菌株生理生化鉴定实验方法
菌株生理生化鉴定实验方法
1.接触酶实验
用枪头取一个菌落放在载玻片上，加一滴3%的H2O2于菌落上，立即观察有无气泡出现。
2.淀粉水解实验（没有透明圈）
淀粉酶活性鉴定培养基：LB培养基（0.5%酵提、1%蛋白胨、1%NaCl），可溶性淀粉1%，琼脂2%
取实验菌株的单菌落在淀粉酶活性鉴定培养基中划线，30℃培养2天，形成明显菌落后，在平板上滴加碘液，菌落周围如果有透明圈，则表示淀粉水解为阳性；若仍为蓝黑色则为阴性
3.脂酶活性的鉴定实验（有晕圈）
脂酶活性鉴定培养基：LB培养基，Tween80 1%，琼脂2%
取实验菌株的单菌落在脂酶活性鉴定培养基中划线，30℃培养2天，菌落周围若有晕圈，则为脂酶活性阳性，反之则为阴性。
4．蛋白酶活性的鉴定实验
酪明培养基（不可溶性）：LB培养基，0.3%酪蛋白（先碱化1g酪蛋白加1ml 1mol/L的NaOH，加水加热溶解），0.5%明胶（加热溶解），2%琼脂（没有）
牛奶双层板（可溶性）：上层LB培养基加2%琼脂，下层牛奶、琼脂（牛奶琼脂混合后的浓度都是2% 先把下层倒到平板中，待下层冷却后再倒上层（有透明圈）
取实验菌株的单菌落在可溶性蛋白酶活性鉴定培养基及不溶性蛋白酶活性鉴定培养基上分别划线，30℃培养2天。菌株若具有可溶性蛋白酶活性和不溶性蛋白酶活性，则会在菌落周围形成透明圈。
5.纤维素分解实验
纤维素酶活性鉴定培养基：LB培养基，1%纤维素钠
取实验菌株的单菌落在纤维素酶活性鉴定培养基上划线，30℃培养5-7天，用0.1%刚果红染色液染色30min后，用蒸馏水冲洗，再用1mol/L的HCl复染30min后冲洗，观察是否有透明圈。
6．甲基红实验甲基红和V-P鉴定培养基：蛋白胨0.5%，K2HPO4 0.5%
接种实验菌株于甲基红鉴定培养基中，每次两个重复，30℃培养2d、6d。在培养液中加入一滴甲基红试剂，若为红色，则为甲基红实验阳性反应，反之则为阴性。
7.V-P测定
用上一个实验的培养基
接种实验菌株与V-P鉴定培养基中，每次两个重复，30℃培养2d、6d。取培养液与40%的NaOH等量混合均与，加少许肌酸（加一点粉末）。反应10min后，若培养液出现红色，即为阳性反应，未出现红色的继续放置一段时间，若仍未变色则为阴性。
8.耐盐性实验
将实验菌株先用普通LB液体培养基活化，接种在含有不同浓度的NaCl（0%—10%）的LB液体培养基中(试管中含液体10ml)，每个试管中加入100μl菌液,30℃,160r/min，培养1天，观察菌株的生长情况并测其OD值
9.酸碱测定
将实验菌株先用普通LB液体培养基活化，接种在含有不同pH（3—10）的LB液体培养基中(试管中含液体10ml)，每个试管中加入100μl菌液,30℃,160r/min，培养1天，观察菌株的生长情况并测其OD值
可用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调节培养基的pH