普鲁士蓝染色液(核固红法)
普鲁士蓝染色液(核固红法)
简介:
含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其
含铁,且为金黄色,故称为含铁血黄素。Perls 普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞或间质内。普鲁士蓝染色用于显示局部组织内的各种出血性病变,常见于吞噬细胞内,可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广,可以进行复染。该染色液的复染液采用核固红,是最经典、最常用的复染液。
组成:
操作步骤(仅供参考) :
(一) 石蜡切片染色:
1、 组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。 2、 切片厚度4μm ,常规脱蜡至水。 3、 蒸馏水水洗。
4、 切片入Perls stain浸染。 5、 蒸馏水充分冲洗。
6、 入核固红染色液淡染细胞核。 7、 自来水冲洗。
8、 常规脱水透明,中性树胶封固 (二) 冰冻切片染色:
1、 无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗。
2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。 (三) 细胞染色: 1、4%多聚甲醛固定。
2、自来水冲洗2次,每次2min 。
3、 蒸馏水冲洗2次,每次2min 。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。
染色结果:
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林。 2、 整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品。
3、 所有切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要。 4、 冰冻切片和细胞染色,最好根据具体情况摸索实验条件。