维多利亚蓝B共振光散射法测阿莫西林
242
化学试剂2011年3月
2011，33（3），242 244化学试剂，
维多利亚蓝B 共振光散射法测阿莫西林
*
江虹，邓钦心，庞向东
（长江师范学院化学化工学院，重庆408100）
HCl 缓冲溶液中，摘要：建立了测定阿莫西林的共振瑞利散射法。在pH 9. 98的Tris-阿莫西林和维多利亚蓝B 相互作用后，共振瑞利散射显著增强，在337nm 处呈现最高散射强度。阿莫西林的质量浓度在0 0. 4μg /mL范围内与ΔI RRS 成正比，检出限（3S b /S ）为0. 027μg /mL。该法简便、快速、灵敏，用于人体尿液、市售阿莫西林胶囊及注射用阿莫西林钠中结果满意。阿莫西林的测定，
关键词：共振瑞利散射；阿莫西林；维多利亚蓝B 中图分类号：O657. 3
文献标识码：A
3283（2011）03-0242-03文章编号：0258-
阿莫西林是一种广谱半合成青霉素类抗生
素，临床应用广泛，主要用于呼吸道感染、消化道感染、泌尿道感染、皮肤、软组织感染、败血症、脑膜炎、心内膜炎、白喉、百日咳、创伤及手术后的感染等。目前测定阿莫西林的方法主要有：高效液
［1-3］［4］［5，6］、、相色谱法毛细管电泳法、分光光度法
［7，8］［9，10］、、荧光法流动注射化学发光法红外光谱
［11］［12］［13］法、极谱法、原子吸收法等。用得较多的
HCl 和0. 2mol /LTris （三羟甲基氨基甲烷，分析
纯，中国医药集团上海化学试剂公司）混合，用酸度计配成一系列不同pH 的缓冲溶液；表面活性
4
剂：1. 0ˑ 10μg /mL十二烷基硫酸钠（SDS ，分析
3纯，成都科龙化学试剂厂）；8. 0ˑ 10μg /mL十二烷苯磺酸钠（SDBS ，分析纯，成都科龙化学试剂
厂）；500μg /mL溴化十六烷基三甲基铵（CT-MAB ，分析纯，中国医药集团上海化学试剂公20；1%OP （乳化剂）；1%Triton-司）；2%Tween-X-100；100μg /mL聚乙烯醇-124（PVA-124）；阿莫西林（生化试剂）；其他试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。1. 2实验方法
于10mL 具塞比色管中，依次准确加入1. 5mL pH 9. 98Tris-HCl 缓冲溶液、一定量的1. 0ˑ 10－5mol /L的阿莫西林标准溶液和4. 5mL 1. 0ˑ 10－5mol /L的维多利亚蓝B 溶液，以二次蒸馏水
稀释至刻度并摇匀，放置35min 。将溶液于荧光以λex =λem 方式进行分光光度计上用1cm 液池，同步扫描，得共振瑞利散射光谱。在最大共振散射波长337nm 处分别测定体系和试剂空白的散射强度I RRS 和I 0，计算ΔI RRS =I RRS －I 0。22. 1
结果与讨论
共振瑞利散射光谱
按实验方法分别对阿莫西林、维多利亚蓝B
02-20收稿日期：2010-基金项目：重庆市教委科技基金资助项目（KJ071304）；长江师范学院科研资助项目（2008xky39）。
），作者简介：江虹（1956-女，四川资中人，学士，教授，主要E-mail ：jianghongch@163．com 。从事分子光谱研究，
但此法使用的仪器较昂贵、产是高效液相色谱法，
品处理较复杂、测定时间较长，在一般实验室不易开展。近年来，共振瑞利散射（Resonance rayleigh scattering ，RRS ）技术用于药物分析的报道较多，但未见用于阿莫西林类药物的报道。本文在维多利亚蓝B 与阿莫西林分光光度研究的基础上，进一步考察了维多利亚蓝B 与阿莫西林相互作用产生的共振瑞利散射光谱（RRS ）反应条件及主要影响因素等，建立了以维多利亚蓝B 为探针、利用共振瑞利散射技术测定阿莫西林的新方法。本快速、灵敏度高、选择性好的优点，可法具有简便、
用于痕量阿莫西林的测定。11. 1
实验部分
主要仪器与试剂F-2500型荧光分光光度计（测定狭缝5. 0nm ，日本日立公司）；Seveneasy 型实验室酸度计（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）。
阿莫西林（AMO ，中国药品生物制品检定所）
－4
标准溶液：储备液浓度1. 0ˑ 10mol /L，操作液
－5
浓度1. 0ˑ 10mol /L；维多利亚蓝B （VB ，分析
纯，中国医药集团上海化学试剂公司）溶液：1. 0ˑ 10－5mol /L；Tris-HCl 缓冲溶液：0. 1mol /L
第33卷第3期江虹等：维多利亚蓝B 共振光散射法测阿莫西林
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和阿莫西林-维多利亚蓝B 溶液用Δλ=0进行同RRS 光谱见图1。由图可见：阿莫西林和步扫描，
维多利亚蓝B 本身的RRS 较弱；阿莫西林与维多
利亚蓝B 相互作用后引起溶液RRS 的剧烈变化，在337nm 处溶液的散射强度急剧增强，并有明显
505nm 处同时存在强度相对较弱的散射峰；451、
的散射峰；随着阿莫西林浓度的增加，主散射峰逐
渐增强，阿莫西林在一定浓度范围内与散射峰强度呈良好的线性关系，可用于定量分析
。
I 0不随时间的变化而变化，I RRS 在32min 后稳下，
定（形成共振瑞利散射质点），至少可稳定2h 。实验选在35min 后测定。2. 2. 4试剂加入顺序的影响
AMO 和Tris-HCl 缓冲溶液在不实验了VB 、
同加入顺序时对体系灵敏度的影响，结果表明，加HCl 缓冲溶液、AMO 、VB 时，I RRS 最入顺序为Tris-大。实验选用该加入顺序。2. 2. 5
离子强度的影响
加入不同质量浓度的NaCl 考察了离子强度对体系RRS 强度的影响。结果表明：当NaCl 质量浓度低于500μg /mL时，ΔI RRS 基本不变，说明离子强度对实验的影响较小。2. 2. 6
表面活性剂的影响
SDBS 、CTMAB 、Tween-20、OP 、实验了SDS 、
1. AMO ；2. VB ；3 7. AMO （0、0. 2、0. 5、0. 8、1. 0mL ）-VB 体系；
实验条件：c （AMO ）=1. 0ˑ 10－6mol /L；c （VB ）=4. 5ˑ 10－6mol /L；pH 9. 98
Triton X-100、PVA-124等对体系灵敏度的影响，
结果表明均无增敏作用。2. 3
方法的选择性在最佳条件下，按实验方法考察了一些常见
图1Fig．1
阿莫西林-维多利亚蓝B 的RRS 光谱RRS spectra of amoxicillin （AMO ）-victoria
blue B （VB ）
氨基酸和糖类等对体系I RRS 的影响，在测定离子、
共存物质的允许量见表1。由表误差＜ʃ 6%时，
可知，常见阴、阳离子、氨基酸、糖类、尿素等均不
干扰测定。
表1Tab．1
2. 22. 2. 1
适宜的反应条件
溶液酸度的影响考察了不同pH 、缓冲溶液用量对体系RRS
共存物质的影响注
强度的影响。结果表明，空白溶液本身的RRS 较弱，且受溶液酸度影响较小；体系的RRS 受酸度I RRS 最大且影响较大，在pH 9. 3 10. 0的条件下，
较恒定。当缓冲溶液用量为1. 5mL 时体系的I RRS 均降低。因此，ΔI RRS 最大，高于或低于此量，
HCl 缓冲溶液。本实验用1. 5mL pH 9. 98的Tris-2. 2. 2
维多利亚蓝B 浓度的影响
研究表明，测定体系要形成适合共振瑞利散
Effect of coexisting substances
射的分子质点，探针的浓度有着较大影响。维多
利亚蓝B 浓度的改变对其自身的RRS 强度变化VB 体系的RRS 强度影响很大。不大，而对AMO-VB 浓度较低时，AMO 和VB 作用不完全，形成的RRS 分子质点不足；VB 浓度较高时，其分子自身
的相互作用增强，与AMO 的作用减弱，使体系I RRS 值降低。当VB 溶液加入量为3. 5 4. 8mL 时，体系的散射强度相对稳定。实验用1. 0ˑ 10
－5
mol /L的VB 溶液4. 5mL 。
反应时间及体系的稳定性
按试验方法配制溶液后，在最大散射波长处
2. 2. 3
注：ρAMO =0. 4μg /mL。
2. 4
每间隔一定时间测其RRS 强度，结果表明：室温
方法的灵敏度
在选定条件下，阿莫西林的质量浓度在0
244
化学试剂216-217．
2011年3月
0. 4μg /mL范围内与ΔI RRS 呈线性关系。回归方
6
程为ΔI RRS =4. 323+1388ˑ 10c （mol /L），相关
检出限（3S b /S ）为0. 027系数r =0. 9999（n =6），
μg /mL（n =12）。
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Determination of amoxicillin by resonance rayleigh scat-tering spectra of victoria blue B JIANG Hong *，DENG Qin-xin ，PANG Xiang-dong （College of Chemistry and Chemical Engineering ，Yangtze Normal University ，Chongqing 408100，China ），Huaxue Shiji ，2011，33（3），242 244
Abstract ：A novel high sensitive resonance rayleigh scattering （RRS ）method for the determination of amoxicillin has been the RRS in-developed．In pH 9. 98Tris-HCl buffer solution ，tensity of victoria blue B was greatly enhanced when amoxicil-lin was added．And the strongest ΔI RRS was located at 337nm．The intensity of RRS was in proportion to the concentra-tion of amoxicillin in the range of 0 0. 4μg /mLwith a de-tection limit （3S b /S ）of 0. 027μg /mL．The method showed advantage of convenience ，rapidity ，high sensitivity and was applied in the determination of amoxicillin in human urine and amoxicillin capsule sample and amoxicillin injection sam-ple in market with satisfactory results．
Key words ：resonance rayleigh scattering （RRS ）；amoxicil-lin ；victoria blue B
2. 52. 5. 1
应用
药物的测定
取阿莫西林胶囊（哈药集团制药总厂）5粒，
弃去胶壳后，将内容物置于小烧杯中，用水溶解后转入1000mL 容量瓶中，用水稀至刻度，摇匀并
取该液1. 0mL 置于1000mL 容量瓶中，静置后，
用水稀至刻度，摇匀，取该液1. 0mL 分析。取注
射用阿莫西林钠（哈药集团制药总厂；按阿莫西准确称取总量的1/50（相当林计0. 5g /支）1支，
于含AMO 约10mg ），用水溶解后，移入100mL 容量瓶中，用水稀至刻度，摇匀；取该液1. 0mL 稀
取该液1. 0mL 分析。均作6次平行至100mL ，
测定，再作加标回收实验（n =6），结果见表2。
2. 5. 2人尿样的测定
取人体尿样5mL ，过滤，清液待分析。结果见表2。
表2
Tab．2
样品分析结果及回收实验
阿莫西林注射用尿液中胶囊阿莫西林钠阿莫西林25023895. 21. 20. 1190. 1830. 3001. 598. 9
500512102. 41. 00. 1020. 1830. 2891. 5102. 2
—ND ——0. 0000. 3650. 3681. 2100. 8
Analytical results and recovery tests of samples
样品
标示量/（mg /支或粒）
测得平均值/（mg /支或粒）测得值/标示量/%RSD /%
·mL －1）取样量/（μg
·mL －1）加入标准量/（μg ·mL －1）测得平均值/（μg
RSD /%平均回收率/%
注：ND ：未检出；n =6。
3结论
本法具有较高的灵敏度、线性范围较宽、试剂消耗少、简便快捷，可用于痕量阿莫西林的测定。参考文献：
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