当归的药理作用研究进展
时珍国医国药2004年第15卷第3期LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2004VOL.15NO.3
(文献综述(
当归的药理作用研究进展
夏 泉1,张 平1,李绍平1,2,王一涛2
(1.安徽医科大学第一附属医院,安徽合肥 230022; 2.澳门大学,中国澳门)
摘要:目的:对当归的药理作用研究进展进行综述。方法:对近年来国内外相关文献进行归纳和总结。结果:当归具有多
种药理学效应,如:抑制平滑肌,抗血小板聚集,抗炎作用,增强机体免疫功能,脑缺血损伤的保护,抗肿瘤,使细胞增殖,保护肝脏和肾脏等作用。结论:对当归的药效物质基础研究仍需深入。
关键词:当归; 药理作用; 研究进展
中图分类号:R282.710.5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2004)03-0164-02
当归为伞形科植物当归Angelicasinennsis(Oliv.)Diels的干燥根。味甘、辛,性温。能补血和血,调经止痛,润燥滑肠。本文综述了近年来国内外有关当归药理作用的研究进展。1 药理作用研究
1.1 平滑肌抑制作用当归油(含藁本内酯70%)无论对正常未孕离体子宫还是对经缩宫素处理的离体子宫,都可呈剂量依赖性地缓解子宫平滑肌痉挛作用[1,2]。当归可抑制呼吸道平滑肌的收缩,其机理在于抗过敏及稳定炎症细胞的细胞膜,膜稳定作用与其抑制肺泡巨噬细胞胞浆游离钙水平升高、影响肺泡巨噬细胞的
[3,4]
活化有关。
1.2 对血液及造血系统的影响
1.2.1 抗凝血作用当归有较强的抗凝血和抗血栓作用,不同产地的当归存在差别。研究发现,当归多糖及其硫酸酯可显著延长凝血时间、缩短出血时间;显著延长凝血酶时间和活化部分凝血活酶时间,其抗凝血作用主要是影响内源性凝血系统[5]。当归可以抑制高分子右旋糖酐引起的红细胞的聚集性增强,其机理可能是当归作为一个大分子占据红细胞表面大分子结合位点,或者是通过空间阻碍了大分子桥联;而减少内皮细胞表面粘附分子的表达则可能是减缓正常红细胞聚集速度的机理之一[6];以凝血时间、凝血酶原时间(PT)和白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)等凝血功能指标研究发现不同产地的当归均有一定的延长凝血时间、PT和KPTT的作用,其中岷当归的各方面作用较好[7,8]。1.2.2 促凝血作用在研究当归多糖及其硫酸酯抗凝血作用的同时,发现其具有双向性调节作用,能升高低切全血粘度,增强红细胞的聚集性,促进血小板的聚集[5]。
1.2.3 补血作用当归可促进骨髓和脾细胞造血功能,显著增加血红蛋白和红细胞数。水溶液灌胃可使60Co照射小鼠内源性脾结节数增加、脾脏和胸腺增重,促进骨髓和脾细胞造血功能的恢复,防止胸腺继发性萎缩,提高动物存活率,增加脾脏内源性造血灶形成,提高骨髓有核细胞计数;对溶血性血虚模型小鼠能显著升高外周血红蛋白,促进60Co照射后小鼠骨髓细胞DNA合成,研究证明,抗贫血作用可能与当归多糖有关[9]。
1.3 抗氧化与抗衰老作用当归具有抗氧化作用,对于D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠,明显提高大脑皮层中超氧化酶歧化物(SOD)活性、Ca2+-ATP酶活性,降低脂褐素(LPF)含量,高剂量时效果更加明显,说明当归具有抗衰老作用[10]。当归能显著延缓肌肉萎缩,增加肌肉组织SOD的含量,其机理可能与当归促进肌肉血液循环、改善代谢有关。研究发现,应用当归注射液对更年期大鼠进行静脉连续给药20天后,血SOD活性明显增高,脂质过氧化物(LPO)水平下降,说明当归注射液可清除氧自由基,抗脂质过氧化物反应,对更年期大鼠心血管系统有重要的保护作用[11]。
1.4 抗炎和增强免疫作用
1.4.1 抗炎作用在小鼠肺部建立体肉芽肿反应模型,再按1g
1
・kg-生药量经腹腔注射当归注射剂;另以虫卵建立体外肉芽肿反应模型,测定肺单卵肉芽肿直径及观察培养液中加入当归制剂对反应强度的影响等。结果发现体内用药后,当归组小鼠肺肉芽肿平均直径显著小于对照组,脾细胞在体外围绕虫卵的反应在加
收稿日期:2003-06-30; 修订日期:2004-01-18
作者简介:夏 泉(1969-),男(汉族),安徽合肥人,现任安徽医科大学第一附属医院药剂科副主任药师,学士学位,主要从事中药活性成分的研究工作.
卵后第5天起明显弱于对照组,在培养液中加入当归制剂后可使感染鼠脾细胞的反应指数显著下降,说明中药当归制剂在体内外模型中给药均可明显抑制由虫卵诱发的肉芽肿性炎症反应[12]。嘌呤霉素致肾病综合征的大鼠模型,使用当归黄芪合剂后,明显减少了病鼠肾组织单核巨噬细胞的浸润,肾损伤减少,肾功能得到保护[13]。
1.4.2 增强机体免疫功能当归可促进巨噬细胞分泌细胞因子,增强免疫功能。当归多糖能增强白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)和C干扰素(INF-C)的表达,其过程是首先激活涉及非特异性免疫作用的巨噬细胞和NK细胞,然后是T辅助细胞,增加抗体数量,进而协同增强免疫功能[14]。当归多糖激活巨噬细胞可表现对白血病细胞的溶细胞作用,显著增加初次免疫鼠血清中抗绵羊红细胞抗体滴度,促进巨噬细胞对肿瘤坏死因子(TNF-A)的分泌[15,16]。采用不同浓度的乙醇对当归多糖进行分级沉淀得到的4个成分(AP-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生INF-C的影响,结果发现其中AP-Ⅰ和AP-Ⅱ能明显促进体内外小鼠脾淋巴细胞增殖,体外显著诱导脾淋巴细胞分泌INF-C,增强INF-C的生物活性;结晶紫染色法和酶联免疫法的结果表明AP-Ⅱ体外诱生INF-C的量较高,AP-Ⅰ体内诱生的INF-C生物活性较强[17]。对于放射损伤小鼠,当归多糖可使红细胞C3b受体花环率和外周血白细胞、血小板显著升高,说明当归多糖对放射损伤小鼠红细胞免疫功能具有保护作用[18~22]。当归多糖腹腔注射可以拮抗环胞霉素引起的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、NK活性和IL-2生成的抑
[23]
制作用。对阿霉素诱导的大鼠血瘀证模型,可使其胸腺指数和脾脏指数明显升高,免疫球蛋白IgG、补体C5含量明显升IgM、[24]高。当归多糖及其分离组分可以提高大剂量泼尼龙(PSL)所致免疫缺陷小鼠补体C3含量及单核吞噬细胞功能,对抗PSL对细胞及体液免疫功能的抑制,使PSL抑制状态下小鼠脾淋巴细胞
当归补血汤可提高脾淋巴细胞增殖反应IL-2分泌功能改善[25]。
性,其作用可能与抑制应激后血中B内啡肽、皮质醇水平上升有[26]关。
1.5 对缺血损伤的保护作用
1.5.1 对脑缺血损伤的保护作用当归可缓解脑缺血后细胞的凋亡,因此对脑缺血损伤具有保护作用。当归能促进大脑中动脉栓塞模型大鼠脑缺血损伤后神经生长、修复相关蛋白细胞周期素D1(cyclinD1)和生长相关蛋白(GAP-43)的表达,减少细胞凋亡的发生,其减少脑缺血损伤后缺血区细胞凋亡的机制可能与促进微管相关蛋白(MAP2)表达有关[27,28]。用TUNEL法和免疫组织化学染色法发现,局灶性脑缺血再灌流模型大鼠,当归治疗后缺血半暗带的凋亡细胞显著减少,Bcl-2基因的表达显著增加,Bax基因的表达无显著变化,说明当归可能通过促进Bco-2基因在脑缺血后的表达对半暗带的细胞凋亡产生抑制作用[29]。1.5.2 对肾缺血损伤的保护作用健康成年日本大耳白兔,肾缺血1h后再灌注48h,取肾组织作电镜检查,测血清肌酐(Cr)、肾组织TNF-A、IL-6和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量,发现当归对肾单纯缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与其对TNF-A、IL-6和bFGF等细胞因子的调控有关[30]。1.6 促进细胞增殖作用当归水提物在浓度小于125Lg・ml-1时,可增加人骨纤维母细胞(OPC-1)的增殖,同时直接刺激碱性磷酸酶的活性、蛋白质以及OPC-1特异性Ⅰ型胶原的合成,并呈现剂量依赖性[31]。当归不仅能激活黑素细胞的增殖,而且使黑素合成能力和酪氨酸酶活性呈剂量依赖性增加,这可能是当归治
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2004VOL.15NO.3时珍国医国药2004年第15卷第3期
疗皮肤色素性疾病的机制之一[32]。对于受损的消化道上皮细胞,当归能明显促进上皮细胞的增殖,刺激DNA的合成,且呈剂量依赖性,其机制可能是通过表皮生长因子(EGF)途径完成的[33]。在动物模型中,当归粗提物可促进消化道溃疡愈合,使溃疡面减小,与对照组比较,其粘液合成增加,细胞增殖明显,但鸟氨酸脱羧酶(ODC)和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达不受影响[34]。1.7 抗肿瘤作用当归多糖对多种肿瘤瘤株具有抑制作用。对小鼠移植性肿瘤EC、Hep、S180、Lewis、B16等瘤株表现出一定程度的抑制作用,可明显抑制肿瘤生长,增加巨噬细胞数目、增强其吞噬
[35,36]
功能及脾细胞NK活性,明显延长动物生存期。对人白血病细胞株K562细胞增殖有明显的抑制作用,诱导K562细胞向红系、粒单系细胞分化,联苯胺染色、糖原染色和过氧化物酶染色阳性率、细胞表面分化抗原CD15表达等均明显增加[37]。
1.8 抗损伤作用大鼠海绵体神经(CN)钳夹损伤可致阴茎组织一氧化氮合酶(NOS)的活性降低,当归注射液能一定程度地避免阴茎组织NOS活性下降[38]。
1.9 抗肺纤维化作用大鼠气管内注入博莱霉素诱导肺纤维化后腹腔注射25%当归注射液,分4批于第2,7,15,30天处死,结果当归组第7,30天肺系数显著低于对照组,肺泡炎及肺纤维化显著减轻,肺匀浆丙二醛(MDA)产生显著减少,血及肺匀浆羟脯氨酸均显著降低[39]。
1.10 保肝作用当归提取物可减轻肝纤维化,提高肝细胞SOD和降低MDA,对多种肝损伤模型具有保护作用。当归可使四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型的血清Ⅲ型前胶原及血清转氨酶水平显著降低,因此对实验性大鼠肝纤维化有防治作用[40]。血吸虫性肝纤维化的大耳白兔,给予当归根提取物后可降低血吸虫性肝纤维化门脉高压症(PHT)的门脉压力[41]。小剂量当归对牛血清白蛋白(BSA)致大鼠免疫损伤性纤维化模型具有明显提高肝细胞SOD、降低MDA的作用,能提高肝细胞膜ATP酶活性[42]。对乙酰氨基酚诱导肝损伤的小鼠灌胃给药,能使升高的丙氨酸转氨酶(ALT)和一氧化氮酶(NOS)趋于正常,肝中谷胱苷肽的水平降低,同时降低MDA的浓度[43]。
1.11 抗动脉粥样硬化作用在研究当归注射液对家兔实验性主动脉粥样硬化形成的影响时发现,当归组动物血中甘油三酯水平显著降低,但总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇均无变化,主动脉斑块面积显著小于模型组,血清丙二醛含量也显著低于模型组,提示当归注射液具有抗家兔主动脉粥样硬化形成的作用,这种作用与它降低血清甘油三酯水平、抗脂质过
[44]
氧化有关。
1.12 对中枢神经系统的作用
1.12.1 镇痛作用有研究表明,当归多糖及其分离出的多种组分均有镇痛作用。当归多糖可显著抑制己烯雌酚、缩宫素和醋酸诱发的小鼠扭体反应,提高热板法所致小鼠痛觉反应的痛阈,作用强度与剂量有关[45]。当归水提醇沉所得总浸膏分离后得到4个部分,分别以小鼠扭体反应进行镇痛实验,结果表明总浸膏及其4个洗脱部位均有镇痛作用,其中水洗脱部分镇痛作用尤为突出,强于阿魏酸钠、总浸膏和另外3个洗脱部分,提示当归中起镇痛作用的主要物质除阿魏酸钠外,在水洗脱部分仍含有镇痛活性更大的物质[46]。
1.12.2 抗惊厥作用在高压氧中暴露20min后的大鼠脑中游离氨基酸的含量明显升高,使用当归后部分氨基酸(天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)含量保持在相对较低的水平,有些甚至低于正常组(苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸),说明高压氧条件下当归能够逆转脑内氨基酸类神经递质的异常改变,这可能是它延缓氧惊厥发生的作用途径之一[47]。
1.12.3 延长戊巴比妥所致的睡眠作用有人研究了当归提取物甲醇溶解部分(Met-S)和不溶解部分(Met-IS)以及Met-S中二氯甲烷溶解部分(MC-S)和不溶解部分(MC-IS)对戊巴比妥所致睡眠的影响,发现,MC-S可延长戊巴比妥所致的睡眠,但Met-IS和MC-IS均未表现出同样的作用[48]。
1.12.4 缓解记忆缺失作用被动性躲避试验和Morris水迷宫试验的研究发现,1~5mg・kg-1当归提取物可减轻东莨菪碱所致ICR小鼠的记忆缺失,其机制是通过抑制海马区乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性而实现的[49]。2 小结
当归具有广泛的药理作用,如对子宫平滑肌和支气管平滑肌的松弛作用;抑制血小板聚集及促进红细胞的生成;抗氧化的作用;增强机体免疫力等。
近年来,对当归增强免疫功能的活性成分,对细胞增殖的影响机制以及抗衰老的机理等方面有较深入的研究。与此同时,以
当归为基础的复方制剂的药理学研究范围也在不断扩大,新的药理作用的报道不断出现,相信随着研究的深入,当归及其有效成分的药理作用、机理将会更加明确。
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时珍国医国药2004年第15卷第3期LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2004VOL.15NO.3
现代科学技术方法在中药质量研究中的应用
张 梅,李小年
(成都中医药大学,四川成都 610075)
摘要:目的:了解现代科学技术方法在中药质量研究中的应用及其发展。方法:对近年来在中药质量研究中所采用的方
法进行分析归类。结果与结论:现代科学技术在中药质量研究中应用极其广泛,但距离中药现代化的要求还有不小的差距。
关键词:中药质量; 化学计量法; 仪器分析法; 分子生物学技术; 电化学分析法
中图分类号:R2-03 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2004)03-0166-02
中药是中医防病治病的物质基础,其质量直接影响中医的临床疗效。传统的中药质量控制主要依靠老药工的经验,通过眼观、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等十分简便的方法进行。而中药制剂的质量,则依靠原料药材的地道性和药工制作的经验予以保证。同仁堂“炮制虽繁,必不敢省人力;品味虽贵,必不敢减物力”的古训,集中反映了传统中药制剂生产质量保证的关键。由于我国地大物博,中药资源极为丰富,中药材品种繁多,应用历史悠久,产区广泛,更由于历代本草记载、地区用语、使用习惯的不同、类同品代用品的不断涌现以及外形相似等原因,中药的同名异物,同物异名现象普遍存在;同一品种道地药材与非道地药材之间有时质量差异很大,很难识别。在中药销售中因利益的驱动而时有掺杂使假的情况发生,因此传统的质量控制手段已无法满足现代中药质量控制要求,而一些现代仪器分析方法的不断发展和数学、分子生物学的渗透大大丰富了中药质量研究的内涵。现对当前中药质量研究中的主要方法作一综述。1 质量鉴别
1.1 化学计量方法
1.1.1 模式识别是一门用计算机代替人对模式即所研究的系统进行描述、分类、决策的新兴学科。1988年苏薇薇等[1]对中药黄芩进行了模式识别研究,开创了模式识别鉴定中药的先例;苏薇薇等[2,3]还利用该法对78种苦丁茶样品和45个细辛样品进行了一系列研究。吴忠等[4]用模式识别中的NLM、SIMCA法快速处理了30个黑三棱(药典品种)和12个荆三棱样品常量和微量元素特征谱,计算机分类结果和生药学鉴定一致。
1.1.2 聚类分析将一批样品或变量用计算机进行数据处理,得到不同聚类图,从数图即可分类、鉴定和评价药材质量。苏薇薇[5]
等以砂仁及其伪品的紫外光谱为量化特征在计算机上用聚类
收稿日期:2003-07-04; 修订日期:2004-01-11
作者简介:张 梅(1963-),女(汉族),四川成都人,现任成都中医药大学药学院副教授,博士学位,主要从事中药物质基础及质量标准化研究工作.
分析法进行了分析,证明该法的实验结果与传统的生物学方法相同。丁以华等[6]对中药材浸出液的紫外光谱进行聚类分析,以评价其质量优劣。
1.1.3 人工神经网络(ANN)人工神经网络是用工程技术手段模拟生物神经网络的结构、特征和功能的一类人工系统。乔延江[7]
等用对称三层神经网络对22个蟾酥样品9个色谱峰的测量数据进行特征提取,提取的特征及相应的误差用三维图形表示,可直接用于样品分类;耿利娜等[8]以误差反向传播为训练算法的前馈式人工神经网络(BP-ANN)用于中草药的裂解气相色谱图分析。
1.1.4 模糊数学方法中药质量是多种因素影响的综合结果,其质量优劣界限存在模糊性。齐美玲等[9]运用模糊聚类分析对10个产地5种黄芩23个品种进行研究;邢旺兴等[10]借助毛细管气相色谱法运用模糊聚类分析对7种红曲酶的挥发性酸和非挥发性酸进行检测,根据红曲酶挥发性成分及非挥发性成分指纹图谱的主要峰及其相对含量,有效地鉴别了红曲酶素真菌;梁明[11]利用模糊数学理论对中药材粉末显微鉴别进行了深入探讨。1.2 仪器分析法1.2.1 色谱、光谱法采集分析样品的光谱指纹图谱或色谱指纹图谱,经宏观的总体综合分析,达到鉴别真伪优劣的目的。该方法
[12]
应用广泛,如田进国等测试了75种药材的700张红外光谱,据此可准确鉴别任何一种药物。邓君丽等[13]采用紫外光谱区分了南、北五味子,阿胶及伪品。陈永林等[14]采用一阶、二阶导数光
[15]
谱法对独活等6种伞形科药材进行了鉴定。张聪等对中国红参和高丽参进行HPLC指纹图谱比较研究,结果证明两者品质很接近,可以同等使用。秦海林等[16]采用NMR波谱仪测定了38种不同产地的正品天麻样品及4种常见天麻伪品的乙醇提取物的1HNMR图谱。分析结果表明,所有正品天麻样品均出现天麻苷的特征共振峰,而伪品无此信号。
1.2.2 计算机图谱分析(CIA)将不同层次二维图像用计算机进行处理,获取此图像的三维定量数据。将果实、种子、花粉或组
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