微生物的培养与应用_单元测试用

专题二 微生物的培养与应用 单元测试

一、选择题

1．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（ ）

A．细菌的大小、形状、颜色 B．菌落的大小、形状、颜色

C．有无鞭毛 D．培养基的不同

2．下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ）

A．将接种环放在火焰上灼烧 B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液

C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行

D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

3.在光亮处用同一种培养液分别培养单细胞绿藻和单细胞的酵母

菌，其结果如下图所示（甲为绿藻，乙为酵母菌）。造成这种结果

的原因是培养液中 （ ）

A．缺少无机盐

B．氧气含量太高

C．缺少有机养分

D．不含二氧化碳

4．获得纯净培养物的关键是（ ）

A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌

B．接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养

D.防止外来杂菌的入侵

5．有关倒平板的操作错误的是（ ）

A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上

B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰

C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上

D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置

6.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ）

A．先将菌液进行一系列的梯度稀释

B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面

C．适宜条件下培养

D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落

7.涂布平板操作需要用到（ ）

A. 接种环、滴管、酒精灯 B.接种环、移液管、酒精灯

C.涂布器、移液管、酒精灯 D.涂布器、接种环、酒精灯

8．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )

A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

9．下列叙述错误的是（ ）

A．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素

Ｂ．培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性

C．培养细菌时需将PH调至中性或微碱性

D．培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件

10．下列有关碳源的叙述不正确的是（ ）

A．碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物

B．某些碳源可以作为微生物的主要能源物质

C．蛋白质一定不能做碳源

D．不同种类的微生物的碳源可能不同

11．关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是（ ）

A.称量 B.灭菌 C.溶化 D.倒平板

12．以下操作用到接种环的是（ ）

A．平板划线操作 B．系列稀释操作 C．涂布平板操作 D．倒平板操作

13．能排除培养基是否有杂菌污染的方法是（ ）

A.将未接种的培养基放在实验桌上培养 B.将未接种的培养基放在窗台上培养

C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养

14．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ）

A．固体培养基 B．液体培养基

C．加入青霉素的培养基 D．加入高浓度食盐的培养基

15．甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、

乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙

）

B、甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物

C、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物

D、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物

16.伊红—美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是（ ）

A．大肠杆菌在该培养基中形成特定的菌落

B．大肠杆菌能使培养基改变颜色

C．大肠杆菌菌的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈深紫色，并有金属光泽

D．大肠杆菌能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活

17．在培养基中加入伊红和美蓝可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌

等细菌，这种培养基称为（ ）

A．选择培养基 B．鉴别培养基

C．液体培养基 D．固体培养基

18．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( )

A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质

19.有关平板划线操作正确的是（ ）

A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌

B.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需要马上塞上棉塞

C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可

D.最后将平板倒置，放入恒温箱中培养

20．某一种细菌株要从环境中提取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，

此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。

根据实验目的，选用的培养基类型是（ ）

注：Ｌ—亮氨酸 Ｓ—链霉素 “＋”—加入 “—”—不加入B

如：Ｌ—：不加亮氨酸 Ｓ＋：加入链霉素

21 ）

A．加入氮源和杀菌剂的培养基上 B．不加入氮源和不加杀菌剂的培养基上

C．加入氮源，不加杀菌剂的培养基上D．不含氮源和杀菌剂的培养基上

22．将圆褐固氮菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间培养，就能够得

到（ ）

A．菌丝 B．无一定形态的群体 C．单个细菌 D．菌落

23．在接种操作的过程中，不正确的是

A．要将接种环灼烧灭菌 B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌

C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位D．接种后还要将管口灭菌加塞

24．高压蒸气灭菌的原理是（ ）

A．高压使细菌DNA变性 B．高压使细菌蛋白质凝固变性

C．高温烫死细菌 D．高温使细菌DNA变性

25．将接种了红色细菌的培养皿置于紫外线下几天，结果培养皿中除长了一个白色

菌落外，其余菌落都是红色的，据此，实验者应该（ ）

A.暂不作结论 B.断定是紫外线产生了白色菌落的变异

C. 如果不继续用紫外线照射，预期那个白色菌落将转变为红色

D. 断定白色菌落是一种可遗传的变异

26．在实验室里，从土壤里分离出自生固氮菌所需的培养基属于（ ）

A．天然培养基 B．鉴别培养基 C．选择培养基 D．液体培养基

27．在土壤中含有自生固氮微生物比较多的是（ ）

A．表层土壤 B．中层土壤 C．底层土壤 D．所有的土层都是一样的

28．关于灭菌和消毒的不正确的理解是

A．消毒和灭菌实质上是相同的

B．灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子

C．接种环用烧灼的方法灭菌

D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法

29.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是（ ）

A.对比观察培养基有没有被微生物利用 B.对比分析培养基上是否生有杂菌

C.没必要放入未接种的培养基 D.为了下次接种时再使用

30．在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为（ ）

①溶化 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量

A．①②⑥⑤③④ B．⑥①②⑤③④ C．⑥①②⑤④③ D．①②⑤④⑥③

31．鉴别纤维素分解菌的培养基中碳源为（ ）

A、CMC-Na B、木聚糖 C、纤维素 D、裂解酶

32．刚果红染色时，加入刚果红应在（ ）

（1）制备培养基时（2） 梯度稀释时 （3）倒平板时

（4）涂布时 （5） 长出菌落时

A、（1）（3） B、（2）（5） C、（3）（5） D、（4）（5）

33．为以纤维素为唯一碳源筛选出真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的

作用与下列哪种生物类似？（ ）

A． 硝化细菌 B、 蓝藻 C、蚯蚓 D、兔子

34．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（ ）

A、未接种的选择培养基 B、未接种的牛肉高蛋白胨培养基

C、接种了的牛肉高蛋白胨培养基 D、接种了的选择培养基

35．用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照 ，对于对照组的要求不包括哪项（ ）

A、对照组培养基也严格灭菌，且不接触任何生物

B、对照组和实验组培养基放在相同的条件下培养

C、所用培养基成分及PH大小完全与实验组一致

D、培养基的量的大小与实验组必须绝对相同

36.下图是实验室使用某种接种方法在各种营养条件适宜的培养基上培养某种微生物的结果，相关叙述不正确的是（ ）（多选）

A．该图最可能是用平板划线法进行接种

B．该种微生物有可能是 H5N1 病毒

C．操作者的衣着和手，需进行消毒

D．该接种方法常用来准确统计样品中活菌的数目

37.科学家通过实验发现了细菌的快速进化过程。人们发现，用肉汤培养假单胞杆菌，如果肉汤保持不动，不久后，在肉汤的不同部位，如表面、底部或其他部位，细菌的形态发生了如下图所示的变化，出现一定数量的变异株。下列有关说法错误的是（ ）

A．这个实验说明了细菌在不同的小环境中发生了进化

B．细菌的生命周期短，繁殖速度快，容易受到外界环境影响而发生变化

C．用静止的肉汤培养FS细菌，其菌落形状将趋于一致

D．用不断摇动的肉汤培养SM细菌，不会出现FS细菌和WS细菌

38.为探究落叶是否在土壤微生物的作用下腐烂，下列各项构成了一个实验设计，其中不符合实验目的的步骤是（ ）

A．可选择带有落叶的土壤为实验材料，筛选出落叶和土壤

B．将落叶平均分成两份，把土壤也平均分成两份

C．将灭菌的落叶设为实验组，不做处理的落叶设为对照组

D．将落叶分别埋入两组土壤中，观察腐烂情况

二、非选择题：（每空1分，共30分）

39．（8分）为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如下培养基进行培养： （1）该培养基所含有的碳源有___________，其功能是_____________。 （2）该培养基所含有的氮源有___________，其功能是_____________。

（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质 是____________________。 （4）该细菌在同化作用上的代谢类型是___________型。 （5）该培养基可用来鉴别哪种细菌______________。

A.霉菌 B.酵母菌 C.大肠杆菌 D.乳酸菌

（6）按物理性质划分，该培养基属于 培养基。

40．（6分）为了研究细菌对青霉素抗药性形成的机理，有人设计了如下实验方案： 步骤1 取培养皿A若干(A1、A2、A3„„)，加人普通细菌培养基；取培养皿B若干

(B1、B2、B3„„)，加入含青霉素的细菌培养基。

步骤2 将适量细菌培养液涂抹在培养皿A1的培养基表面，放在适宜的条件下培养一

段时间，培养基的表面会出现一些细菌菌落。

步骤3 用灭菌后的丝绒包上棉花制成的一枚“印章”，在A1上轻轻盖一下，再在B1上轻轻盖一下，这样A1中的细胞就按一定的位置准确的“复制”到了B1之中。将B1培养一段时间后，B1中一定部位出现了少量菌落。

步骤4 根据B1中菌落出现的方位，将A1中对应位置

的菌落取出，均匀涂抹在A2表面，培养一段时间后，

培养基表面又会出现许多菌落。

反复重复步骤3、4，在B2、B3„„中保留下来的菌落

越来越多。直到最后，所有“复制”到B中的菌落全

都保留下来，都具有对青霉素的抗药性。

（1）普通培养基中的营养要素物质

有 。

根据培养基的用途，加人青霉素的培养基属于 。

（2）细菌抗药性的产生是细胞出现 的结果。根据现代进化理论，青霉素在细菌抗药性形成过程中起 的作用。实验中所用的细菌的代谢类型属于 。

（3）如果B1中没有菌落保留下来，实验就无法进行下去。若要使实验进行下去，可

以采用的方法有 。

41．（7分）乙醇等

（1）玉米秸秆预处理后，应该选用____酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。

（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多选）

A.酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌 C.制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌

E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物

（3）若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为______（按功能分），培养基中的碳源为___________ 。

（4）从生物体提取出的酶首先要检测 _______ ，以便更好地将酶用于生产实践。

（5）发酵阶段需要的菌种是____ ，生产酒精是要控制的必要条件是_____ 。

42、（9分）自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：

A.制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。

B.为了得到更加准确的结果，你选用 (稀释混合平板法、稀释涂布平板法)接种样品。

C.适宜温度下培养。

结果分析：

6（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为10的培养基中，得到以下几种统计结果，

正确可信的是( )

A.一个平板，统计的菌落数是23

B.两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24

C.三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26

D.四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25

（2）一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)_______________。

（3）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量 ，因为______________ 。

（4）某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？ ，为什

么？ 。 43饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有＿＿＿＿、＿＿＿＿、水、无机盐等基本营养物质。

（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行＿＿＿＿＿＿＿＿，而且须将接种后的培养皿呈＿＿＿＿状态放置。

（3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成＿＿＿＿＿＿。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的＿＿＿＿就能大致推测出样品中的活菌数。

（4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，＿＿＿＿＿＿＿＿是产植酸酶的理想菌株。

（5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行＿＿＿＿。

44在现代农业中，常在饲料中加入一定量的尿素饲养牛等牲畜。因其有特殊的器官——瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作为唯一氮源。某同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。

I.取样：到屠宰场，在刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先准备好的信封中密封。

II.制备培养基：制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏和蛋白胨培养基上生长的菌落数应明显多余选择培养基上的数目。由于初次实验，选择了一个较宽的稀释范围，并且每个稀释度下需要3个选择培养基和1

个牛肉膏蛋白胨培养基。

III.微生物的培养与观察：按稀释度的顺序分别吸取0.1ml进行平板涂布操作。将涂布好的培养皿放在30°C下培养，并且需要无氧条件。比较两种培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含有酚红指示剂的培养基中，观察是否产生颜色反应。

IV.细菌的计数：当菌落数稳定时，选取平板计数。

请回答下列问题：

（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基的作用是______________________________。

（2）每个稀释度下需要3个选择培养基的目的是__________________________。

（3）上述培养过程，需要无氧条件的原因是________________________________。

（4）含酚红的培养基应用的目的是__________________________________,结果会出现的颜色是___________，原理是__________________________________________ ______________________________________________________________________。

45、一支芽孢杆菌菌种，其中一部分芽孢杆菌有抗青霉素能力，另一部分没有抗性。 请你把对青霉素有抗性的芽孢杆菌分离出来

（1） 现有条件：无菌牛肉膏培养基两个、无菌接种台、接种工具齐备、医用青霉

素两支。

（2）实验过程

①取两个培养基，分别标号为A、B，并加入__________,加入过程一定要进行________操作。

②向A培养基接种_______________。

③接种后，将A培养基放入恒温箱中培养两天。

④从___________挑取生长良好的芽孢杆菌菌落，接种到B培养基上。

⑤接种后，将B培养基放入恒温箱中培养两天，即可获得较多的抗青霉素的芽孢杆菌。

（3）第④⑤两个步骤的目的是______________________________。

（4）、你所设计的实验检测到的是_________________细菌的相对数量。

班级 姓名 学号

一选择题：(每题2分，共70分)

1—10 BDCDC DCCBC 11—20 DACAD CBACB 21—25

DDCBA26—35 CAABB ACCCD

二、非选择题(每空1分，共30分)

36、（1）蔗糖、乳糖、蛋白胨 主要用于构成微生物的细胞物质和代谢产物

（2）蛋白胨主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物

（3）水、无机盐（或K2HPO4） （4）异养 （5）C

37、（1）碳源、氮源、生长因子、无机盐和水 选择培养基 对数期

（2）基因突变 选择 异养需氧型（3）用适量紫外线照射一段时间(其它引起基因突变的方法也行)

38、步骤B：稀释混合平板法(2分)

结果分析：（1）D （2）1.17×108（3）多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落

（4）不能 因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程

39、（1）纤维素（酶）（2）B、E (3)选择培养基；纤维素

（4）酶的活性 （5）酵母菌；无氧（密封、密闭）

1. BD 解析从图中可明显看出，这是在固体培养基上进行的平板划线法，用来接种某种微生物；病毒营寄生生活，不能用培养基进行培养，因此该种微生物不可能是H5N1病毒；在操作时，为防止杂菌污染，应进行严格的消毒和灭菌；平板划线法只能纯化该种微生物，并不能用来准确统计样品中活菌的数目，统计数目时应选用稀释涂布平板法。

2. C 【解析】分析题干信息可知，起初的SM细菌在静止的肉汤表面繁殖，一段时间后，有一部分在肉汤底部繁殖，这部分可能向厌氧方面进化，故细菌在不同的小环境下可发生进化；细菌繁殖周期短，繁殖速度快，容易受外界环境的干扰；用静止的肉汤培养FS细菌，该细菌也有可能向不同方向进化，如进化成WS细菌；搅拌肉汤，SM细菌生活的环境没有差异，就不会出现FS细菌和WS细菌。

3. C 【解析】该实验是为了探究落叶的分解是否与土壤微生物有关，所以该实验的自变量是土壤微生物的有无，其他无关变量实验组和对照组均应保持一致。

4. 参考答案】（1） 碳源 氮源 （2）（高压蒸汽）灭菌 倒置 （3）单个菌落 菌落数

（4）E （5）扩大培养

【解析】 （1）从土壤中分离培养植酸酶的菌株的过程中，培养基中加入植酸钙，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长需要，此外还要充足的碳源和氮源等营养物质。实验的灭菌一般有：灼烧灭菌（接种环、接种针或其他金属用具）、干热灭菌（玻璃器皿和金属用具等）、高压蒸气灭菌（培养基和培养皿）。

（2）将接种后的培养皿制平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

（3）当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

（4）根据题干提供的信息，E菌落的周围形成特别透明的区域，是产植酸酶的理想菌株。

（5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行扩大培养。

5.（1）作为对照，用来判断选择培养基是否起到了选择作用

（2）作为重复组，以增强实验结果的说服力与准确性

（3

（4 红色 分解尿素的细菌产生脲酶，催化下列反应：CO(NH2)2 + H2O 脲酶 CO2 + 2NH3 因此产生的 NH3

使培养基pH升高，酚红指示剂呈红色