动物细胞培养和核移植技术
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一、重要知识回顾
1．动物细胞工程常用的技术手段有
2．动物细胞培养的过程（请写出简要流程）
3．动物细胞培养的原理是
4．两次用胰蛋白酶处理的目的分别是
5、 原代培养和传代培养的区别
6、动物细胞培养的条件
7、动物细胞培养的应用有
8、 动物的体细胞能否用类似植物组织培养技术的方法获得动物个体？为什么？
9、动物核移植技术可分为哪两项10、体细胞核移植技术的过程
11、体细胞核移植技术的应用前景和存在的问题
二、自主检测
（一）课堂例题
例1. 下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是
A. 培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C. 动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D. 动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
例2. 在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到 A. 细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术
例3、①在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这
种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成细胞层数是 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用 酶。②随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞停止分裂，进而出现 的细胞，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该种细胞黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。 ③现用某种大分子染料对细胞进行染色，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 。检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。 ④细胞培养中，通常在 条件下保存细胞，在这种条件下，细胞中 活性降低，细胞 的速率降低。
⑤患者移植培养皮肤组织发生排斥反应，这是因为机体把移植皮肤组织当作 而进行攻击。
（二）反馈训练
1．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是
A ．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B ．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞
C ．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变
D ．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞
2．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，
以下较易成功“复生”野驴的方法是
A ．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体
B ．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C ．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体
D ．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
3．一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能
A ．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优秀个体
C ．用于保存物种 D．改变动物的基因型
4．动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是
A ．葡萄糖 B．蔗糖 C．动物血清 D．维生素
5．动物细胞培养的细胞来自于
A ．任何个体的细胞 B ．只能取自动物胚胎细胞
6．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是
A. 动物细胞培养 B．动物细胞融合 C．单克隆杭体 D．胚胎、核移植
7. 如用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是
A、乳腺细胞的 B、卵细胞的 C、胃腺细胞的 D、囊胚时期的胚胎细胞的
8. 下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是
A. 用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B. 将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞
C. 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液
D. 动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就会衰老死亡
9．用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这
样的组织细胞
A. 容易产生各种变异 B．具有更强的全能性
C. 取材十分方便 D．分裂增殖的能力强
10. 动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是
A. 动物细胞培养是培养单个细胞 ，植物组织培养是培养组织
B. 动物细胞培养可以传代，而植物组织培养不能传代
C. 动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同
D. 动物细胞培养过程中可发生遗传物质的改变，而植物组织培养不能
11．在克隆羊培育过程中，将雄羊的体细胞核移入雌羊的卵细胞中。产生该克隆羊的方式及该克隆羊发育成熟后所分泌的性激素依次是
A．无性生殖．雄性激素 B．无性生殖．雌性激素
C．有性生殖．雄性激素 D．有性生殖．雌性激素
12. 在动物细胞培养的过程中，使用胰蛋白酶的目的是
A．使动物组织分散为单个细胞进行培养 B．去掉细胞壁成为原生质体
C．去掉细胞膜暴露出原生质体，便于细胞融合 D．促进蛋白质水解为多肽
13. 科学家将雌黑鼠乳腺细胞的细胞核，移入白鼠去核的卵细胞内，待发育成早期胚胎后植入褐鼠的子宫，
该褐鼠产下小鼠的体色和性别是
A．黑、雌 8．褐、雌 C．白、雄 D．黑、雄
14. 下列各项不属于克隆的是
A ．在体外，通过PCR 技术将某个DNA 分子片段进行大量扩增B ．细菌的分裂增殖
C 通过胚胎分割移植获得几乎相同的多个个体D ．一株玉米上结有多粒种子
15.植物体细胞杂交制备原生质体和动物细胞培养配制一定浓度的细胞悬浮液，所需要的酶依次是
A ．淀粉酶和磷脂酶 B．纤维素酶和胰蛋白酶C ．脂肪酶和二肽酶 D.过氧化氢酶和半乳糖苷酶
16、（多选）在将动物组织块分散成单个细胞时，可以使用胰蛋白酶。由此可以推测 （ ）
A ．胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤 B．处理时一定要注意处理时间、加酶量
C ．动物细胞培养液pH 应与胰蛋白酶作用的适宜pH 基本一致 D．动物细胞之间可能依靠蛋白质联系
17．动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是
A ．葡萄糖 B．蔗糖 C．动物血清 D．维生素
18. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是
A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养
19. 乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂发育成重组胚胎，再植入丙马的子宫内发育，结果产下一只小马。下列叙述正确的是 ( )
A ．直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎来B. 小马的性状完全与甲马相同
C ．此项技术可用于保护濒危物种D ，该过程可以很好地证明动物细胞的全能性
19．动物细胞培养过程的顺序是 ( )
①原代培养 ②传代培养 ③用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液
A ．①②③ 8．①③② C．②①③ D．③①②
20. 下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是 ( )
A ．动物细胞培养的目的就是为获得细胞分泌蛋白B ．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开
C ．动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象 D．可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体
21. 动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。下列从该图提供的信息获得的结论中不正确的是 ( )
A ．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
B ．有无血清对正常细胞与癌细胞培养的影响不同
C ．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 ( )
A ．动物细胞培养需要无菌、营养、适宜的温度和pH 等条件
B ．用胰蛋白酶作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞
C ．放入C02培养箱中培养动物细胞的主要目的是为了满足细胞对C02的需求
D ．细胞株一般具有恒定的染色体组型、生化特性等
22．如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能来源于
A．乳腺细胞 B．卵细胞 C．胃腺细胞 D．囊胚时期的胚胎细胞
23. 正常情况下人体的下列哪种细胞存在潜在的分化能力
A. 效应T 细胞 B. 神经细胞 C. 红细胞 D.B 淋巴细胞
24. 以下细胞工程技术中，能培养出具有两个亲本遗传性状的个体的条件是
A. 将已分化的体细胞的细胞核移入去核的卵细胞（自身产生的）后，培养成的个体
B. 两个个体的体细胞融合后育成的新个体
C. 生殖细胞直接培育成单倍体，并再使染色体数目加倍
D. 具有相对性状的两个纯合子亲本（一个为双显，一个为双隐）杂交获得的个体
25. 下列关于细胞工程的叙述中，正确的是
A. 克隆羊“多利”的培育技术主要包括核移植和胚胎移植两方面
B. 植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体
C. 植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织
D. 经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状
26. 下列属于动物细胞工程应用的是
A. 大规模生产干扰素，用于抵抗病毒引起的感染 B.为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C. 大规模生产食品添加剂、香料等 D. 利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖
27．哺乳动物的妊娠时间长，每胎产子数少，繁殖速度比较慢。要加快优良种畜的繁殖速度，目前最好采
用的方法是
A ．动物细胞培养 B．胚胎移植 C．动物细胞融合 D．核移植
28．将甲绵羊体细胞的细胞核移入乙绵羊的去核卵细胞中，再将此卵细胞植入丙绵羊的子宫内发育，出生
的小绵羊即“克隆绵羊”，此“克隆绵羊” （ ）
A ．基因型与甲相同，性别一定与甲不同 B．基因型与乙相同，性别一定与乙相同
C ．基因型与丙相同，性别一定与丙相同 D．基因型与甲相同，性别一定与甲相同
29. 动物细胞工程的基础技术是动物细胞培养，其过程大致是：
取动物胚胎或幼龄动物的器官和组织——→单个分散细
胞
↓
细胞系←—细胞株←—传代细胞←—原代细
胞
回答下列问题：
⑴器官组织先要用胰蛋白酶处理，其目的是 。
如换用胃蛋白酶处理行吗？为什么？ 。
⑵过程中细胞株的传代细胞很难形成细胞系，可加以一定的处理，使之成为细
胞系，这种处理方法类似于
A ．诱变育种 B．单倍体育种 C．多倍体育种 D．杂交育种
30．动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答
(1)容器A 中放置的是动物器官或组织。它一般取自＿＿＿＿＿。
(2)容器A 中的动物器官或组织首先要进行的处理是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，然后
用＿＿＿＿＿酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是＿＿＿＿＿＿
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(3)培养首先在B 瓶中进行。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这
是培养到10代左右，到此时的培养称为＿＿＿＿＿＿。
(4)为了把B 瓶中的细胞分装到C 瓶中，用＿＿＿＿＿处理，然后配置成＿＿＿＿
＿，再分装。
(5)有少数的细胞能存活下来，继续传下去，一般能传到40—50代，这种传代细胞叫做＿＿＿＿＿。这种细胞的遗传物质与前面的细胞＿＿＿＿＿（相同，不同）。
（6）这种细胞传至50代后一般不能再传，但有少数细胞遗传物质发生改变，带有 细胞的特征，有可能在培养条件下无限制的传下去。
31．下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：
(1)图乙所示的过程中，用到的动物细胞工程技术手段是__________。
(2)若不考虑
环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗? ________。原因是
(3)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能
A．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优良个体
C．用于保存物种 D．改变动物的核基因
(4)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的
体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去
核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是
A．卵细胞大，便于操作 B．卵细胞含有的营养物质多
C ．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达
D．重组细胞才具有全能性
32. 某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小
块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题：
(1)培养之前，肿瘤组织必须先用 等处理成单个细胞。
(2)若开始培养时取一滴培养液观察有1 00个肿瘤细胞，经24 h培
养后，取一滴稀释10倍后再取一滴(设三次的“一滴”等量) 观察，
发现有64个肿瘤细胞，此肿瘤的细胞周期约为 h。
(3)与正常细胞相比，在显微镜下可见明显增多的细胞器是 33. 图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
(1)人类“治疗性克隆”的核心技术是胚胎工
程中的 技术。
(2)“治疗性克隆" 的结果说明高度分化的体细
胞的核仍然具有 。相同的胚胎干细
胞，“克隆" 的结构各种各样， 如有的是胰岛
细胞，有的是血细胞，有的是心肌细胞，究其
本质原因是基因 的结果。
(4)科学家为何要将患者的体细胞的核植入去
核的卵细胞，而不直接用体细胞进行细胞培养?
(5)按上述方法克隆器官在器官移植方面的主要优点是
34. 下列所示为用两栖动物卵所做的实验图解，据图回答下列问题：
(1)蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需
的 ，重新组合的细胞相当于蛙
的 细胞，经过 和
形成组织和器官。本实验结果说 明 具有全能性。
(2)图中A 过程采用的技术手段称
做 。，如果用生物技术使番茄和马铃薯
的体细胞融合；首先要获得 ，其方法
是 ，然后诱导 ；
从理论上讲用融合后的细胞培育出的“番茄一马铃
薯”植株是 (可育、不可育) 的。
4、现有A 和B 两个肉牛品种，A 品种牛的细胞组成可表示为A 细胞核、A 细胞质，B 品种牛则为B 细胞核、B 细胞质。
①如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A 细胞核和B 细胞质组成，基本步骤从A 品种牛取出体细胞，进行培养，再从培养细胞中取出 注入B 品种牛 卵母细胞，经过刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎称为 。将该胚胎移入代孕母牛 中，通过培育可达到目的。
②克隆牛的产生说明
具有全能性。克隆牛的性状主要表现 品种牛的特征。由A 、B 两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自_____个亲本，细胞质来自 性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成_____（相同，不同）
三、疑问反馈
附答案：
1-5
6-10
11-12
13-17
18
19
20
21