鲎试验测定丹参注射液中的细菌内毒素
鲎试验测定丹参注射液中的细菌内毒素
【摘要】目的：检测丹参注射液中的细菌内毒素。方法：供试品干扰试验后，采用凝胶鲎试验对样品中的细菌内毒素进行检测。结果：3批丹参注射液稀释至60倍时对细菌内毒素的检测无干扰作用，所测样品的细菌内毒素含量均小于15 EU·ml-1。结论：所建立方法检查丹参注射液中的细菌内毒素可行。
【关键词】丹参注射液；细菌内毒素；鲎试验；干扰试验
输液导致热原超标是输液反应的主要原因[1]，近年来，采用细菌内毒素检查法代替家兔热原法检查药品、生物制品的致热物质越来越普遍。丹参注射液临床常用于冠心病胸闷，心绞痛等患者。《中国药典》2005年版尚未收载该品种。我们对3批样品进行了细菌内毒素的检测，以考察该方法的可行性。
1 实验部分
1.1 药品与试剂：丹参注射液（四川三精升和制药有限公司， 10ml/支，批号：050303，060503，060505），细菌内毒素标准品（中国药品生物制品检定所，批号：2004-2），细菌内毒素检查用水（湛江海洋生物制品厂出品，批号：060306），鲎试剂（湛江安度斯生物制品有限公司，λ=0.125 EU· ml -1，批号：0509160），鲎试剂（湛江博康海洋生物有限公司，λ=0.125 EU·ml-1，批号： 0607061）。
1.2 方法与结果
1.2.1 鲎试剂灵敏度（λ）的复核：照《中国药典》[2]附录规定的方法，对实验所用的鲎试剂（TAL ）进行灵敏度复核。结果鲎试剂的实测灵敏度均在0.5～2.0λ之间，符合规定。正式实验时取λ作为鲎试剂的灵敏度。
1.2.2 样品细菌内毒素限值（L ）的确定：参照《中国药典》确定样品的细菌内毒素限值（L ），L=K·M-1，K 为人用每千克体重每小时最大可接受的细菌内毒素剂量，非放射性药品静脉途径给药时K 值为5 EU·kg-1·h-1，M 为人用每千克体重每小时给药最大剂量。丹参注射液成人最大剂量为20 ml·kg-1·h-1。综合生产、临床用药和检验的实际情况，将丹参注射液L 值定为15 EU·ml-1。
1.2.3 样品的干扰试验：用λ=0.125 EU·ml-1鲎试剂进行干扰试验时，对应样品的最大有效稀释倍数不能高于120倍。取1.2.1项下鲎试剂，分别对1批已检测细菌内毒素不超标的样品进行30倍、60倍和120倍稀释（批号：050303），进行细菌内毒素干扰试验。样品在所述3种浓度下，对细菌内毒素检查均无干扰，