真菌提取试剂盒
真菌基因组DNA 快速抽提试剂盒试剂盒组成
组分
Buffer Digestion
Buffer PF
TE Buffer (pH 8.0)
操作手册SK8229,50次24 ml12 ml10 ml1份SK8230,100次48 ml24 ml20 ml1份
保存方法及注意事项
本试剂盒于常温运输,室温(15-25°C)保存,有效期为一年,4°C保存时间更长。
Buffer Digestion中含有刺激性化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后,请立
即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
产品介绍
本试剂盒是生工生物工程(上海)有限公司最新研制成功的一种真菌基因组DNA 快速抽提试剂盒。无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂。从100 mg新鲜大型真菌(如蘑菇)样品中可以获得10-20 µg DNA,OD 260/OD280比值一般为1.7-
1.9。抽提获得的DNA 可用于酶切、PCR 、文库构建、Southern blot等相关实验。标准抽提步骤
自备材料:水浴锅、小型高速离心机(最大离心力 ≥ 12,000 × g)、1.5 ml离心管、75%乙醇、异丙醇、β-巯基乙醇等。
Buffer Digestion在低温下可能产生沉淀,使用前请检查,如有沉淀,请于65°C溶解后使用。
提前将水浴锅调至65°C备用。
1. 取50-100 mg新鲜大型真菌(如蘑菇)或20 mg干燥的子实体或菌丝用液氮研磨成粉末,加入到1.5 ml离心管中。加入400 µl Buffer Digestion和4 µl β-巯基乙醇,震荡混匀。65°C水浴1 h至细胞完全裂解。
2.
3. 加入200 µl Buffer PF,充分颠倒混匀,-20°C冰箱放置5 min。室温10,000 rpm 离心5 min,将上清液(500-550 µl)转移到新的1.5 ml离心管中。
4. 加入等体积的异丙醇,颠倒5-8次使之充分混匀,室温放置2-3 min。室温10,000 rpm 离心5 min,弃上清。
加入1 ml 75%乙醇,颠倒漂洗1-3 min,10,000 rpm 离心2 min,弃上清。5.
6.
7. 重复步骤5一次。开盖室温倒置5-10 min至残留的乙醇完全挥发。
8. 得到的DNA 用50-100 µl TE Buffer溶解。提取的DNA 可立即进行下一步实验或-
20°C保存。