7种藻类中总砷和无机砷含量的测定
中国海洋药物杂志２００７年４月第２６卷第２期
Ｃｈｉｎ＿，Ｍａｒ
Ｄｒｕｇｓ，２００７Ａｐｒｉｌ，Ｖ０１．２６Ｎｏ．２
７种藻类中总砷和无机砷含量的测定△
杨剑，‘范莹２，迟少云１．吴爱英１。李欣荣１
（１．青岛市药品检验所。山东ＩＩｔ盘，２６６０７１；２．济南军区青岛第一疗养院．山东青岛２６６０７１）
摘要：目的测定７种藻类中总砷争无机砷的含量．方法采用微波消解和盐酸浸提处理，氢化物原亍荧光
光谱法测定总砷和无机砷的含量．结果测定的检出限为０．０３３ｔ．ｔｇ・Ｌ～，相对标准差（ＲＳＤ）为１．６５％・总砷
和无机砷测定的平均回收率分别为９６．５３％和９６．８０％。结论７种藻类的总砷含量在２．７９～９５．１２ｒａｇ‘ｋｇ＿１之问。无机砷的含量在０．１４～３．７２ｍｇ・ｋｇ一１之间，其中海藻的无机砷舍量最高。关键词：藻类；总砷；无机砷
中图分类号：Ｑ９４９．２；Ｒ９３５．１文献标识码：Ａ文章编号：１００２—３４６１（２００７）０２—００４３。０４
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌａｒｓｅｎｉｃａｎｄｉｎｏｒｇａｎｉｃａｒｓｅｎｉｃｉｎ
ｋｉｎｄｓｏｆａｌｇａｅ
ＹＡＮＧＺｈａ０１，ＦＡＮＹｉｎ９２，ＣＨＩ
ｓｅｖｅｎ
Ｓｈａｏ—ｙｕｎｌ，ＷＵ
Ａｉ—ｙｉｎ９１，ＬＩＸｉｎ—ｒｏｎ９１
（１．ＱｉｎｇｄａｏＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６０７１，Ｃｈｉｎａ；２．ＱｉｎｇｄａｏＴｈｅＦｉｒｓｔ
ＳａｎａｔｏｒｉｕｍｏｆＪｉｎａｎＣｏｍｍａｎｄｏｔＰＬＡ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６０７１，Ｃｈｉｎａ）
ｋｉｎｄｓｏｆａｌ—
ａ—
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅｔｈｅｔｏｔａｌａｒｓｅｎｉｃａｎｄｉｎｏｒｇａｎｉｃａｒｓｅｎｉｃｉｎｇａｅ．ＭｅｔｈｏｄＴｈｅｔｏｔａｌ
ｓｅｖｅｎ
ａｒｓｅｎｉｃａｎｄｉｎｏｒｇａｎｉｃａｒｓｅｎｉｃｉｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｅ
ｔｏｍｉｃｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃａｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙａｆｔｅｒｂｅｉｎｇｄｉｇｅｓｔｅｄｂｙｍｉｃｒｏｗａｖｅａｎｄｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈＨＣｌｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｗａｓ０．０３３＾ｔｇ・Ｌ～．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｗａｓ１．６５％，ａｎｄｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ９７．３６
ｇａｎｉｃａｒｓｅｎｉｃｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
０Ａ
ａｎｄ
９７．２８％ｆｏｒ
ｔｏｔａｌａｒｓｅｎｉｃａｎｄｉｎｏｒ—
ｓｅｖｅｎ
ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｔｏｔａｌａｒｓｅｎｉｃｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｔｈｅｋｉｎｄｓｏｆａｌｇａｅ
ｗｅｒｅｂｅｔｗｅｅｎ
ｗｅｒｅｂｅｔｗｅｅｎ２．７９ａｎｄ９５．１２ｍｇ・ｋｇ一１ａｎｄｔｈｅｉｎｏｒｇａｎｉｃａｒｓｅｎｉｃ
ｃｏｎｔｅｎｔｓ
０．１４ａｎｄ３．７２ｍｇ・ｋｇ～．Ｓａｒｇａｓｓｕｍｈａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎｏｒｇａｎｉｃａｒｓｅｎｉｃｃｏｎｔｅｎｔｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｌｇａｅ；ｔｏｔａｅａｒｓｅｎｉｃ；ｉｎｏｒｇａｎｉｃａｒｓｅｎｉｃ
砷及其化合物作为全球重点监测的３０种污染物之一，被国际癌症研究机构（Ｉｎｔｅｒ—
ｎａｔｉｏｎａｌＡｇｅｎｃｙ
ｆｏｒＲｅｓｅａｒｃｈ
ｏｎ
《中国药典））２００５年版‘“引。海带，裙带菜，紫菜和石花菜等是食用藻类，同时也具有一定的药用价值［６、日。本文测定了上述７种藻类的总砷及无机砷含量。
实验材料试验材料
海藻，马尾藻科植物海蒿子Ｓａｒｇａｓｓｕｍｐａｌｌｉｄｕｍ（Ｔｕｒｎ．）Ｃ．Ａｇ．的干燥藻体；昆
Ｃａｎｃｅｒ，
ＩＡＲＣ）确认为致癌物Ⅲ。砷以不同的化学形式存在，包括无机砷（三价砷和五价砷）以及有机砷。三价无机砷剧毒，五价无机砷的毒性低于三价无机砷，而有机砷毒性较小¨Ｊ。研究表明，海洋生物对砷有很强的富集能力嘲。海藻，昆布作为常用海洋中药，收载于
１
１．１
△基金项目：青岛市科技发展计划项目（０４—３一ＨＨ・４４）
＊通讯作者：杨钊，男，博士Ｔｅｌ；０５３２—８５７３５１８４；Ｅ—ｍａｉｌ：ｙａｎｇｚｈａｏｌｌ０３＠ａｈｏｏ．ｃｏｎｌ．ｃｎ
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布，翅藻科植物黑昆布Ｅｃｋｌｏｎｉａ
ｋｕｒｏｍｅ
Ｏｋａｍ．的干燥叶状体；海带，海带科植物海带ＬａｍｉｎａｒｉａｊａｐｏｎｉｃａＡｒｅｓｃｈ．的干燥叶状体；海带根，海带科植物海带Ｌａｍｉｎａｒｉａｊａ－
ｐｏｎｉｃａ
Ａｒｅｓｃｈ．的干燥根部；裙带菜，翅藻科
植物Ｕｎｄａｒｉａｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ（Ｈａｒｖ．）Ｓｕｒ．的干燥叶状体；紫菜，红毛菜科植物甘紫菜
Ｐｏｒｐｈｙｒａ
ｔｅｎｅｒａ
Ｋｊｅｌｌｍ．的干燥叶状体；石
花菜，红翎菜科植物琼枝Ｅｕｃｈｅｕｍａｇｅｌａｔｉ－
ｎａｅ（Ｅｓｐ．）Ｊ．Ａｇ．的干燥藻体。
海藻、昆布购于潍坊海王医药集团股份有限公司青岛分公司。海带、海带根、裙带菜、紫菜、石花菜为青岛近海养殖产品，购于青岛市南山市场。以上样品经青岛市药品检验所中药科吴爱英主任药师鉴定。１．２仪器
ＢＥＲＧＨＯＦ
ＭｗＳ一３＋微波消解系统（美
国利曼一徕伯斯公司）；
ＡＦ一６１０Ａ原子荧光光谱仪ＣＩＩ：，京瑞利分析仪器公司）；
砷空心阴极灯（北京曙光明电子光源仪器有限公司）。
１．３
标准品
砷单元素标准溶液１０００ｔ－ｔｇ・ｍＬ＿１（国家标准物质ＧＢＷ
０８６１１
５０８３），购于国家标
准物质中心。用１０％盐酸（ｖ／ｖ）溶液将砷单元素标准溶液逐级稀释至ｌｔｔｇ・ｍＬ～，作为砷标准使用液。
１．４
试剂
硝酸和盐酸为优级纯试剂；氢氧化钾、硫脲和硼氢化钾均为分析纯试剂；所用水均为
ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ纯水。
２实验方法２．１
样品的消化
２．１．１总砷测定样品的处理。精密称定经粉碎过８０目筛的干燥样品０．３０９，，置于消解罐中加入３．０ｍＬ硝酸，盖好内盖（内盖要经常扩张）和防爆膜，拧上外盖。将消解罐放
・
４４
‘
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入微波消解系统中，按照设定的程序（见表１）进行程序升温消化。待消化完毕后，取出消化罐，放冷。将消化液移入２５ｍＬ容量瓶中，用纯水少量多次洗罐，加入１０％硫脲溶液２．５ｍＬ，纯水加至刻度，混匀，即供试样液。同样做试剂空白液。
表１微波消解程序
２．１．２无机砷测定样品的处理。精密称定经粉碎过８０目筛的干燥样品约１．００９，于２５ｍＬ具塞刻度试管中，加５０％盐酸溶液（ｖ／ｖ）２０ｍＬ，混匀，６０℃水浴中加热１８ｈ，其间多次振摇，使试样充分浸提。取出冷却，脱脂棉过滤，取４ｍＬ滤液于１０ｍＬ容量瓶中，加入ｌｏ％硫脲溶液１．０ｍＬ，纯水加至刻度，混匀，即供试样液。同样做试剂空白液。２．２仪器工作条件
光电倍增管负高压：２７０Ｖ，灯主电流（峰值）：６０ｍＡ，辅助阴极电流：０ｍＡ，原子化器温度：室温，原子化器的高度：７ｍｍ，载气（Ａｒ）流量：８００ｍＬ．ｍｉｎ～，测量方式：标准曲线法，信号类型：峰面积，积分时间：１６ｓ，延迟时间：３ｓ，泵速：１００ｒ・ｍｉｎ～。载流：２％ＨＣｌ溶液（Ｖ／Ｖ），ＫＢＨ；溶液浓度：０．０５％。１．０％（含０．２％ＫＯＨ）。２．３标准曲线的制备
分别吸取砷标准使用液（１ｔ，ｇ・ｍＬ－１）Ｏ，
１．ＯＯ，２．ｏｏ，４．００，８．００，１６．００ｍＬ于１００ｍＬ
容量瓶中，加入１０％硫脲溶液１０．０ｍＬ，用ｌｏ％盐酸（Ｖ／Ｖ）溶液稀释至刻度，混匀。分别相当于砷浓度０，１０．０，２０．０，４０．０，８０．０和１６０．Ｏｎｇ・ｍＬ一１，在２．２的条件下测定。２．４检出限的测定
先用空白溶液进行连续１１次测定，求出
中国海洋药物杂志２００＇／年４月第２６卷第２期ＣｈｉｎＪ
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测定值的标准偏差。砷标准系列重复测定２次，取算术平均值后，按线性回归法求出标准曲线的相关系数和斜率。以３倍空白的标准偏差除以标准曲线的斜率，得到检出限。２．５精密度试验
在２．２的条件下，连续１１次重复测定１０ｎｇ・ｍＬ－１砷标准溶液，计算ＲＳＤ。２．６重复性试验
将石花菜剪细，粉碎过８０目筛，取６份，每份约０．３０９，精密称定，依法消解后分别测定总砷的含量并计算ＲＳＤ。另取６份，每份约１．００９，精密称定，依法处理后分别测定无机砷的含量并计算ＲＳＤ。２．７回收率试验
采用加标回收法，取２．６中的石花菜样品九份，每份约０．３９，精密称定，分别精密加人砷标准溶液适量，使样品中总砷的浓度分别为４０．０，８０．０和１２０．０ｎｇ・ｍＬ～，每个浓度３份样品。依法消解后分别测定总砷含量，计算回收率和ＲＳＤ。
另取２．６中的石花菜样品９份，每份约１．０９，精密称定，分别精密加入砷标准溶液适量，使样品中无机砷的浓度分别为４０．０，８０．Ｏ和１２０．０ｎｇ・ｍＬ＿。，每个浓度３份样
，
品。依法处理后测定无机砷的含量，计算回收率和ＲＳＤ。
２．８样品的测定
分别将以上７种藻类样品剪细，粉碎过８０目筛，各取６份，每份约０．３０９，精密称定，依法消解后测定其中总砷的含量。另各取６份，每份约１．００９，精密称定，依法处理后分别测定其中无机砷的含量。
３３．１
结果
线性回归方程，检出限及精密度配制一系列砷标准溶液，测定其荧光强
度Ｊ厂。线性回归方程为：Ｊ厂＝１１０．１５Ｃ＋６７．８５，线性范围０～１６０ｎｇ・ｍＬ～，相关系数ｒ一０．９９９９２；经测定、计算，检出限为０．０３３ｆ１．ｇ・Ｌ～。连续１１次重复测定１０ｎｇ・ｍＬ－１砷标准溶液，ＲＳＤ＝１．６５％。３．２重复性实验
分别取石花菜样品各６份，测得样品中总砷含量为２．７９ｒａｇ・ｋｇ一，ＲＳＤ＝１．８９％（ｎ＝６），无机砷含量为０．１４ｍｇ・ｋｇ～，ＲＳＤ—１．６８％（ｎ＝６）。
３．３
回收率实验结果见表２、３。
表２总砷测定的回收率
编号样曼量淼茎需要主耋：警
‘刚
（ｎｇ）
０．３００９０．３０１３ｏ．２９９５ｏ．３０２１０．２９９０ｏ．３００５ｏ．２９８９ｏ．３０３６０．３０１３
３３．５８３３．６３３３．４２３３．７１３３．３７３３．５０３３．３６３３．８８３３．６３
（ｎｇ）６．４２６．３７６．５８４６．２９４６．６３４６．５０８６．６４８６．１２８６．３７
（ｎｇ）３７．７０３７．３３３８．３８８０．６５７９．７４７８．９０１１４．４２１１６．０２１】２．８８
回收率（％）
９４．２５９３．３３９５．９６ｌｏｏ．８１９９．６７９８．６Ｚ９５．３５９６．６８９４．０７
平均
ＲＳＤ
回收率
（％）
（％）
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３．４样品的测定结果
７种藻类的总砷和无机砷含量见表４。
裹４
７种藻类的总砷和无机砷含量测定结果
成毒性较小的有机砷，主要是甲基砷酸（ＭＭＡ），二甲基砷酸（ＤＭＡ），并以有机砷的形式排出体外。ＷＨＯ建议无机砷允许摄入量是每人每周９００ｔｚｇ。近年来由于我国近海受污染，致使海带、紫菜等无机砷含量偏高。以海带为例，每周食用１～２次的饮食方式，一周无机砷总摄入量不至于超过允许限量。
但砷及其化合物毕竟是已被ＩＡＲＣ确认的致癌物［１］，对其高摄入人群的远期危害不容忽视。因此海带、紫菜等砷含量较高的海产品，不宜经常大量摄取，避免砷在体内蓄积，引起远期危害。
（玎＝６。矗ｓ）
４讨论
由测定结果可知，？种藻类除石花菜外，总砷含量都很高。而无机砷含量以海藻和海带根为高。由卫生部修订并于２００５年１月２５日发布的ＧＢ２７６２—２００５《食品中污染物限量》、ＧＢｌ９６４３—２００５＜＜藻类制品卫生标准》中规定藻类制品中“无机砷”限量（干重计）≤１．５ｍｇ・ｋｇ～。根据上述标准判断，海藻和海带根中的无机砷超标。自《中国药典９２００５年版起，一部标准对黄芪、甘草、白芍、丹参、金银花和西洋参中重金属及有害元素的含量规定了限度，规定砷不得过百万分之－－（即≤２ｍｇ・ｋｇ－１）。据此建议今后在《中国药典》收载品种海藻和昆布的标准中增添砷等重金属及有害元素的限量项。
Ｆｉｓｈｅｒ
参考文献：
［１］Ｗｏｒｌｄ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ
ｏｎ
ＨｅａｌｔｈＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ。ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＡｇｅｎｃｙｆｏｒＣａｎｃｅｒ（ＩＡＲＣ）．Ｓｏｍｅ
ａｎｄａｒｓｅｎｉｃ
ＭｅｔａｌｓａｎｄＭｅｔａｌｌｉｃ
Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ａｒｓｅｎｉｃ
ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ［Ｊ］．ＩＡＲＣ
Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｓ．ＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃＲｈ女ｏＪ
Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ
ｔｏ
Ｈｕｍａｎｓ．１９８０，２３：３９．
［２］施家威，陈晓红．食品中无机砷及其价态测定ｆＪ］．中
国预防医学杂志，２００５，６（３）：２０６。
［３５杨惠芬．梁春穗，董仕林，等．食品中无机砷限量卫生标准的研究［Ｊ］．中国食品卫生杂志。２００３，１５（Ｉ）：２７．［４５中国药典２００５年版．一部［Ｓ］．２００５：２０８．［ｓ５
中国药典２００５年版．一部［ｓ］．２００５：１４６．
［６］余传隆。黄泰康，丁志遵，等．中药辞海［Ｍ５．北京：中国医药科技出版社，１９９３：１４４２．ＦＴ］
ＦｉｓｃｈｅｒＡＢ。Ｂｕｃｈｅｔ
ＪＰ，ＬａｕｗｅｒｙｓＲＲ．Ａｒｓｅｎｉｃ
ｕｐ—
ｔａｋｅ，ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｔｕｄｉｅｄｉｎｍａｍｍａｌｉａｎｃｅｌｌｓｉｎ
ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．Ａｒｃｈ
Ｔｏｘｉｃｏｌ，１９８５。５７（３）：１６８．
ＡＢ等Ｌ７ｊ研究表明，无机砷在生
（收稿日期：２００６—１ｌ一２８）
物体内富集蓄积。无机砷在体内甲基化转化
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