麻黄新型仿生提取方法研究

中国药师

２００９年第１２卷第５期

ｃｈｉｎａ

Ｐｈ唧ａｃｉｓｔ

２００９，Ｖ０１．１２

Ｎｏ．５

麻黄新型仿生提取方法研究

刘文虎

董永喜范春玲

胥桂贤贺殿

（兰州大学药学院药物化学研究所兰州７３００００）

摘要目的：探索麻黄的新型仿生提取方法。方法：采用液－液连续萃取法，用酸水或碱水模拟胃或肠环境，以正辛醇模拟生物膜结构，形成萃取体系提取麻黄。并对该提取技术与酸水煮提法进行麻黄碱和离体豚鼠气管的舒张率比较。结果：本仿生提取方法与酸水煮提法相比：麻黄总碱提取率提高１５％以上、对豚鼠离体气管舒张率提高１．２倍以上，而浸膏得率降低约ｌ倍。结论：该仿生提取方法提取麻黄可行。关键词麻黄；仿生提取；气管舒张中图分类号：１１２８４．２

文献标识码：Ａ

文章编号：１００８－０４９Ｘ（２００９）０５－０５５７－０３

ＮｏｖｅｌＢｉｏｎｉｃＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＥｐｈｅｄｒａ

Ｌｉｕ

Ｗｅｎｈｕ，ＤｏｎｇＹｏｎｇｘｉ，ＦａｎＣｈｕｎｌｉｎｇ，ＸｕＧｕｉｘｉａｎ，ＨｅＤｉａｎ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＬａｎｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉ—

ｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ．７３０００。Ｃｈｉｎａ）

ＡＢＳＴＲＡＣＴ

ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ

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麻黄为草麻黄Ｅｐｈｅｄｒａ

ｍｅｄ／ａＳｃｈｒｅｎｋｅｔ

ｓｉｎｉｃａ

Ｓｔａｐｆ、中麻黄Ｅｐｈｅｄｒａ

ｉｎｔｅｒ－

仪ＬＭｌ４Ａ—Ｙｔ（上海大华仪表厂）；ＳＰＳＳｌ２．０软件包。

豚鼠３５０～４５０９，（合格证号：甘医动字第１９－０２５号），雌雄不限，由兰州大学动物房提供。２方法与结果２．ｔ提取方法

２．１．１

Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ或木贼麻黄Ｅｐｈｅｄｒａ

ｅｑｕｉｓｅｔｉｎａＢｇｅ

的干燥草质茎，主要有效成分为生物碱，具有拟肾上腺素能神经作用、平喘、镇咳、祛痰等作用¨“Ｊ。提取方法有多种，如半仿生法、温浸法、煮提法、酸性乙醇回流提取法、水蒸气蒸馏法¨冉１等。但这些方法的提取物成份复杂、体积大。本文将根据口服药物必须在胃肠酸碱性环境下，溶解于水，以中性分子形式通过生物膜这一动态过程，提出一种新型仿生提取方法。１仪器与试药

麻黄由兰州肺科医院提供，经兰州大学药学院生药教研室马志刚教授鉴定为中麻黄Ｅｐｈｅｄｒａ

ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａＳｃｈｒｅｎｋｅｔＣ．

麻黄酸水煮提法。刊将麻黄药材粉碎过２０目的筛，

第１次加入ｌＯ倍鼍水，提取４５ｍｉｎ；第２次煮提加入８倍量水，提取３０ｍｉｎ；提取时ｐＨ为３，用盐酸调节。提取液浓缩精制，蒸卡、自然干燥即得。

２．１．２麻黄新型仿生提取法将麻黄药材粉碎过２０目的筛，取１００ｍｌ烧瓶，准确称取１０９左右的麻黄．第１次提取，加入ｐＨ为５的酸水４倍量，放人磁子，安装于液一液连续萃取装置悼１上（见图１）。然后通过冷凝管加入适鼍的正辛醇，提取、浓缩２个子系统的正辛醇形成循环，提取子系统保温于３７～３８℃，并搅拌；浓缩子系统加热（６０℃）减压蒸馏８ｈ。第２次提取，收集卜述提取药渣，加入ｐＨ为８．５的碱水４倍量，蒸馏时间４ｈ，其余操作同前。提取完毕，收集被浓缩的提取液，减压蒸除正辛醇，６０℃真空干燥至恒重。

以上酸水、碱水体积、ｐＨ及蒸馏时间等提取条件通过以麻黄碱、伪麻黄碱含撼为筛选指标的正交试验优化而得。２．２浸膏得率测定

精密量取等量的提取液，分别置已干燥至恒重的蒸发皿

Ａ．Ｍｅｙ的干燥草质茎。盐酸麻黄碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：０７１４－９９０１）；盐酸伪麻黄碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：１７１２３７－２００３０４）；甲醇、乙腈（色谱醇）；磷酸组胺溶液（浓度０．０７ｍｇ・ｍｌ“），其他试剂均为分析纯。

赛多利斯分析电子天平（ＢＳｉ１０Ｓ，ｊＥ京赛多利斯仪器公司，精密度０．１ｍｇ）；数控超声波清洗仪（ＫＱ－５００ＤＥ型，昆山市超声仪器有限公司）；日本岛津ＬＣ２２０１０Ａ高效液相色谱仪，自动进样系统，ＣＬＡＳＳ２ＶＰｖｅｒ．６．０色谱数据ｒ作站；水浴恒温振荡器（江苏金坛市医疗仪器厂）；台式自动平衡记录

基金项目：兰州ｆ仃科技局基金项日（编号：『Ｈ科技０６－４－０９）

作者简介：刘文虎，硕士研究生；研究方向：药物合成和中药新药的开发。

Ｔｅｌ：１３９１９８８８０３０Ｅ・ｍａｉｌ：ｌｉｕｗｅｎｈｕ２００６＠ｓｉｎａ．ｃｏｒｎ

通讯作者：贺殿，副教授，研究方向：抗老年傩痴呆新药没计与合成和中药新药开发。Ｔｅｌ：１３００８７３８９２２，Ｅ—ｍａｉｌ：ｍｃｄｄｈｄ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃａ

万方数据

＝炙彳７

ｗｗｗ・ｚｇｙｓ・ｏｒｇ

ｂ瓶装入溶剂，ａ瓶装入药材和溶剂，ｂ瓶中溶剂存减压下由上侧管蒸出经冷凝进入ａ瓶，提取物经Ｆ侧管骷入ｂ瓶，如此往复循环。其中ａ和相关辅助装置构成提取子系统，ｂ、ｃ、ｄ和相关辅助装置组成浓缩循环子系统。

图１

液一液连续萃取装置示意图

中，水浴浓缩至干，于１０５℃干燥３ｈ，移置干燥器中，冷却至室温，迅速精密称定蓖繁，以干燥品计算出浸膏得率。２．３麻黄碱和伪麻黄碱含量测定归川

２．３．Ｉ样品溶液的制备精密称定浸膏粉０．１９，加入２ｍｌ氨水溶解，加氯仿一甲醇（１：１）混合溶液８ｎｄ，超声振荡提取２次，每次ｌＯｍｉｎ，精密吸取１ｍｌ，置于ｌＯｍｌ鼍瓶中，以甲醇定容，用０．４５１．Ｌｍ微孔滤膜滤过，得供试品溶液备用。２．３．２对照品溶液的制备

精密称取盐酸麻黄碱对照品

１０．２０ｍｇ、盐酸伪麻黄碱对照品２６．ＯＯｍｇ，置于ｌＯｍｌ量瓶中，用甲醇溶解并定容，用０．４５１ｘｍ微孔滤膜滤过，制成对照品溶液备用。

２．３．３色谱条件色谱柱为ＬｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒＣ１８（２５０

ｍｍ×４．６

ｍｍ，５岬），流动相为乙腈一０．Ｉ％磷酸水溶液（３：９７），流速

为０．６ｍｌ・ｍｉｎ～，柱温为２５。Ｃ，检测波长为２０７ｎｍ，进样量为

１０“。

２．３．４线性关系考察精密吸取麻黄碱和伪麻黄碱对照品溶液适量，用甲醇稀释成浓度为１．５２～５１．００１ｘｇ・ｍｌ“和１．Ｏｌ～６５．ＯＯｔｘｇ・ｍｌ。１的系列对照品溶液。取上述各系列对照品溶液１０山进样分析，以峰面积（Ｙ）对浓度（ｘ）进行线性回归，得回归方程分别为ｙ麻＝１．４７×１０３Ｘ一２．８６×１０２（ｒ＝

１）；ｙ伪＝４．１４×１０５Ｘ一３．１０×１０５（ｒ＝０．９９９７）；麻黄

碱在１．５２—５１．００峭・ｌＩｌｌ～、伪麻黄碱在１．０ｌ～６５．００邮・

ＩＩｌｌ叫范围内线性关系良好。精密称取已知含量（麻黄碱１．１６ｍｇ・

ｇ～，伪麻黄碱４．４４ｍｇ・ｇ。１）的麻黄药材３．５２９，共９份，按低、中、高分组，按“１．２”项下方法提取，分别精密加入麻黄碱对照品溶液各２．０，４．０，６．０ｍｌ，伪麻黄碱对照品溶液各

ｒａｌ，按“３．１”项下方法制备供试液，精密吸取

加样供试液ｌＯ一进样，按上述色谱条件测定，计算。结果麻黄碱、伪麻黄碱平均回收率ＲＳＤ分别为９９．３％，０．７％；

精密度试验精密吸取对照品溶液，重复进样６次，每次１０山，测定峰面积并计算麻黄碱及伪麻黄碱的ＲＳＤ分另ｑ为１．９９％和２．０３％。取浸膏粉６份，精密称定，按“３．１”项

姗万方数据

研究论文

下平行操作６次，制备供试品溶液，精密吸取，每次１０叫，测定峰面积，并计算麻黄碱及伪麻黄碱含量ＲＳＤ分别为２．０９％和１．９９％，表明该方法重复性良好。

２．４

两种提取物中麻黄碱、伪麻黄碱及总碱含量的比较用新型仿生提取法、酸水煮提取法分别提取３批麻黄药

材，经比较：仿生提取法较酸水煮法所得浸膏收率低近１倍，仿生法提取所得麻黄碱含量较低，但伪麻黄碱含量高，且总碱含量较酸水煮法高出约１５％，产品色泽、质量仿生法明显优于水煮法，结果见表ｌ。

表１

两种提取物中麻黄碱、伪麻黄碱及总碱含量比较

注：与酸水煮提法比较，’Ｐ＜０．０１，△Ｐ＜０．０５

２．５豚鼠离体气管实验［１ｌ－１２】

将豚鼠处死，取气管置于克．亨氏营养液中，剥离外周组织并将气管由一端向另一端螺旋形剪成条状，每２～３个软骨环剪成一个螺旋条，连接于描记装置，描记时负荷加大至１９，标本固定于２０ｍｌ浴槽中约４５ｒａｉｎ。实验时先加入０．３ｍｌ磷酸组胺溶液（浓度０．０７ｒａｇ・ｍｌ。１），稳定后加０．５ｍｌ生理盐水，记录气管条收缩力。然后用营养液洗涤气管条，再加Ｏ．３ｌｌｌｌ磷酸组胺溶液，稳定后加０．５ｍｌ麻黄提取液（每ＴＴｌｌ相当

于牛药麻黄０．５９），记录气管条舒张力，并计算麻黄不同提取液的舒张率，比较不同提取方法所得麻黄提取液对豚鼠气管舒张作用，并和０．０５ｍｍｏｌ・Ｌ～、２．５ｍｌ的阳性对照异丙肾上腺素比较，见表２。

表２不同麻黄提取液对豚鼠离体气管舒张率（ｉ：ｋｓ，ｎ＝４）

注：舒张率（％）＝（麻黄提取液的舒张力／磷酸组胺溶液的收缩力）×１００；与酸水煮提取液组比较，‘Ｐ＜０．０５。

试验结果表明，新型仿生提取法较水煮法提取总碱含量仿生法提取液对豚鼠离体气管舒张率较水煮法提高１．２０．９９９

２．３．５加样回收率

３讨论

３．１不同提取方法比较

高出１５％以上，且产品外观及质量仿生法明显优于酸水煮法，浸膏收率低是由于萃取体系模拟胃肠环境，在较低温度萃取，除去了大量的非药成分，总碱含量高是由于提取条件温和，有效成分不容易被破坏。

３．２不同提取液对豚鼠气管条舒张率的比较

３．０，６．０．９．０

９９．１％，０．７％。

２．３．６

倍以上，两种方法所得提取液对豚鼠离体气管舒张率差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。表明仿生提取所得总碱质量较佳，

对气管舒张的药效更显著。

２．３．７重复性试验

中国药师

２００９年第１２卷第５期ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｉｓｔ２００９，Ｖ０１．１２

Ｎｏ．５

北豆根及刺五加提取物对正常小鼠血液流变学作用的比较

刘蔚

１０００９１）

车玲孔华丽

刘洁温筱煦孙玲冯端浩（中国人民解放军总医院第二附属医院药剂科北京

摘要目的：研究比较北豆根提取物及刺五加提取物对小鼠血液流变学的作用。方法：实验一小鼠分别给予浓度为０．２５９・ＩＩｌｌ“和１．Ｏｇ・Ｉｌｌｌ“的北豆根提取物，实验二小鼠分别给予浓度为０．２５９・ｍｌ“和１．Ｏｇ・ＴＩｌｌ“的刺五加提取物（ｎ＝１２，ｉｇ），连续给药３周。并设生理盐水组和维生素Ｅ组作为对照。血细胞分析仪进行常规血细胞测定，荧光偏振法测定红细胞膜流动性和微粘度。结果：北豆根提取物可使平均血细胞容积（ＭＣＶ）显著降低，血小板数量（ＰＬＴ）显著升高，低浓度北豆根可显著增加红细胞数量（ＲＢＣ），高浓度北豆根可显著降低白细胞数量（ＷＢＣ）；低浓度北豆根可显著增加红细胞膜流动性，降低微粘度，而高浓度北豆根的作用不明显。高浓度刺五加提取物可显著性增加血小板数量（ＰＬＴ）及红细胞膜流动性，降低微粘度，低浓度刺

五加的作用不明显。结论：一定浓度的北豆根提取物及刺五加提取物可以增加红细膜流动性，从而降低血液粘度，改善血液

流变学指标。

关键词北豆根；刺五加；血液流变学；红细胞膜流动性；微粘度中图分类号：Ｒ２８５．５

文献标识码：Ａ

文章编号：１００８－０４９Ｘ（２００９）０５－０５５９－０３

ＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅＳｔｕｄｉｅｓＳｅｎｔｉｃｏｓｉ

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ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＥｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＲａｄｉｘＲＭｚｏｍａ

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ＢｌｏｏｄＲｈｅｏｌｏｇｙｉｎ

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Ｗｅｉ，ＣｈｅＬｉｎｇ，ＫｏｎｇＨｕａｌｉ，ＵｕＪｉｅ，ＷｅｎＸｉａｏｘｕ，ＳｕｎＬｉｎｇ，ＦｅｎｇＤｕａｎｈａｏ（ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＳｅｃｏｎｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＰＬＡＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，

Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９１，Ｃｈｉｎａ）

ＡＢＳＴＲＡＣＴｇｅｓｉｎ

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ

ｏｆＲｈｉｚｏｍａ

ｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔＭｅｎｉｓｐｅｒｍｉａｎｄＡｅａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ

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ｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅＮｏ．１ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：ｔｗｏｇｒｏｕｐｓｏｆｍｉｃｅ

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（０．２５，１．０９・ＩＩｌｌ～，ｎ＝１２，ｉｇ）ｆｏｒ

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３ｗｅｅｋ．ＮｏｒｍａｌｓａｌｔｖｉｔａｍｉｎＥ

ｃｏｎｔｒｏｌｓ．Ｂｌｏｏｄｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ

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ｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＣｏｍｐａｒｅｄＲＢＣ

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ｃｏｕｎｔ

ｍｅｎｉｓｐｅｒｍｉ

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ｇｒｏｕｐ，ＷＢＣ

Ｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎｈｉｓｈｇｒｏｕｐ；ＴｈｅｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｍｅｍｂｒａｎｅｆｌｕｉｄｉｔｙＷａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄａｎｄｍｉ－

Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｅｉｌｉｕ５２８＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ

作者简介：刘蔚，女，副主任药师，专业方向：临床药学。Ｔｅｌ：（０１０）６６７７５１７８

３．３小结

４林朝展，祝晨藻，杨金燕，等．麻黄药材的质量分析研究［Ｊ］．中药新药与临床药理，２００５，１６（１）：５６－５８

５张丽静，解成喜，符继红．麻黄草中麻黄碱浸提方法的比较研究［Ｊ］．新疆

大学学报（自然科学版），２００４，２１（１２）：３８６－３８８

６沈红，狄留庆，黄耀洲．不同提取方法对麻黄中麻黄碱提取率的比较研究

［Ｊ］．南京中医药大学学报，２０Ｍ。２０（３）：１７０—１７２

７陶蕾，杨长青。李成．酸水煮提法提取麻黄的工艺研究［Ｊ］．中国药房，２００７，

１８（１２）：９０ｌ－９０７

本研究提出的新型仿生提取方法模拟药物吸收分布生理过程，在保留中药传统哲学的整体观、系统观基础上，模拟机体生理过程把药与非药成分分开，最大限度地除去非药成分，进一步为制剂创新和药学后续研究提供可靠的物质基础；为寻找中药有效成分提供线索，从而为中药学研究提供新思路、新方法。

参考文献

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１０刘永，秦剑．ＨＰＬＣ法测定麻黄中盐酸麻黄碱的含量［Ｊ］．现代医药卫生．

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ＸｉｕＬＭ．ＭｉｕｍＡＢ．Ｙａｍａｍｏｔｏｆｉｎｅｉｎｍｉｃｅ

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ｗｉｔｈｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｄｉａｂｅｔｅｓ［Ｊ］．ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌ矿Ｃｈｉ－

Ｍｅｄｉｃｉｎｅ。２００ｌ，２９（３－４）：４９３－４９６

万方数据

。泐