ld50半数致死量(小鼠)
第一部分 药理学实验
实验十三 药物半数致死量(LD50))的测定
【目的】
掌握LD50测定方法及计算过程。
【原理】将一定浓度和一定体积的药物,按一定比例灌胃给予小鼠,观察7日,记录不同剂量小鼠的死亡情况,计算半数致死量,以确定药物急性毒性。
【器材】 鼠笼、烧杯、1ml 注射器等。
【药品】 普鲁卡因溶液(5个剂量)
【动物】 小鼠
【方法】
1. 预试验 模实验剂量范围,找出引起0~100%的估计致死量。
2. 正式试验
(1)取小鼠50只,体重20±2g ,♀♂各半,随机分为5组,10只/组。
(2)剂量 按等比级数增减,相邻两剂量比值1:0.6~0.9,设4~5个剂量组。
(3)给药 普鲁卡因溶液,ip 。5个剂量组。
(4)统计 按改良寇氏法公式进行计算。
LD50=lg-1[Xm-i(∑P-0.5)] (公式1)
Xm :最大剂量组剂量对数值
i :相邻两组剂量高剂量与低剂量之比的对数(相邻两组对数剂量的差值)
P :各组动物死亡率,用小数表示(如果死亡率为80%应写成0.80)
∑P :各组动物死亡率之总和
n :每组动物数
Sx50= i×(公式2)
Sx50:logLD50的标准误
X50=logLD50
LD50的95%可信限=log-1(X50±1.96Sx50) (公式3)
LD50的平均可信限=LD50±(LD50的95%可信限的高限-低限)/2 (公式4)
【结果】 填入表11。
表11 各组小鼠用药、死亡情况及有关计算
组别 动物数 剂量 对数剂量 死亡率 P 2 其他数据
(n) (mg/kg) (X ) (P )
1
2
3
4
5
【注意】
1、预试验要摸准药物引起0和100%死亡率剂量的所在范围。
2、正式试验时各剂量按等比级数分组,应避免最大剂量组的死亡小于80%,最小剂量组死亡率大于20%,否则改用其他方法计算。
3、室温:20℃为宜。
4、认真观察中毒症状情况。