促甲状腺激素受体在甲状腺癌中的表达及其临床作用探讨

　　[摘要] 目的 分析和探讨甲状腺癌患者体内促甲状腺激素受体表达情况。 方法 对整群选取的2011年4月―2015年3月该院肿瘤科收治的65例甲状腺癌患者临床资料进行回顾性分析，选取30例甲状腺功能正常的健康人作为对照组，对采集的甲状腺组织进行HE染色观察并进行免疫组织化学检测促甲状腺激素受体在其中的表达情况。 结果 检测结果表明促甲状腺激素受体在正常甲状腺组织和甲状腺癌患者甲状腺组织中均有表达，但后者着色明显要浅，表达部位均位于细胞膜的基地侧。在正常甲状腺组织中的阳性表达率为100.00%（30/30），显著高于甲状腺肿瘤患者的84.84%（28/33）和甲状腺癌患者的68.75%（22/32）。并且甲状腺肿瘤患者的阳性率显著高于甲状腺癌患者，差异有统计学意义（P　　[关键词] 甲状腺癌；促甲状腺激素受体；表达率；临床作用；回顾性分析 　　[中图分类号] R736.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）09（c）-0040-03 　　[Abstract] Objective To analyze and investigate the expression of thyroid stimulating hormone receptor in thyroid cancer patients. Methods A retrospective analysis was conducted on the clinical data of thyroid cancer patients admitted in the Oncology Department of our hospital from April 2011 to March 2015. And other 30 healthy people with normal thyroid function were selected as the control group. The thyroid tissues of the thyroid cancer patients and control group were stained by HE staining and measured by immunohistochemistry for detecting the expression of thyroid stimulating hormone receptor. Results The results showed that thyroid stimulating hormone receptor in normal thyroid tissue and the thyroid tissue of thyroid cancer patients expressed， but the latter coloring was shallow， the expression site was located in the base side of the cell membrane. The positive expression rate of thyroid stimulating hormone receptor in the normal thyroid tissues was 100% （30/30）， significantly higher than 84.84% （28/33） in thyroid tumor patients and 68.75% （22/32） in thyroid cancer patients. And the positive rate of thyroid stimulating hormone receptor in thyroid tumor patients was significantly higher than that in thyroid cancer patients with statistically significant difference（P　　[Key words] Thyroid cancer； Thyroid stimulating hormone receptor； Expression rate； Clinical effect； Retrospective analysis 　　该研究对该院肿瘤科2011年4月―2015年3月间收治的65例甲状腺癌患者临床资料进行回顾性分析，分析和探讨甲状腺癌患者体内促甲状腺激素受体表达情况，分析其临床意义为该患者的TSH抑制疗法提供参考依据，现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　该研究整群选取的65例为该院肿瘤科收治的甲状腺癌患者，根据肿瘤组织分化程度不同将其分成甲状腺肿瘤组和甲状腺癌组，甲状腺肿瘤组患者33例，年龄在32～69岁之间，平均年龄为（42.6±2.8）岁，其中男性患者8例，女性患者25例；甲状腺癌组患者32例，年龄在30至70岁之间，平均年龄为（43.1±2.7）岁，其中男性患者7例，女性患者25例；选取30例甲状腺功能正常的健康人作为对照组，年龄在31至69岁之间，平均年龄为（42.8±2.3）岁，其中男性6例，女性24例。 　　1.2 检测方法 　　1.2.1 HE染色 所有患者均进行石蜡连续切片，HE染色操作步骤如下[1]：①脱蜡。将烤干的切片放入二甲苯（Ⅰ），后再放入二甲苯（Ⅱ）中，各为5 min，以溶去切片上的石蜡。②复水。是将脱蜡后的切片经各级浓度酒精逐渐下降到水的过程，即将二甲苯（Ⅱ）中取出的切片移入无水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸馏水，各级中停留1～5 min。③染色。将蒸馏水洗涤后的切片移入Harris苏木精液中5～10 min，使细胞核着色。用自来水洗去切片上残余的染液，用1%盐酸酒精分色数分钟。入1%氨水或自来水浸洗，使之返蓝，在蒸馏水中浸片刻。0.5%伊红酒精溶液中染色2～5 min，使细胞质着色。④脱水。切片依次入95%酒精（Ⅰ）→95%酒精（Ⅱ）→无水酒精（Ⅰ）→无水酒精（Ⅱ），各级中停留1～5 min。⑤透明。切片入无水酒精与二甲苯→二甲苯（Ⅰ）→二甲苯（Ⅱ），各级停留1～5 min。⑥封藏。将切片从二甲苯（Ⅱ）中取出，用纸或布擦去材料周围的二甲苯。在材料中央滴一小滴树胶，然后，用镊子加盖盖玻片。待干燥后即可用于观察。⑦染色结果。细胞核呈现鲜艳的蓝色，细胞质及细胞间质呈粉红至红色。 　　1.2.2 免疫组织化学 ①脱蜡与水化：将切片置于60 ℃孵箱中干烤约40 min，再将其置于二甲苯中浸泡20 min之后将其置于无水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸馏水，各级中停留1～5 min；②抗原修复：采用含有EDTA的浓度为0.25%的胰蛋白酶进行消化，约10 min；③SP染色：将切片置于3%的双氧水中，室温浸泡10 min，从而达到将内源性过氧化物酶活性阻断的效果，采用山羊血清进行封闭，15 min后加入TSH受体的单克隆抗体，4 ℃孵育过夜，之后加入含有生物素标记的二抗，最后进行显色观察[2]。 　　1.3 统计方法 　　该研究中所有数据均通过SPSS 20.0软件进行处理，计数资料采用χ2检验。 　　2 结果 　　2.1 正常人群与甲状腺肿瘤患者相比 　　检测结果表明促甲状腺激素受体在正常甲状腺组织和甲状腺癌患者甲状腺组织中均有表达，但后者着色明显要浅，表达部位均位于细胞膜的基地侧。在正常甲状腺组织中的阳性表达率为100.00%（30/30），显著高于甲状腺肿瘤患者的84.84%（28/33）和甲状腺癌患者的68.75%（22/32），差异有统计学意义（χ2=4.39，P=0.03　　2.2 甲状腺肿瘤患者于甲状腺癌患者相比 　　甲状腺肿瘤患者的阳性率显著高于甲状腺癌患者，差异有统计学意义（χ2=4.14，P=0.03 　　3 讨论 　　甲状腺癌（Thyroid carcinoma）是一种发生于头颈部位的内分泌性的常见恶性肿瘤，其中以分化型的甲状腺癌较为常见，约占90%，中青年女性是该病的高发人群[3]。与机体其它部位的恶性肿瘤患者相比而言，甲状腺癌患者特殊的组织学特性以及生物学行为将对其临床治疗的效果产生较大的影响。根据美国国立综合癌症网（National Cancer Network，NCCN）2010年颁发的甲状腺肿瘤治疗指南中指出[4]，该疾病患者临床治疗的首选方式仍然为外科手术，此外，左旋甲状腺素的抑制性治疗目前对于分化型甲状腺癌还是十分必要的，该方法的基本理论基础在于机体的下丘脑-垂体-甲状腺轴负反馈系统的工作网络。临床上对于甲状腺癌患者给予左旋甲状腺素进行治疗，能够有效地抑制机体促甲状腺素的分泌和释放，有效降低血清中TSH含量，进而降低异常刺激对于残余甲状腺组织上的TSH受体的刺激作用，最终达到抑制甲状腺癌患者的病灶增长以及去分化的发生、发展[5]。临床上主要对分化较好的甲状腺癌患者采用抑制治疗，而对于分化程度较低或者未分化的甲状腺癌患者，由于其机体对下丘脑-垂体-甲状腺轴的依赖性相对较差，因此不能实施TSH抑制疗法[6-7]。 　　甲状腺激素受体是G蛋白偶联受体的超家族成员之一。其基本生理功能是调节机体甲状腺的合成以及释放[8]。其结构上是由α、β两条多肽链部分组成。在生理情况下，当有甲状腺激素与甲状腺激素受体结合后，细胞膜发生G蛋白的α亚基偶联，通过G蛋白的介导，快速激活腺苷酸环化酶的活性，导致机体内cAMP的含量持续升高，此外，该途径还可以通过二磷酸肌醇循环，激活机体其它的生物学反应途径[9]。 　　该研究结果表明在正常甲状腺组织中的阳性表达率为100.00%，显著高于甲状腺肿瘤患者的84.84%和甲状腺癌患者的68.75%。并且甲状腺肿瘤患者的阳性率显著高于甲状腺癌患者，这一数据与黄静等报道结果接近[7]。临床在正常的甲状腺组织中促甲状腺激素受体具有较高表达，随着甲状腺组织分化程度的降低其表达率明显下降，这一结论为临床上分化型甲状腺癌患者的TSH抑制疗法提供了重要的数据参考，同时通过对促甲状腺激素受体检测能够对患者甲状腺肿瘤恶性程度进行预测。 　　[参考文献] 　　[1] 徐校成，王可敬.分化型甲状腺癌术后应用促甲状腺激素抑制疗法的价值探讨[J].中华全科医学，2015（5）：740-742. 　　[2] 蒋倩倩，文芳，曹仁贤.甲状腺激素受体β突变在甲状腺癌转移中的研究进展[J].现代医药卫生，2014（2）：228-230. 　　[3] Araki N， Iida M， Amino N， et al.Rapid bioassay for detection of thyroid-stimulating antibodies using cyclic adenosine monophosphate-gated calcium channel and aequorin[J].Eur Thyroid J，2015，4（1）：14-19. 　　[4] 姚韩.血清促甲状腺激素受体抗体（TRAb）测定在甲状腺疾病临床诊断中的应用价值[J].吉林医学，2013（31）：6513-6514. 　　[5] 方毅，龙亚红，左向华.ECLIA法检测血清促甲状腺激素受体抗体在自身免疫性甲状腺疾病中的诊断价值[J].中华临床医师杂志：电子版，2013（12）：5629-5630. 　　[6] 曲莉，万晓艳，罗艳华.促甲状腺激素受体抗体和甲状腺过氧化物酶抗体检测对Gravse病的诊断意义[J].中国地方病防治杂志，2013（6）：429-430. 　　[7] 黄静，张文静，吴靖芳，等.促甲状腺激素、甲状腺球蛋白抗体、过氧化物酶抗体对甲状腺疾病的诊断价值[J].重庆医学，2013（32）：3875-3877，3880. 　　[8] Giménez-Barcons M， Colobran R， Gómez-Pau A， et al.Graves' Disease TSHR-Stimulating Antibodies （TSAbs） Induce the Activation of Immature Thymocytes： A Clue to the Riddle of TSAbs Generation？[J].Journal of Immunology，2015，194（9）：4199-4206. 　　[9] 关红军，关红伟，鲁俊华，等.我国人群血清促甲状腺激素水平与甲状腺癌的Meta分析[J].环境与健康杂志，2013（12）：1115-1116. 　　（收稿日期：2015-06-25）