不同产地冬凌草中迷迭香酸的含量比较_崔璨
不 同 产 地 冬凌草 中迷迭 香酸 的含量 比较
崔璨
1 (
:
.
,
陈随清
‘
河 南中 医学 院
,
郑 州市
,
45 00 0 8
;
2 河 南省中药开 发 工 程技 术研 究中心
.
,
郑 州市
.
,
45 00 0 8 )
摘要
目的 测 定不 同产 地 冬 凌草中迷迭 香酸的含量
,
:
,
对 不 同产地 冬凌 草中迷 迭 香酸的含量 进行测定
比较
、
为 冬 凌草 的科学利用 提供理 论 依据 方法 : 通过 高 效液相色 谱法 : 分析各样本间 的 差异 结果 不 同产 地 冬 凌草中迷 迭香酸的含量
。
有 明显差 别
。
结论
:
不同产 地冬 凌 草应用 时 应 加 以区分
eo n
。
: ; ; 关性侧 冬 凌草 不同产 地 迷 迭 香酸
T he
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,
冬 凌 草 学 名 碎米 娅 (R b a
,
贵 州 广 西 陕西 陕西 江 西 浙江 安徽及 甘肃等地 具有清 热解 毒 c a s l 迷迭 香酸区o sm a i d 简称R 消 炎止 痛 健 胃活血 及 抗肿瘤 之功效[ ’ ) 是 冬凌草 中主要 有效 成 o A 俪 c ] 2 冬凌 草在 我 国分 分之 一 是 一 种 具有抗氧化 抗炎 和抗血 栓等生理 活性 的天 然多功能酚酸 类化合物I
河北 湖南
,
,
、
、
湖北
、
四川
、
s o d
a 、b e i s
、
c
、
s n e
a ) 是唇形 科香茶 菜属 植物 田 en ] H . sl r ar
,
、
产 于 我 国河南
,
、
、
、
、
,
。
,
、
。
布 广泛
利用
1 1 1
.
,
由于受 环境 影 响和 人为破 坏 各地 所 产冬凌 草质量并 不均一
、
,
。
为 了实现 对冬凌 草 的合理 开 发 和
。
,
必 须对 不 同产地冬 凌 草的主 要 有 效成分 进 行测 定
比较
SPD
一
,
筛选 出优质 的资源种 类
0 2
A
仪器 与材料
实 验仪 器
CQ
一
日
本 岛津 L C
;
一
0 2
T 高效 液相 色 谱仪 A
一
:
;
紫外 检 测 器
;
;
C B M 10 2
一
型 色 谱工 作
站
.
:
5 D 型 超声 波清 洗 器 (上 海 超 声波仪 器 ) ) 2
HL
型溶 剂过滤 器
。
1 P0 H
型 无 油真 空 泵 ( 天 津恒
。
奥科技 发展 有 限 公司 )
1 2
恒 温水浴 锅 (巩 义 市英 峪予 华 仪 器 厂 )
,
实验 试剂
。
r H
LC
流动相 用 甲醇 为色 谱纯 其 它 试 剂均 为 分析 纯
,
、 、
,
水为 双 蒸 水
1 3
.
实验 样 品 迷迭 香酸 标 准 品购 自成 都曼 斯特 生 物科技有 限 公 司 纯 度 9 8 .0 7 % 能够 满 足含 量测 定 的 需要 冬 凌草样 品 采 自河 南太行 山区 伏牛 山 区 大别 山 区 以及 贵州施 秉 县 等冬 凌草 主 要 分 布 区
,
, ,
所 有样 品 均 经 我校 陈随清教 授鉴 定为唇 形 科香 茶菜属 植物 碎米娅 (R a b
样 品 保 存 于 河 南 中医 学 院 生 药 研 究室
。
s o d
a 、 bo c i e n s
a B 讼 [ n l了 s r 枷r
)
,
表 产地
山西 夏 县 山 西闻 喜县 山 西 绛县 山 西 闻喜 县
1
样 品信 息表 入药 部位
采 集地
山 西 夏 县 捻掌镇探 马村
采集 日 期
2 00 80 72 5 2 00 80 72 5
2 00 80 724
批号
DLC 01
一
草质 茎 叶 草质 茎 叶 草质茎 叶
山 西 闻 喜 县后 宫乡 后 沟 山 西 绛县冷 口 乡寨 子村
D LC 0 2
一
D L C 03
一
山西 闻 喜县 后 宫 乡 马 跑 泉
草质 茎叶
草 质茎 叶 草 质茎 叶
草质茎 叶
草质 茎 叶
2 00 8 0 7 2 5
2 0 0 80 9 2 4 2 00 80 92 5
200 80 8 19 2 0 0 8 0 7 15
D L C O4
.
河南 林 州 河南 淇 县 河南 灵 宝 市
贵 州施 秉 县
安 阳 林州 石 板岩 乡高 家 台
D LC 0 5
一
鹤 壁 淇 县桥梦 乡南 四 井 村
灵 宝 阳 平 小 秦 岭 景 区 夫夫 站 贵 州施 秉 县 云 台 山 景 区
D LC 06
一 一 D LC 07
DLC 08
一
河南栗川县
河 南新县 河 南西 峡
洛 阳栗川县龙峪湾
信 阳 新县
草质茎 叶
草质茎 叶 草质茎 叶 草质茎 叶 草质茎 叶
草质茎 叶
2 0 0 8 0 726
2 00 8 07 2 0
2 00 8 07 2 2
D LC 0 9
一
D L C 10
一
南阳西峡 济源蟒 河 口 镇 新乡辉县
平 顶 山宝丰
D LC 1 1
一
河 南济源
河 南辉县
河 南宝丰县
2
.
20 08 07 2 4 20 08 072 7 20 08 072 6
D L C 12
一
D LC 1 3
一
D LC 14
一
方法与结果
色谱 条 件
色谱柱 P n on he l s
:
2 1
l c l s (2 0 5 x 4 6m
.
,
5
娜) 柱
;
检测 波长
:
33 5
n I
。
:
流动 相
,
:
. 5% 0 甲醇 :
: : 5 3 ) ; 流速 磷酸水溶 液 (4 7
. sn 0 l / m in i
;
理 论塔板数按迷迭 香 酸计不 低 于 3 0 0
m g
,
。
2 2
.
对 照 品溶液 的制备
,
. 2 5 ℃干 燥 4 精密称定 1 0 h 的迷迭 香酸标准 品 2
加 甲醇溶 解
,
定容 至 2 5 n l i
、
容量 瓶 中
2 3
.
. 0 配 制 成浓度 为 0 m 创m l 的标准 品溶 液 9
, ,
g 供试 品 溶 液 的制 备 精密 称定 冬凌草粗粉 l
以迷迭 香
酸 的含 量为指标
,
5 i 分别用 0 n 甲醇 l
、
丙酮
、
乙 酸 乙 醋 为 溶剂
以超 声提取和 回流提 取为不 同提取方法
n 设定 3 0 m i
。
、
0 6
m in
i 三 个提 取 时间 0 m n 9
,
对冬 凌草 供 试 品溶液 的制备 工 艺进 行不等水平 的正 交 实验设计
表2 迷迭 香酸方法 学考察直 观 分 析表
所 在列
因素
试剂
甲醇
方法
超声
时间
30
实验结果
8 63
.
实验
l
实验 2
实验 3 实验 4 实验 5
甲醇
甲醉
回流 超声 超声 回流 超声 超声 回流
60
90 60 90 30
14 9 9
.
11 47
.
丙酮 丙酮
0 18
.
0 75
.
实验 6 实验 7 实验 8 实验 9
Ij
I lj I ll j
R
i
丙酮
乙 酸乙 醋 乙 酸乙 酣
0 12
.
90 30 60
3 0 15
.
0 14
.
0 29
.
乙 酸乙 酷
11698
.
超声
2 98 4
.
0 14
.
0 351
.
5 34 5
.
5 10 6
.
0 1 92
.
3 9 13
.
4 12 1
.
1 1 5 06
.
2 36 1
.
2 09 1
.
由上 表 中各 因 素下 的均值 可 以看 出 甲醇 回流 提取6 0 分钟为最佳 提取工 艺 由各 因 素下 的极 差可 以
, ,
看 出 溶剂 的选 择对 迷迭 香酸 的提取效 果起着最 为重要 的作用 所 以冬 凌草中迷 迭 香 酸 的最 佳提 取 工 艺
为
. 4 2
:
,
.
精密 称取 冬凌 草粗粉 19
,
量 取5 0 n 0 分钟 l 甲 醇回流提 取6 i
、
,
定容至 5 0 而 容量瓶 中备用
、
。
线性 关系 的考察 0 4 2 3
、
精 密吸 取对照 品溶液 2
,
4
,
、
6
、
8
、
0 1
2 1
、
4 川进 样检测 1
,
,
,
以 峰面 积 为横坐 标
:
,
以 进 样 体 积 为 纵 坐 标 绘 制 迷 迭 香 酸 标 准 曲线
. 3 4 7
. 5 2
2 6
.
得 一 条 过原 点 的直线
一1 。
.
并 求 得 回归 方程
。
Y
二
1护 x
,
. 9 9 二0
表 明迷 迭 香酸 的含 量 在
,
,
4 陀 范围 内 2
,
线性关系 良好
, ,
精密度 实验
重 复性 实验
,
精 密 吸 取对 照品 溶液 5 川 重 复进 样 6 次 记 录 峰面 积
取 同 一 份药 材 计 算其
R SD
,
. 6 计 算 其 R SD 值 为 0 3 %
。
. 3 项 下 供 试 品 溶液制 备 方 法 平 行 制备 6 份 按2
分别 进 样 检测
、
,
记录
、
迷 迭 香酸 的 峰 面 积
. 7 2 24h . 8 2
值分别 为
,
. 20% 2
。
稳定 性 实验
取 同 一 份药材
. 3 项 下 供 试 品 溶液制 备方 法 制 备 按2
1
份
,
分别 在 O
2
、
4
、
8
2 1
、
后进 样
,
记 录 迷 迭 香 酸 的 峰面 积
,
5 % 计 算其 R S D 值分 别为 0 8
.
。
加 样 回 收率 实 验
。
取 己知 迷迭 香酸含 量 的冬 凌草样品 一 份
. 3 2
,
,
精密 称 取 该样 品 粉末
4 % .
,
5
份
,
各 加入 迷
. 3% 为2
,
迭香 酸标 准 品 适量 按
符合 检 测 分析 要 求
项 下 供试 品 溶液制 备方法 制 备 计 算得回 收率为 9 7
峰面 积
R SD
. 9 2
不 同产地 冬凌草中迷迭 香酸含量测 定
。
精密吸 取 各供试 品 溶液 5 川 进 样检 测 根 据 外标法 计 算各
,
样
品 中迷迭 香酸 的含量
表3
结果见表
3
迷迭 香酸 含量 数据
编号
D LC 01
一
迷 迭 香酸含 量
2 89
.
m
g 岁
编号
D LC 0 8
一
迷 迭 香酸含 量
5 54
.
m
吕 岁
D L C 02
一
1 94
.
D L C 09
一
4 14
.
D LC 03
一
4
.
4
D LC - IO D L C 11
一
6 62
.
D LC
一
4 0
5 20
.
6
.
4 6
D LC 05
一
1 70
.
D L C 12
一
4 20
.
D LC 06
一
9 75
.
D L C 13
.
4 97
.
D LC 07
一
17 9 1
.
D L C 14
一
2 97
.
图
1
迷 迭香 酸标准 品 H P
LC
图谱
图 2 冬 凌草药材 H P L C 图谱
图 3 甲醇 阴性对 照 H PLC 图谱
3
讨论 通 过 以 上 研 究 发现 不 同产地 的冬 凌草 中迷 迭 香酸 的 含量 差 异 较 大 其 中 灵 宝 冬 凌草 中迷迭 香 酸 的
, , ,
含 量最 高
远 远超 过其 他 地 区 造 成 不 同地 区 冬 凌 草 中 迷迭 香酸含量 差 异 的 原 因可 能 是 环 境 影 响
, 。 , ,
。
,
或是
冬 凌草 种 内发 生 了变 异 这 些 问题 尚需要 在 以后的 研 究中进 一 步 阐 释 和 论证 本 次 实验 的 结 果 表 明不 同 产 地 的 冬凌 草在 质 量上 有 着 明显 区 别 所 以无 论 是 临床 用 药 应 用 还是 企业投 料都应 该仔 细 甄 别
区分
,
并加 以
以 保证 冬 凌 草 药 材 资源 的 科 学 开 发 及 应 用
。
参考文献
:
] l [ 规
] 2 [
2
王坤
一
,
张振秋 H 刀 中药材 2 0 0 7 年 P LC 法测 定冬凌草药材 中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量 【
.
.
,
1
月第 3 0
,
卷第
,
1
13 96 13 9 8
.
周 平
,
吕晓玲 姚秀玲 超 声波辅助提取 紫苏中迷迭香酸条件 的优化闭 天津科技大学学报 20 0 7 年 6 月 第 2 卷第
,
. .
,
,
期: 7 2
一
79
.
米 基 金项 目:
“ ” 国 家 十 一五 科技支撑计划 2 0 0 6 BI A0 6
,
A 15 3
一
作者 简介
.
:
崔璨
:
男
,
6 岁 2
,
河 南省郑 州市人 硕 士 研 究生 研 究方 向
,
。
,
,
:
中药材规范化 种植及 质量 标准 研 究
.
。
通 信作 者
:
: 37 1 0 一 59 6 陈 随清 介 l 2 54 6 130 15 54 306 1 : E 一 a il: su iq in g e he n @ 1 63
,
com
研究方 向
中药规范 化种植及 质量 标准研 究
20 8