碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)
简介：
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP 或AKP) 为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。
碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法，其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。通过分光光度比色法测定510nm 处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考) ：
1、 配制标准品工作液：。按照下表稀释系列标准品溶液。
2、 准备样品：
① 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离
心取上清，-80℃冻存，用于碱性磷酸酯酶的检测。
② 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的
测定，尿液通常也可以直接用于测定，-80℃冻存，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。
③ 高活性样品：如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或
PBS 等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。
3、 加样：按照下表设置对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免
产生气泡。如果样品中的碱性磷酸酯酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行管。
4、 用分光光度计，以0号管(ddH2O) 调零，读取对照管、标准管、测定管的510nm 吸光
度(即A 对照、A 标准、A 测定) ，如无法检测510nm ，亦可检测500～530nm 范围内吸光度，一般应数小时内检测完毕。
计算结果：
以系列Phenol 标准(1～5号管) 对应的金氏单位为x 轴，以相应的A 标准(1～5号管) 为y 轴，绘制标准曲线。以A 测定-A 对照的差值为实际的吸光度，用该差值与标准曲线进行对比，求出酶活力单位。
参考区间(37
注意事项：
1、 待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。 2、 如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。
3、 所测样本的值高于标准曲线的上限，应稀释样品后重新测定。 4、 空白管如果显红色，说明ALP 显色液不可用，应丢弃。 5、 加入显色基液时，应迅速，并且及时混匀，否则显色不充分。 6、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。