牙周组织再生的临床研究进展_李治邦

31（6）实用口腔医学杂志（J Pract Stomatol ）2015Nov ，·855·

檵檵檵檵殝

综述

檵殝

牙周组织再生的临床研究进展

李治邦

高丽娜

毕春升综述

陈发明审校

【摘要】近年来，生物信号分子的开发与组织工程技术的研究取得突飞猛进的发展，给牙周再生带来新的机遇和挑战。该文将就牙周组织再生的研究现状作一简述，重点介绍世界范围内生物信号分子和干细胞治疗牙周病的最新临床研究成果和进展。【关键词】牙周再生；临床研究；生长因子；细胞治疗；富血板血浆（PＲP）；釉基质衍生物（EMD ）

Development and progresses of periodontal tissue regeneration in clinical research

LI Zhibang ，GAO Li ＇na ，BI Chunsheng ，CHEN Faming．710032Xi ＇an ，State Key Laboratory of Military Stomatology ，School of Stomatology ，The Fourth Military Medical University ，China

【Abstract 】Along with recent advances in biological signal molecule and tissue engineering technology ，periodontal regeneration has been gained more and more new opportunities ，but also faces many challenges．This paper briefly reviewes the preclinical and clinical studies of periodontal tissue regeneration ，highlighting the latest achievement and progress in the clinical study of biological signal molecules and stem cell therapy in the treatment of periodontal disease worldwide．

【Key words 】Periodontal regeneration ；Clinical research ；Growth factors ；Cell therapy ；Platelet-rich plasma （PＲP）；

Enamel matrix derivative （EMD ）在世界范围内牙周病是口腔两大主要疾病之一，

均有较高的患病率，在我国，牙周病的患病率更是在龋病之上。牙周病不仅危害口腔健康，导致牙齿丧失，还与全身健康有着密切的关系，目前牙周病已被列为糖尿病的第六并发症。自19世纪显微镜问世以来，人们对牙周病的组织病理学有了深入的了解。病原微生物随着牙周袋的深入诱发深部组织的感染，从而导致牙周附着丧失、牙周袋的形成、牙槽骨吸收、牙齿松动脱

1902年俄国Znamensky 提出去除牙石及刮落。因此，

治袋壁的方法治疗牙周炎。20世纪初牙周手术发展成为牙周病治疗的重要手段，经历了切除性手术、重建性手术、再生性手术3个发展阶段。切除性手术，其目

“坏死感染”的在于切除组织，不仅要去除“病变的牙

，龈”和炎症组织，还要清除“感染和坏死的牙骨质”消

除牙周袋；重建性手术，其目的不再是消除牙周袋，而是使牙周袋变浅，重建牙槽骨和牙龈生理外形，以有利于菌斑控制；再生性手术，其目的是促使牙周附着结构的再生，即在病变部位的牙根表面形成新的牙骨质，使有功能性排列的牙周膜主纤维附着其中，并与新生的牙槽骨相连，形成新的牙周附着。20世纪80年代引

GTＲ）的提导组织再生术（guided tissue regenenration ，

基金项目：国家自然科学基金（编号：81500853）

作者单位：710032西安，第四军医大学口腔医学院·军事口腔医学国

家重点实验室

檵殝

出与广泛临床应用，成为第一种真正意义上的牙周组

织再生治疗手段。

近年来，生物信号分子的开发与组织工程技术的研究取得突飞猛进的发展，给牙周组织再生带来新的机遇和挑战，牙周组织再生技术的发展也进入了一个新时期。本文对牙周组织再生临床前期的研究和临床研究概况作一简述。11．1

牙周组织再生概述

传统的牙周治疗

传统的牙周治疗以去除牙周病发病的病因为主要目的，主要方法包括洁治术、刮治术、翻瓣术、骨修整

通过以上方法去除菌斑、牙术、

药物治疗以及调等，

或切除感染的病变组织、建石等病原微生物的刺激，

立平衡良好的功能性咬合关系以消除病因，从而促进牙周组织的健康和修复。尽管传统的牙周治疗在消除病因方面有确切的作用，但是并不能使已经丧失的牙周组织得到重建与再生。1．2第一代牙周组织再生

第一代牙周组织再生是在传统牙周治疗的基础上

GTＲ等方法实现牙周组织通过植骨术（bone grafts ）、

的再生。植骨术是将骨或骨替代品等移植材料植入因牙周炎造成的牙槽骨缺损处促进骨再生的方法。目的是通过移植材料来促进新骨的形成，修复骨缺损，恢复

檵檵檵檵殝

·856·牙槽骨的解剖形态，达到理想的骨再生和新附着的愈

合。GTＲ是指在牙周手术中利用膜性材料作为屏障，阻挡牙龈上皮在愈合过程中沿根面生长，并为牙周膜细胞的增殖分化提供一定的空间，引导具有形成新附着能力的牙周膜细胞优先占领根面，形成新附着促进牙周组织的再生。

1．3第二代牙周组织再生

生长因子是一类存在于体内的生物活性因子，通过与靶细胞上的相应受体结合，调节细胞生长、伤口愈合及组织再生的有关基因，从而促进组织的修复和再生。因此，为了促进新的附着形成，提高根面的生物相容性及增强牙周前体细胞生物活性，在GTＲ、植骨术、翻瓣术中应用注射装置在根面涂抹生长因子后缝合软组织，以增强牙周手术的术后效果。目前已应用于临床研究的生长因子主要包括：富血小板血浆（platelet rich plasma ，PＲP）、釉基质衍生物（enamel matrix deriv-ative ，EMD ）、碱性成纤维细胞生长因子（fibroblasts growth factor-2，FGF-2）等。1．4第三代牙周组织再生

长期以来，大量的基础研究及临床牙周治疗结果表明，GTＲ、局部应用EMD 及生长因子促进牙周组织再生能力有限且结果存在不可预知性，这可能与牙周缺损的类型、剩余牙周组织量、生长因子发挥作用时间的不可控性等因素有关。然而，牙周组织再生的基础及关键是牙周膜细胞。牙周组织工程、干细胞治疗及基因治疗有望解决这一难题。组织工程学是近年来发展起来的一门新兴边缘学科，牙周组织工程则是利用组织工程学原理将体外培养的高浓度、功能相关的牙周膜细胞种植于具有良好生物相容性和生物可降解性的细胞外基质材料上，经过一段时间的培养，将这种细胞与生物材料复合体植入牙周病损部位以形成新的具有其原来特殊功能和形态的相应组织和器官，达到修复创伤和重建功能的目的。而基因治疗是将具有特定作用的基因导入靶细胞后，再将靶细胞植入，使细胞能持续分泌生长因子从而促进组织再生。2

GTＲ治疗的临床应用概况

GTＲ生物膜主要包括不可吸收和可吸收膜材料。聚四氟乙烯是研究最早、应用最广的不可吸收屏障膜材料，具有良好的生物相容性和良好的力学性能，可以单独使用。但是由于该类膜材料的不可降解性，需要二次手术取出，增加患者痛苦，因此临床上倾向于使用可吸收膜。以胶原膜为代表的可吸收膜是目前临床应

用最广泛的，而且其中许多已商品化如Bio-Gide 、Bio-mend 、BME-10X 等［1］。胶原膜不仅具有良好的生物

实用口腔医学杂志（J Pract Stomatol ）2015Nov ，

31（6）相容性，而且其表面利于细胞生长，能够参与组织的修复。但其力学性能较差，易于塌陷，因此，临床上常常与植骨材料联合使用。

临床上GTＲ多应用于窄而深的骨内袋，尤其是三壁骨袋，可能因为三壁骨袋的牙周膜细胞来源丰富而且易于提供牙周膜细胞生长空间，故效果最好；窄而深的二壁骨袋也是较好的适应证。另外，二度根分叉病

变为主要适应证［2］

，

但必须要有足够的牙龈高度，以便能够覆盖术区。杨泓等［3］

通过GTＲ联合骨粉治疗老年牙周病患者骨内缺损结果表明，相比于单纯的翻

瓣术，GTＲ的临床效果更明显。但是，目前对于GTＲ联合应用植骨术的临床疗效，国际上还未能形成统一的定论。二者的联合应用与单独应用植骨术，临床效果也无很大的差异。Vouros 等对34个临床病例进行了长达10年的临床观察，发现引导组织再生术与植骨术联合应用，能够明显的降低患者骨内袋的深度，相比

临床上单纯的应用翻瓣术有显著的临床效果［4］

。Gonca 等将12名牙周病患者分为2组，实验组应用GTＲ联合植骨术治疗，对照组只进行单纯的植骨术治疗。术后6个月，临床检查与影像学分析显示：实验组与对照组的牙周状况较术前均有明显的改善，但是实

验组与对照组结果无统计学差异［5］

。3生物信号分子治疗

3．1

临床前研究

信号分子包括生长因子、分化因子、黏附因子等［6］

。多种生物活性分子已被证明具有较强的促进牙周组织修复的功能，它们包括EMD 、转化生长因子

β（transforming growth factor ，TGF-β）、血小板源性生长

因子（platelet-derived growth factor ，PDGF ）、碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF /FGF-2）、胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）等。研究表明：b-FGF 能促进牙周膜细胞冠向生长，但是它们可以诱导胶原酶合成而减少胶原形成，这是否会影响牙周膜形

成目前尚不清楚。体外细胞培养研究表明，

TGF-β为最佳骨基质形成刺激因子，但它对牙周膜细胞无趋化功能，单有牙槽骨新生而不伴有牙周膜细胞冠向生长可能导致骨粘连。PDGF 对牙周膜成骨细胞和成纤维细胞有趋化活性，在骨细胞培养中能促进非胶原蛋白合成，而IGF-1能促进胶原合成，二者联合应用具有协同作用。可见单独的一种信号分子无法满足牙周组织再生。

PＲP是自体血通过离心分离浓缩的富含血小板的血浆。它来源于自身全血，具有无毒、无免疫原性、内含多种高浓度的生长因子、能促进牙周膜成纤维细胞

实用口腔医学杂志（J Pract Stomatol ）2015Nov ，31（6）的增殖、且PＲP内的生长因子的含量与年龄性别无

关

［7－8］

等优势而备受学者们的青睐。但是已知PＲP包括的生长因子有：PDGF 、TGF-β、血管内皮生长因子

（vascular endothelial growth factor ，VEGF ）等。但是PＲP的临床前研究所表现出的作用还不是很明确。就PＲP对骨组织再生的影响而言，不同的试验其结果也不尽相同，可能是受到实验条件、试剂、动物、或者其他

原因的影响

［9－10］

。尽管PＲP在试验中的作用并不明确，但确定的是PＲP不会产生相反的作用。因此需要在现有试验研究的基础上，优化试验方法，力求对PＲP的作用达成共识。相较于PＲP作用的不确定性，釉基质蛋白（enamel matrix protein ，EMP ）在临床前研究中所表现出的作用相对比较明确。EMP 能够诱导形成新的牙骨质，在形态结构和生物学功能上接近于正常牙周组织，并且在形成牙骨质与牙周组织黏附中起重要作用，因而被认为可以用来诱导牙周组织的再生［11］

。实验也表明EMPs 在治疗人工Ⅱ度根分叉病变中有显著促进再生的作用，而且可促进无细胞性牙

骨质的形成［12］

，

在现阶段的大动物实验研究中，更多的研究结果发现联合GTＲ与EMP ，对于牙槽骨和牙骨

质的形成可能存在促进作用

［13－14］

。牙周组织作为一种复杂的结构组织，

在修复其缺损过程中，不仅要促进牙骨质、牙槽骨等硬组织的再生，而且还要能够保证血管、牙周膜的再生。在这方面b-FGF 则表现出更好的作用。b-FGF 对于人体组织的再生和修复起了尤其重要的作用，主要表现在促进血

管组织的生成、诱导未分化的间充质细胞扩增［15］

。在相应的动物模型中也发现b-FGF 联合支架材料应用于牙周病损区域能够促进新的牙周组织的形成，并且

在该区域内也没有明显的牙根吸收［16］

。b-FGF 可促进损伤区域细胞的增殖，能够刺激间质细胞的多种生

物活性，有利于牙周组织再生［17］

。

除了上述的生物信号分子外，

还有许多促进牙周组织再生的生物信号分子也受到关注。例如生长分化

因子-5（growth /differentiationfactor-5，

GDF-5）在牙周组织再生中的作用主要表现在促进骨组织和牙周膜的

形成［18］。Kwon 等［19］

在动物模型上应用GDF-5后，

发现GDF-5对于牙周组织的再生是安全的，

并且能够修复牙周组织的损伤。现阶段研究中还利用重组的人类

骨形成蛋白（recombinant human BMP ，

rhBMP ）的成骨性治疗牙周病造成的骨内袋、根分叉病变、骨开窗、骨开裂等。结果发现rhBMP 对牙周硬组织的再生和恢

复有较强的促进作用［20］

。

在现阶段的研究中，

一些生长因子往往不能表现出理论上所具有的全部功能，因此必须在原有试验的

·857·

基础上发现可能影响试验结果的因素，比如：试验中样

本量不足，试验中生长因子的使用量不足等原因。另外，很多的动物实验往往是在最后获得组织学结果，而忽视了在整个过程中组织学变化。因此在现有基础上重新优化实验设计，获得可靠的资料，是未来试验研究的着重点。3．2临床研究

临床上牙周病患者的牙周组织微环境往往是一个炎性因子与微生物同时存在的复杂环境，这与动物模型中的牙周环境不同。生长因子可能在炎性因子的作用下失去活性，从而造成临床实验研究结果不理想。因此如何能够使生长因子在牙周组织再生过程中持续释放发挥作用，是当前生长因子在牙周组织再生研究中的重要研究方向。目前临床应用最多的是将生长因子与材料复合，但是这种复合还达不到真正缓释的目的，达不到临床所需要的治疗效果。况且牙周组织再生时所应用的生长因子大多只有1种或2种，而牙周组织的再生修复是一个复杂的过程，受多种因素的影响，需在多种因子联合调控下完成。因此，还需就生长因子间如何协同作用、生长因子的选择、如何配伍和选

用多大剂量等方面进行深入的研究［21］

。

尽管在临床前期的动物实验中很多的生长因子都表现出积极的促进作用。但是仅有EMP 一种生长因子实现商品化生产（Emdogain ），并应用于临床，其余的都处于临床研究阶段。临床应用Emdogain 时，操作类似于翻瓣术，只是在根面处理结束后，通过注射装置在根面涂抹Emdogain ，然后常规缝合软组织瓣，常规

术后维护［22］

。有文献报道，将EMP 联合应用GTＲ后能够减少术后并发症［23］

。对于那些存在支持结构的

骨内袋缺损，应用EMP 治疗的临床效果更明显［24］

。目前，

EMD 在牙周再生治疗中的临床应用研究主要集中于骨内缺损和根分叉病变的治疗方面。近年来有研究表明EMP 对因牙周炎造成的根面牙骨质缺损有一

定的修复作用［25］

。

生长因子在牙周组织再生的作用多是通过刺激细

胞生长活性而实现的，因此，

临床应用时往往将生长因子联合应用GTＲ或植骨术来提高临床疗效。Parimala 等［26］

将PＲP联合应用植骨术治疗牙周病患者，

发现临床症状有明显改善。此外Kitamura 等［27］

的临床试验结果发现b-FGF 联合应用GTＲ对于促进牙槽骨高度的恢复有明显的作用，但是并不能促进附着丧失的恢复。牙周组织的复杂结构及其在炎症状态下的复杂环境，决定了牙周组织再生的过程是依靠多种因素的相互协同作用共同完成的。研究还发现不同的生长因子联合应用时，相互之间的协同作用对牙周组织的再

·858·生有明显的促进作用［28－29］

。4干细胞治疗

4．1

临床前研究

传统的牙周治疗主要是机械去除炎症刺激，创建良好的修复微环境，但往往以上皮长结合方式愈合而不是形成新的组织。第一代、第二代的牙周再生治疗主要依赖于牙周组织缺损处剩余干细胞的量，因此，牙周组织再生在生物学上认为是可能的，但在临床上其结果具有不可预测性。干细胞的研究与应用是心血管疾病、糖尿病、神经系统疾病、肝脏疾病等重大疾病治疗和多种组织缺损（如骨、软骨、神经、血管、牙周组织缺损等）修复再生的新途径和新希望，是生命科学和医学研究领域国际关注的焦点。在干细胞研究如火如荼的今天，胚胎干细胞以其明显的再生能力和分化能力受到了研究人员的广泛关注，但是其来源使得研究人员不得不面对相应的伦理道德问题。在此条件下，成体干细胞因其来源简单，具有较强的自我更新能力

及分化能力成为干细胞治疗研究的未来发展方向［30］

。

目前，

在牙周组织再生研究中发现，多种来源的干细胞在体外及动物体内具有形成牙周组织的能力。主要包

括：骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem

cells ，BMMSCs ）、牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells ，PDLSCs ），牙髓干细胞（dental pulp stem cells ，DPSCs ），根尖乳头干细胞（stem cells from apical papilla ，SCAP ），牙囊干细胞（dental follicle progenitor cells ，DFCs ）等［31］。但是，牙周组织的愈合方式主要由重新植入牙根表面的细胞类型决定，从这方面考虑，PDLSCs 在促进牙周组织再生中可能更占有优势。有

研究表明，PDLSCs 较其他来源的干细胞能够再生出更多的牙周组织［32］

。除此之外，

一系列牙周组织再生的大动物研究，尤其是利用小型猪为模型的研究，不仅证明PDLSCs 与材料复合后能在牙周缺损处重建正常的组织结构，而且对牙周炎环境所致的组织缺损也能修复，表明PDLSCs 不仅能直接分化和产生基质参与组织再生，而且还可能通过调节炎症和再生微环境来完

成组织修复［33］

。最新的研究有学者将PDLSCs 制备成

膜片用于牙周组织构建［34］

，

并发现将异体PDLSCs 以膜片形式植于牙周缺损处能产生与自体PDLSCs 相同

的再生效果，不会受到宿主免疫系统的排斥，这与PDLSCs 本身几乎不表达Ⅱ型主要组织相容性抗原（major histocompatibility complex II ，MHC-II ）和一些

共刺激分子相关［35］

。因此，

在自体干细胞来源受到限制的情况下，基于异体PDLSCs 的牙周再生与组织重建将成为临床应用的重要模式。

实用口腔医学杂志（J Pract Stomatol ）2015Nov ，

31（6）4．2

临床研究

近年来，

MSC 在临床疾病的治疗应用主要利用其免疫调节功能。如通过移植MSC 治疗自身免疫性疾病－系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus ，SLE ）［36－37］。就MSC 的出色再生能力而言，临床前期的研究让我们有理由相信实现牙及牙周组织再生是有可能的。虽然目前仍然没有切实可行的安全、简易的

干细胞治疗可以为临床牙病患者服务［38］

。令人欣喜的是，国外已经有学者在着手这方面的临床研究，我国

也有利用干细胞治疗牙周病的临床尝试。2009年，

D＇Aquino 等［39］将DPC /胶原海绵复合体植入临床因拔除阻生第三磨牙造成的第二磨牙远中大面积骨缺损处，术后一年发现该缺损处不仅再生出一定高度的牙槽骨，第二磨牙远中遭破坏的牙周组织也得到了恢复。该结果表明DPC 可以被用来修复和再生组织和器官。Feng 等［40］率先将PDLSCs ，牙周膜前体细胞，应用于因牙周病引起骨内缺损的3名患者中，术后32 72个月

的观察结果发现移植的干细胞并没有对牙周组织的再生产生不良影响，影像学显示牙槽骨较术前有明显的再生，且探诊深度、附着水平、牙龈退缩等临床指标均有明显改善。由此推测牙周膜干细胞的移植对于牙周

病的治疗可能是安全有效的。McGuire 等［41］

为恢复牙乳头的高度，将患者自体牙龈成纤维细胞（gingival fi-broblast cells ，GFCs ）多次注射到预处理的牙龈乳头处，结果显示：只在组织愈合的前2个月有较明显效果，但不能完全恢复初始高度。因此，一些学者认为，此方法虽然简便、创伤小，但只能促进少量牙龈缺损的修复，尚存在一定的缺陷：①由于液体的流动性，注射后细胞悬液的大小、形状和在组织中的分布难以控制；②细胞注射液不能提供一定的机械支持力；③细胞液注射后常呈岛形聚集，与受体组织间的黏附性差，不利于细胞生长和发挥功能；细胞迁移进入毛细血管可能

导致毛细血管栓塞，影响局部血供［42］

。随着细胞膜片技术的发展，干细胞的移植方式也由局部注射、细胞与支架复合发展到细胞膜片移植及细胞膜片与支架联合移植的方式，既提高了细胞利用率，也进一步拓展了细胞的应用范围。如细胞膜片技术已经应用于皮肤、角膜、心脏、骨组织及牙周组织等再生医学的研究，其中通过细胞膜片技术获取的角膜缘上皮细胞及自体口腔

黏膜细胞膜片已成功应用于临床进行眼表重建［43］

。5

前景与展望

长期以来，人们进行了大量研究，努力寻求一种理想方法，尽可能最佳修复病损的牙周组织。继GTＲ之后，将组织工程技术运用于牙周再生成为目前牙周病

实用口腔医学杂志（J Pract Stomatol ）2015Nov ，31（6）学研究的新领域。尽管组织工程技术治疗牙周缺损的

修复、再生有着巨大的潜力和广阔的前景，但仍有许多问题亟待解决。纯化种子细胞，寻求种子细胞的多种来源途径，获取理想的基质材料，完善牙周组织工程动物实验模型等是今后研究的重点。生长因子与支架材料的联合应用也是未来研究牙周组织再生的一个重要方向，寻找与某种生长因子相适应的生物支架材料对牙周组织再生有重要意义。同时需要多学科、跨专业的技术联合与协作，才能最终实现由基础实验到临床应用的转变这一目标。

随着基因工程技术的发展，基因治疗受到学者们越来越多的关注，具有广阔的应用前景，对于牙周组织的再生修复，基因治疗可以使具有治疗作用的基因产物在局部靶向释放，减少全身的毒副作用，增强局部治疗效果，最大限度的实现牙周组织的再生。目前相关的技术研究仍处于基础实验研究阶段，尚未形成一套成熟有效的治疗程序；找到一种简便经济有效的治疗方法，使基因治疗成为牙周常规系统治疗的一部分将是牙周再生治疗领域一个革命性的进展。

参考文献

1］Behring J ，Junker Ｒ，Walboomers XF ，et al．Toward guided

tissue and bone regeneration ：Morphology ，attachment ，pro-liferation ，and migration of cells cultured on collagen barrier membranes．A systematic review ［J ］．Odontology ，2008，96（1）：1－11．

2］Taheri M ，Molla Ｒ，ＲadvarM ，et al．An evaluation of bo-vine derived xenograft with and without a bioabsorbable col-lagen membrane in the treatment of mandibular Class II fur-cation defects ［J ］．Aust Dent J ，2009，54（3）：220－227．3］杨泓，姜毅，林南雁．应用骨引导组织再生术联合骨粉

治疗老年牙周病患者骨内缺损的观察［J ］．中华老年医学杂志，

2008，27（10）：756－758．4］Vouros I ，Aristodimou E ，Konstantinidis A．Guided tissue

regeneration in intrabony periodontal defects following treat-ment with two bioabsorbable membranes in combination with bovine bone mineral graft．A clinical and radiographic study ［J ］．J Clin Periodontol ，2004，31（10）：908－917．

5］Keles GC ，Sumer M ，Cetinkaya BO ，et al．Effect of autoge-nous cortical bone grafting in conjunction with guided tissue regeneration in the treatment of intraosseous periodontal de-fects ［J ］．Eur J Dent ，2010，4（4）：403－411．6］

Hammarstrom L．Enamel matrix ，cementum development and regeneration ［J ］．J Clin Periodontol ，1997，24（9Pt 2）：658－668．

·859·

［7］詹暶，闫福华．富血小板血浆与牙周组织再生［

J ］．口腔医学研究，

2004，20（6）：658－659．［8］安莹，陈发明，金岩．生长因子与牙周组织再生［

J ］．牙体牙髓牙周病学杂志，

2011，21（11）：657－663．［9］Messora MＲ，Nagata MJ ，Pola NM ，et al．Effect of platelet-rich plasma on bone healing of fresh frozen bone allograft in mandibular defects ：A histomorphometric study in dogs ［J ］．Clin Oral Implants Ｒes，2013，24（12）：1347－1353．［10］Carvalho MD ，Suaid FF ，Santamaria MP ，et al．Platelet-rich plasma plus bioactive glass in the treatment of intra-bony defects ：A study in dogs ［J ］．J Appl Oral Sci ，2011，19（1）：82－89．

［11］Sakallioglu U ，Acikgoz G ，Ayas B ，et al．Healing of perio-dontal defects treated with enamel matrix proteins and root surface conditioning ———An experimental study in dogs ［J ］．Biomaterials ，2004，25（10）：1831－1840．

［12］张丽青，吴织芬，储庆，等．釉基质蛋白治疗人工Ⅱ度根

分叉区组织缺损的动物实验研究［J ］．牙体牙髓牙周病学杂志，

2003，13（10）：565－568．［13］Fujita T ，Yamamoto S ，Ota M ，et al．Coverage of gingival

recession defects using guided tissue regeneration with and without adjunctive enamel matrix derivative in a dog model ［J ］．Int J Periodontics ＲestorativeDent ，2011，31（3）：247－253．

［14］Birang Ｒ，Abouei MS ，ＲazaviSM ，et al．The effect of an

enamel matrix derivative （Emdogain ）combined with bone ceramic on bone formation in mandibular defects ：a histo-morphometric and immunohistochemical study in the canine ［J ］．Scientific World Journal ，2012，2012：196791．［15］Powers CJ ，Mcleskey SW ，Wellstein A．Fibroblast growth

factors ，their receptors and signaling ［J ］．Endocr ＲelatCancer ，2000，7（3）：165－197．

［16］Ishii Y ，Fujita T ，Okubo N ，et al．Effect of basic fibroblast

growth factor （FGF-2）in combination with beta tricalcium phosphate on root coverage in dog ［J ］．Acta Odontol Scand ，2013，71（2）：325－332．

［17］杨丕山，孙钦峰，宋爱梅，等．碱性成纤维细胞生长因子

对犬牙周成纤维细胞样细胞增殖影响的体内研究［J ］．华西口腔医学杂志，

2004，22（1）：59－61．［18］Moore YＲ，Dickinson DP ，Wikesjo UM．Growth /differenti-ation factor-5：A candidate therapeutic agent for periodontal regeneration ？A review of pre-clinical data ［J ］．J Clin Peri-odontol ，2010，37（3）：288－298．

［19］Kwon HＲ，Wikesjo UM ，Park JC ，et al．Growth /differenti-ation factor-5significantly enhances periodontal wound heal-

［［［［［［

·860·

ing /regenerationcompared with platelet-derived growth fac-tor-BB in dogs ［J ］．J Clin Periodontol ，2010，37（8）：739－746．

［20］ＲotenbergSA ，Tatakis DN．Ｒecombinanthuman bone mor-phogenetic protein-2for peri-implant bone regeneration ：A case report ［J ］．J Periodontol ，2011，82（8）：1212－1218．

［21］Howell TH ，Martuscelli G ，Oringer J．Polypeptide growth

factors for periodontal regeneration ［J ］．Curr Opin Periodon-tol ，1996，3：149－156．

［22］Sculean A ，Kiss A ，Miliauskaite A ，et al．Ten-year results

following treatment of intra-bony defects with enamel matrix proteins and guided tissue regeneration ［J ］．J Clin Period-ontol ，2008，35（9）：817－824．

［23］Esposito M ，Grusovin MG ，Papanikolaou N ，et al．Enamel

matrix derivative （Emdogain （Ｒ））for periodontal tissue re-generation in intrabony defects ［J ］．Cochrane Database Syst Ｒev，2009，（4）：CD003875．

［24］ＲatheF ，Junker Ｒ，Chesnutt BM ，et al．The effect of en-amel matrix derivative （Emdogain ）on bone formation ：A systematic review ［J ］．Tissue Eng Part B Ｒev，2009，15（3）：215－224．

［25］Schmidlin PＲ．ＲegenerativeTreatment of a Cemental Tear

Using Enamel Matrix Derivatives ：A Ten-Year Follow-up ［J ］．Open Dent J ，2012，6：148－152．

［26］Parimala M ，Mehta DS．Comparative evaluation of bovine

porous bone mineral ［J ］．J Indian Soc Periodontol ，2010，14（2）：126－131．

［27］Kitamura M ，Akamatsu M ，Machigashira M ，et al．FGF-2

stimulates periodontal regeneration ：Ｒesultsof a multi-cen-ter randomized clinical trial ［J ］．J Dent Ｒes，2011，90（1）：35－40．

［28］Oates TW ，ＲouseCA ，Cochran DL．Mitogenic effects of

growth factors on human periodontal ligament cells in vitro ［J ］．J Periodontol ，1993，64（2）：142－148．

［29］Dennison DK ，Vallone DＲ，Pinero GJ ，et al．Differential

effect of TGF-beta 1and PDGF on proliferation of periodon-tal ligament cells and gingival fibroblasts ［J ］．J Periodontol ，1994，65（7）：641－648．

［30］Hynes K ，Menicanin D ，Gronthos S ，et al．Clinical utility

of stem cells for periodontal regeneration ［J ］．Periodontol 2000，2012，59（1）：203－227．

［31］Chen FM ，Sun HH ，Lu H ，et al．Stem cell-delivery thera-peutics for periodontal tissue regeneration ［J ］．Biomaterials ，2012，33（27）：6320－6344．

［32］Park JY ，Jeon SH ，Choung PH．Efficacy of periodontal

实用口腔医学杂志（J Pract Stomatol ）2015Nov ，31（6）stem cell transplantation in the treatment of advanced peri-odontitis ［J ］．Cell Transplant ，2011，20（2）：271－285．

［33］Liu Y ，Zheng Y ，Ding G ，et al．Periodontal ligament stem

cell-mediated treatment for periodontitis in miniature swine ［J ］．Stem Cells ，2008，26（4）：1065－1073．

［34］Yang Z ，Jin F ，Zhang X ，et al．Tissue engineering of ce-mentum /periodontal-ligamentcomplex using a novel three-dimensional pellet cultivation system for human periodontal ligament stem cells ［J ］．Tissue Eng Part C Methods ，2009，15（4）：571－581．

［35］Ding G ，Liu Y ，Wang W ，et al．Allogeneic periodontal lig-ament stem cell therapy for periodontitis in swine ［J ］．Stem Cells ，2010，28（10）：1829－1838．

［36］Sun L ，Akiyama K ，Zhang H ，et al．Mesenchymal stem cell

transplantation reverses multiorgan dysfunction in systemic lupus erythematosus mice and humans ［J ］．Stem Cells ，2009，27（6）：1421－1432．

［37］Sun L ，Wang D ，Liang J ，et al．Umbilical cord mesenchy-mal stem cell transplantation in severe and refractory system-ic lupus erythematosus ［J ］．Arthritis Ｒheum，2010，62（8）：2467－2475．

［38］Volponi AA ，Pang Y ，Sharpe PT．Stem cell-based biologi-cal tooth repair and regeneration ［J ］．Trends Cell Biol ，2010，20（12）：715－722．

［39］D＇A quino Ｒ，De ＲosaA ，Lanza V ，et al．Human mandible

bone defect repair by the grafting of dental pulp stem /pro-genitor cells and collagen sponge biocomplexes ［J ］．Eur Cell Mater ，2009，18：75－83．

［40］Feng F ，Akiyama K ，Liu Y ，et al．Utility of PDL progeni-tors for in vivo tissue regeneration ：A report of 3cases ［J ］．Oral Dis ，2010，16（1）：20－28．

［41］McGuire MK ，Scheyer ET．A randomized ，double-blind ，

placebo-controlled study to determine the safety and efficacy of cultured and expanded autologous fibroblast injections for the treatment of interdental papillary insufficiency associated with the papilla priming procedure ［J ］．J Periodontol ，2007，78（1）：4－17．

［42］Yamato M ，Akiyama Y ，Kobayashi J ，et al．Temperature-responsive cell culture surfaces for regenerative medicine with cellsheet engineering ［J ］．Prog Polym Sci ，2007，32（8－9）：1123－1133．

［43］Elloumi-Hannachi I ，Yamato M ，Okano T．Cell sheet engi-neering ：A unique nanotechnology for scaffold-free tissue re-construction with clinical applications in regenerative medi-cine ［J ］．J Intern Med ，2010，267（1）：54－70．

（收稿：2015-03-15

修回：2015-

06-04）