聚六亚甲基双胍复方消毒剂杀菌性能试验观察
中国卫生检验杂志2007年8月第17卷第8期 Ch i n e s e J o u r n a l o f H e a l t hL a b o r a t o r y T e c h n o l o g y , A u g 2007; V o l 17 No 81499
【卫生与消毒】
聚六亚甲基双胍复方消毒剂杀菌性能试验观察
崔玉杰, 张春长, 陈素良, 韩艳淑, 孙克勤
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(1. 河北省疾病预防控制中心, 石家庄 051021; 2. 河北省荣军医院, 河北保定 071000)
[摘要] 目的:聚六亚甲基双胍复方消毒剂是以盐酸聚六亚甲基双胍为主要成分的消毒剂, 为了解其杀菌效果进行了试验观察。方法:采用悬液定量杀菌试验、模拟现场消毒试验、现场消毒试验和金属腐蚀性试验对其杀灭微生物效果和对
金属的腐蚀性进行了测试。结果:在悬液定量杀菌试验中, 聚六亚甲基双胍复方消毒剂含500m g /L盐酸聚六亚甲基双胍的稀释液, 作用1. 0m i n , 对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌杀灭对数值均达5. 00以上; 对白色念珠菌的杀灭对数值大于4. 00。该药含杀菌作用随消毒剂浓度增加、作用时间的延长而增强。以棉签蘸原药液擦拭消毒作用3m i n , 对受试者手和皮肤上自然菌的平均杀灭对数值分别为1. 40、1. 18, 残留菌数均≤5c f u /cm 2。以其原液擦拭消毒木质表面, 作用30m i n , 可使表面自然菌的平均对数值下降1. 99; 用其原液浸泡黄瓜, 作用30m i n , 可使表面污染的大肠杆菌对数值下降3. 35。结论:该药对细菌繁殖体和酵母菌有良好的杀灭作用, 对不锈钢、铝、铜、碳钢均无腐蚀。可用于手、皮肤、金属物体表面及瓜果蔬菜的消毒。
[关键词] 盐酸聚六亚甲基双胍; 杀灭对数值; 杀菌作用[中图分类号] R187. 2 [文献标识码] B [文章编号] 1004-8685(2007) 08-1499-03
E x p e r i m e n t a l o b s e r v a t i o no ng e r m i c i d a l e f f i c a c yo f p o l y h e x a m t h y l e n e -d e r i v a t i v e s c o m -p o u n d d i s i n f e c t i o ns o l u a t i o n
12111C u i Y u -j i e , Z h a n gC h u n -c h a n g , C h e n S u -l i a n g , H a n Y a n -s h u , S u n K e -q i n
(1. H e b e i C e n t e r f o r D i s e a s e C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n , S h i j i a z h u a n g 051021, C h i n a ; 2. H e i b e i R o n g j u nH o s p i t a l , B a o d i n g 071000, C h i n a ) [A b s t r a c t ] Ob j e c t i v e :T h e i n g r e d i e n t o f P o l y h e x a m t h y l e n e -d e r i v a t i v e sc o m p o u n dd i s i n f e c t i o ns o l u t i o ni sp o l y h e x a m t h y l e n e g u a n i d i n eh y d r o c h l o r i d e . I n o r d e r t o k n o wi t s g e r m i c i d a l e f f i c a c y a n dc o r r o s i v e n e s s . Me t h o d s :G e r m i c i d a l t e s t a n d m e t a l c o r r o s i o n t e s t w a s c a r r i e do u t . R e s u l t s :T h e a v e r a g e k i l l i n g l o gv a l u e o f S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s , P s e u d o m o n a s a e r u g i n o s aa n d E s h e r i c h i ac o l i e x p o s e d t o t h e s o l u t i o nc o n t a i n i n g 500m g /Lpo l y h e x a m t h y l e n e -d e r i v a t i v e s f o r 1m i nw a s >5. 00, t h a t o f C a n d i d a a l b i c a n s w a s >4. 00, t h a t o f Wi p i n g t h e n a t u r a l b a c t e r i a o n h a n d s a n d s k i n w i t h 625m g /Lpo l y h e x a m t h y l e n e -d e r i v a t i v e s f o r 3m i nw a s 1. 40, 1. 18. T h a t o f w o o d e nt a b l e s u r f a c e f o r 30m i nw a s 1. 99. D i s i n f e c t i o no f c u c u m b e r c o n t a m i n a t e d b y a r t i f i c i a l b a c t e r i a w i t h t h e s o l u -t i o nc o n t a i n i n g 625m g /Lpo l y h e x a m t h y l e n e -d e r i v a t i v e s f o r 30m i nw a s 3. 35. T h i s d i s i n f e c t i o ns o l u t i o nh a s n oc o r r o s i v e n e s s t o m e n t a l . I t s m o u s e o r a l L D 50w a s>5000m g /kg ·b wa n d t h e a v e r a g e s k i n i r r i t a t i o n s c o r e w a s 0. I t s m o u s e a c c u m u l a t i o n c o e f f i c i e n t Kw a s >5. C o n c l u s i o n :T h i s c o m p o u n d d i s i n f e c t h a s g o o d e f f i c a c y i nk i l l i n g v e g e t a t i v e f o r m s o f b a c t e r i a a n d y e a s t s , n o c o r r o s i v e -n e s s a n d w e a k c u m u l a t i v e t o x i c i t y , a n di s a c t u a l l y n o n -t o x i c a n d n o n i r r i t a t i v e t o s k i n , s o i t c a nb e u s e d f o r d i s i n f e c t i o no f h a n d a n d m e m b r a n e . [K e yw o r d s ] Po l y h e x a m t h y l e n e g u a n i d i n e -d e r i v a t i v e s ; G e r m i c i d a l e f f i c c a c y ; K i l l i n g l o g v a l u e ; C o r r o s i v e n e s s 聚六亚甲基双胍复方消毒剂主要成分为盐酸聚六亚甲基双胍和醋酸氯己定, 含量为625和1250m g /L, 是一种无色透明液体, p H 值为4. 50。为了解该复方消毒剂的杀菌效果和金属腐蚀性, 在试验室进行了试验观察。现将结果报告如下:1 方法
1. 1 金属腐蚀性试验
将直径24. 0m m 、厚1. 0m m 、光洁度为6的碳钢、铜、铝、
[作者简介] 崔玉杰(1967-) , 女, 学士, 副主任医师, 主要从事
消毒学检验工作。
不锈钢圆片, 作洁净处理后干燥称重。实验时, 每种金属取3
片, 每种金属片一个容器, 用聚六亚甲基双胍复方消毒剂消毒液连续浸泡72h 。洁净处理干燥后, 分别称金属片质量, 取3片平均值计算腐蚀速率。1. 2 试验用菌悬液的制备
将金黄色葡萄球菌(A T C C 6538) 、大肠杆菌8099、铜绿假单胞菌(A T C C 15442) 和白色念珠菌(A T C C 10231) 24h 新鲜斜面培养用稀释液洗下并稀释成菌悬液, 与3%小牛血清白蛋白溶液作对倍稀释, 制成试验用菌悬液。1. 3 中和剂选择试验
葡萄球和珠菌。试验设6组
1500中国卫生检验杂志2007年8月第17卷第8期 Ch i n e s eJ o u r n a l o f H e a l t hL a b o r a t o r y T e c h n o l o g y , A u g 2007; V o l 17 No 8
(表1) 。第1组无菌生长或菌数远少于第2组, 第2组菌数超过50c f u /ml 时, 第3、4、5组组间菌数相差不超过15%,第6
组无菌生长, 表明所选中和剂及其浓度适宜[1]。
1. 4 悬液定量杀菌试验
试验时, 用无菌硬水配制待测浓度1. 25倍的消毒液。将3%牛血清白蛋白加入菌液, 使菌悬液中白蛋白的体积百分比为50%,将1m l 菌液加入4m l 消毒液中, 作为试验组, 以稀释液代替消毒液, 加入菌悬液, 作为阳性对照, 作用一定时间取样, 中和, 接种平皿, 培养, 计数菌落, 计算杀灭对数值。1. 5 皮肤消毒现场
试验消毒前, 让受试者将左右前臂内侧中段相互充分对搓后, 将规格板放于受试者左前臂内侧中段表面, 用无菌棉拭在含10m l 稀释液试管中浸湿, 于管壁上挤干后, 在规格板框定的区域内, 横向往返涂擦3遍, 纵向往返涂擦10遍, 每涂擦一遍, 将棉拭转动一次。采样后, 以无菌操作方式将棉拭采样端剪入采样液试管内, 振打200次, 用稀释液作适当稀释, 取适宜稀释度作为阳性对照组样本。用无菌棉签蘸消毒剂原液对右前臂内侧进行擦拭消毒, 作用时间为3m i n 。消毒后用中和剂代替稀释液, 与阳性对照组同样的方法对受试者右前臂内侧表面残留的自然菌采样一次, 作为实验组样本。将未用过的同批采样液、稀释液、棉拭1份～2份作为阴性对照组样本。取实验组、阳性对照组和阴性对照组样本各1. 0m l , 作活菌计数, 计算杀灭对数值。
1. 6 手消毒现场试验
吸取10m l 中和剂分装于试管内, 将无菌棉拭在试管内中和剂中浸湿, 在30名受试者左手手指曲面从指间到指根往返涂擦2遍, 将棉拭剪入装有中和剂的试管中, 作为未消毒对照组。然后, 无菌棉签蘸消毒剂原液, 擦拭消毒右手, 作用3m i n , 对右手同法涂抹采样, 作为试验组。中和作用10, 振打试管以洗脱细菌并混匀。将未用过的同批采样液、稀释液、棉拭1份～2份作为阴性对照组样本。取实验组、阳性对照组和阴性对照组样本各1. 0m l , 作活菌计数, 计算杀灭对数值。1. 7 物体表面现场消毒试验无菌棉签蘸消毒剂原液擦拭消毒木质表面, 作用30m i n , 于消毒前、后分别用棉拭在预定采样区涂抹5c m×5c m 面积采样。将采样后棉拭投入含中和剂的试管中, 敲打试管以洗脱棉拭上的菌, 取洗脱液作活菌计数, 计算杀灭对数值。同时, 取未用过的同批次中和剂、稀释液、标准硬水作为阴性对照组样本。1. 8 瓜果蔬菜模拟现场消毒试验
首选粗细均匀的新鲜黄瓜, 试验前标出染菌区, 取中间段长度为5c m×5c m 作为染菌区。清洗去除黄瓜表面污渍, 用无菌纱布擦干。取大肠杆菌8099菌悬液0. 2m l 滴加于染菌区, 涂匀, 干燥作为实验样本。每件试验样本配制400m l 试验浓度消毒液。将试验样本完全浸没于消毒剂中。浸泡30m i n , 将试验样本轻轻取出, 弃掉消毒剂, 用醮有中和剂的无菌棉拭分别在试验样本染菌区涂抹法采样, 以无菌操作方式将棉拭棉花端剪入含有5m l 中和剂的试管中, 振打200次, 作用10m i n , 作为实验组样本。将实验样本放入标准硬水中, 作为阳性对照组样本。取未用过的同批次中和剂、稀释液、标准硬水作为阴性对照组样本。分别取实验组、阳性对照组和, 2 结果
2. 1 腐蚀性结果
聚六亚甲基双胍复方消毒剂连续浸泡72h , 对碳钢、铜、铝、不锈钢片的腐蚀速率分别为0. 0032m m/a、0. 0015m m /a、0. 0046m m /a、0. 0000m m /a, 对4种金属均无腐蚀性。2. 2 中和剂试验结果
试验表明, D I F C O 中和肉汤(6g /L硫代硫酸钠、2. 5g /L亚硫酸钠、7g /L卵磷脂、5g /L吐温) 可有效中和试验浓度的消毒剂, 均达到所定要求(表1) 。
表1 聚六亚甲基双胍复方消毒剂中和试验结果
平均菌数(c f u /ml )
组别
金黄色葡萄球菌
消毒剂+菌液
(消毒剂+菌液)+中和剂中和剂+菌液
(消毒剂+中和剂)+菌液正常菌对照阴性对照
[***********]30000000
白色念珠菌[***********]00000
试验温度为20℃±2℃,以含盐酸聚六亚甲基双胍500m g /L的稀释液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌分别作用1m i n , 加中和剂后作用10m i n 。结果为三次试验的平均值。
2. 3 杀菌效果
试验表明, 该消毒剂含盐酸聚六亚甲基双胍500m g /L稀释液分别作用1m i n , 对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌的杀灭对数值均>5. 00; 对白色念珠菌的杀灭对数值均>4. 00; 含盐酸聚六亚甲基双胍250m g /L的稀释液作用3m i n , 对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌的杀灭对数值均>5. 00(表2) 。
表2 聚六亚甲基双胍复方消毒剂对微生物的杀灭效果聚六亚甲基双胍含量
(m g /L)
作用不同时间(m i n ) 杀灭对数值1
3
金黄色葡萄球菌
500250
6. 443. 83
7. 445. 56铜绿假单胞菌
500250
5. 442. 56
6. 215. 28大肠杆菌
500250
5. 282. 33
5. 785. 09白色念珠菌
500
4. 06
5. 32
5. 807. 155. 557. 366. 587. 446. 835
试验温度为20℃～21℃,金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌阳性对照组平均菌数的对数值分别为7. 44、7. 50、76, 。
中国卫生检验杂志2007年8月第17卷第8期 Ch i n e s e J o u r n a l o f H e a l t hL a b o r a t o r y T e c h n o l o g y , A u g 2007; V o l 17 No 81501
2. 4 手现场消毒试验结果
该消毒剂原药液(625m g /L盐酸聚六亚甲基双胍) 5m l 搓擦消毒3m i n , 对30名受试者手上自然菌的平均杀灭对数值为1. 40(1. 15～2. 23) ; 残留菌数均≤5c f u /cm 2。2. 5 皮肤现场消毒试验结果
该消毒剂原药液擦拭消毒3m i n , 对30名受试者前臂内侧皮肤上自然菌的平均杀灭对数值为1. 18(1. 10～2. 25) 。2. 6 物体表面现场消毒试验
该消毒剂原液擦拭消毒木质表面, 作用30m i n , 可使表面自然菌的平均对数值下降1. 99(0. 87～2. 52) 。2. 7 瓜果蔬菜浸泡消毒试验
以该消毒剂原液浸泡消毒黄瓜, 作用30m i n , 可使其表面污染的大肠杆菌对数值下降3. 35(3. 10～5. 20) 。3 小结
聚六亚甲基双胍复方消毒剂是一种新型的消毒剂, 主要成分为盐酸聚六亚甲基双胍, 盐酸聚六亚甲基双胍中的甲基胍具有很高的活性, 容易被细菌、病毒所吸附, 使细菌病毒丧失繁殖能力, 而且聚合物的形成堵塞了微生物的呼吸通道, 使微生物窒息而死。同时, 其高分子聚合物结构使胍基的有效活性得以提高, 使其杀菌效力大大高于其它胍类, 而且细菌不易产生耐药性[3]。在悬液定量杀菌试验中, 聚六亚甲基双胍复方消毒剂含500m g /L盐酸聚六亚甲基双胍的稀释液, 作用1. 0m i n , 对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆
菌杀灭对数值均达5. 00以上; 对白色念珠菌的杀灭对数值大于4. 00。用棉签蘸原药液消毒作用3m i n , 对受试者手和
皮肤上自然菌的平均杀灭对数值分别为1. 40、1. 18, 残留菌
2数均≤5c f u /cm 。以其原液擦拭消毒木质表面, 作用30m i n , 可使表面自然菌的平均对数值下降1. 99; 用其原液
浸泡黄瓜, 作用30m i n , 可使表面污染的大肠杆菌对数值下降3. 35。该药对细菌繁殖体和酵母菌有良好的杀灭作用, 对不锈钢、铝、铜、碳钢均无腐蚀。可用于手、皮肤、金属物体表面及瓜果蔬菜的消毒。此结果与报道不同[2, 4, 5], 可能与配方不同、试验方法不同有关。聚六亚甲基双胍复方消毒剂有效使用浓度低, 稳定性好, 无刺激, 无致突变作用, 有弱蓄积毒性, 对金属无腐蚀性, 不易产生耐药性, 是一种较好的消毒剂。
[参考文献]
[1]崔玉杰, 董辉, 张俊钢, 等. 氯化三胺甘氨酸复方消毒剂杀菌效果
及毒性试验观察[J ].中国消毒学杂志, 2003, 20(3) :163. [2]消毒技术规范[S ].2002. 21-23.
[3]薛广波. 医院消毒新方法[J ]. 中国消毒学杂志, 2004, 21(1) :57. [4]陈璐, 赵克义, 袁青春, 等. 一种即时净手液性能的试验观察[J ].
中国消毒学杂志, 2004, 21(3) :208.
[5]张玮, 史小滨, 孙燕晓, 等. 克大克消毒液杀菌效果与毒理学研究
[J ].中国消毒学杂志, 2006, 23(1) :4.
(收稿日期:2007-04-09)
(上接第1396页)
适应军团菌生存的温度, 玻璃缸壁生物膜内的军团菌菌落数
始终维持在一个相对比较稳定的水平, 说明生物膜为军团菌生长繁殖提供了一个良好的越冬和营养环境。生物膜内含有丰富的矿物质、有机物、军团菌死亡后附着在膜上形成的蛋白质及其他原虫等各种微生物, 都为军团菌躲避寒冷及进入休眠提供了良好营养物质和越冬环境。一旦气温和水温回升, 外环境恢复到适合军团菌生长繁殖的环境, 躲藏在生物膜内的军团菌将从生物膜内迁出, 继续在中央空调冷却水中生长繁殖, 实现其生长繁殖的另一个周期。
先前一些研究报道认为军团菌在水温下降到20℃以下时, 中央空调冷却水中的军团菌将处于休眠状态, 但从去除生物膜的模拟水样来看, 当军团菌失去生物膜等微小环境的保护, 当水温下降到在通常情况下不适合军团菌生长繁殖的温度, 即使模拟水样的温度恢复到适合军团菌生长繁殖的环境, 也无法再从模拟水样中检测出军团菌, 说明军团菌在低温下在没有生物膜等微小环境的保护下, 可能不是处于休眠状态而是失活状态[4]。但在有生物膜的模拟水样实验研究中发现, 模拟水样中军团菌菌落数在低温过后仍然会回升, 仍然会检测到一定数量的军团菌, 其主要是由于一部分军团菌在低温下潜藏到附着在塔周壁生物膜内。生物膜不但为军团菌生长繁殖提供过冬场所, 而且军团菌还可以从生物膜内获取营养、能量, 使军团菌不会失去活性, 而是处于休眠状态, 从而躲避环境低温的影响。
此外, 目前所使用的大部分消毒剂之所以不能持久有效水内的军团菌能其一是当消毒剂作用于中央空调冷却水中的军团菌时, 尽管一部分军团菌被消毒剂杀死, 但另一部分军团菌会渗透躲避到冷却塔壁上的生物膜内, 冷却塔壁上的生物膜形成一个能抵挡消毒剂的保护外衣, 使消毒剂无法达到生物膜内的军团菌消毒有效浓度, 军团菌从而躲避消毒剂的消毒作用。因此, 当前制定军团菌消毒控制措施的关键不仅在于定期对冷却塔水进行消毒, 还要在不使用中央空调时将冷却塔清扫干净, 尤其是塔壁上生物膜, 并将塔内冷却水排干, 彻底破坏军团菌赖以生存的微小生境。
[参考文献]
[1]世界卫生组织媒体中心实况报道, 2005:2(285) h t t p ://ww w . w h o .
i n t /me d i a c e n t r e /fa c t s h e e t s .
[2]林海江, 郭奕芳, 陈悦. 军团杆菌的预防控制方法研究进展[J ].
中国消毒学杂志, 2005, 22(2) :219-221.
[3]F i e l d sB . T h em o l e c u l a r e c o l o g yo f l e g i o n e l l a [J ]. T r e n d sM i c r o b i o l ,
1996, (4) :286-290.
[4]郭常义, 苏瑾, 阮素云, 等. 空调冷却水军团菌微生态环境与繁殖
传播研究[J ].中国公共卫生, 2004, 20(5) :546-549.
[5]北京预防医学会. 新发传染病的预防与控制[M ]. 北京:中国协
和医科大学出版社, 2002. 111-129.
[6]彭晓雯. 军团病新发传染病的预防与控制[M ]. 第7章. 北京:
协和医科大学出版社, 2002. 111-132.
[7]G i l b e r t G r e u b , D i d i e rR a o u l t . p a r a c h l a m y d i a c e a e :p o t e n t i a l e m e r g i n g
p a t h o g e n s [J ]. E m e r g i n g I n f e c t D i s , 2002, 8(8) :625-630.
:2007)