维生素B2检测试剂盒(荧光光度法)
维生素B 2检测试剂盒(荧光光度法)
简介:
维生素B 2(Vitamin B 2) 又称核黄素,是一种异咯嗪衍生物,耐热、微溶于水。中性水溶液及乙醇溶液呈黄色,具有很强的荧光。核黄素可被亚硫酸盐还原为无色的二氢化物,同时失去荧光,在氧化剂亚硫酸盐的存在下,可被还原成无荧光的物质。
Leagene 维生素B 2检测试剂盒(荧光光度法) 是利用Vitamin B 2水溶液在激发波长440-500nm(多为460nm) ,发射波长范围约为510-550nm(多为520nm) ,在弱酸偏中性的条件下荧光最强,在强碱条件下。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
操作步骤(仅供参考) :
1、 稀释组织匀浆液:按组织匀浆液(10×):蒸馏水=9:1的比例稀释,获得1×组织匀浆液,
待用。
2、 (选做) 制备样品:取待测材料如青菜、水果、松针等,清洗擦干,准确称量5g ,加入
研磨器内。加入少量1×组织匀浆液,研磨碎,留取上清,再次用1×组织匀浆液研磨,最后一并倒入50ml 离心管,补充1×组织匀浆液至50ml 。取上清或滤液待用。 3、 稀释标准品:。4℃保存。
4、 制备亚硫酸盐工作液:取一支100mg 粉末,充分溶解于2ml 蒸馏水中配制成50mg/ml
的亚硫酸盐工作液,即配即用。
5、 Vitamin B2检测:选用恰当的滤色片,测定的激发波长为460nm ,发射波长为520nm 。
提前预热仪器30min ,蒸馏水调零。以6号管的Vitamin B2标准(2.5μg/ml)作为参比溶液调荧光光度计的荧光强度读数满刻度(100%),分别测定其他标准溶液和待测样品的相对荧光强度,如果有荧光强度大于100%的需要稀释后再行测定。在未加亚硫酸盐工作液亚硫酸盐工作液前后分别测定荧光值,分别定义为F 0和F T 。
Vitamin B2检测标准曲线绘制操作表
Vitamin B2检测待测样品操作表
计算:
待测溶液的荧光强度校准公式:F= F0-F T
以各管Vitamin B 2标准的含量为横坐标,以对应的校正后的荧光强度(F)为纵坐标,做出Vitamin B2标准测定的标准曲线。
注意事项:
1、 在上述操作中,要严格避免Vitamin B2受到阳光直射。 2、 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。 3、 如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。