs图。

根据上面的 OPSpecs图，可得出每一测定项目的控制规则和质控结果个数，见表2。

表2 每一试验项目的控制规则及质控结果个数

────────────────────────────────────────────

试验项目 控制规则 N 假失控概率（Pfr） 误差检出概率（Ped）

────────────────────────────────────────────

葡萄糖 1-3.5s 1 0.00 90 尿 素 1-3s/2-2s/R-4s/4-1s 2 0.02 90 ────────────────────────────────────────────

6. 小结

质量控制计划涉及到一系列步骤：从规定试验的质量要求开始，然后要评价方法的精密度和准确度，寻找适当的OPSpecs图，并将方法的精密度和准确度作为操作点绘制在OPSpecs图上，进而确定控制规则和控制测定结果个数，最后通过确定全面质量控制策略来平衡统计质量控制和其它非统计成分。图1为这些步骤的流程图。