胃蛋白酶原1 Microsoft Word 文档
胃蛋白酶原Ⅰ测定
(PG1)
方法:
1. 实验前将试剂盒及样品平衡至室温(20℃-25℃),时间不少于30分钟。
2. 加样:空白液、校准品、质控品及待测血清标本均100μl/孔加样(空白液、校准品、质控品建议进行复孔加样) ,37℃孵育60分钟(加盖封板膜)。
3. 洗板5次,洗液板后于吸水纸上扣干残余液体。
4. 加酶:酶结合物加入量100μl/孔,37℃孵育60分钟(加盖封板膜)。
5. 洗板5次,洗液板后于吸水纸上扣干残余液体。
6. 显色:底物液加入量为100μl/孔,37℃避光显色15分钟。
7. 450nm 检测读数,确保终止后30分钟内进行测量读数。
注:
1. 操作前应仔细阅读使用说明书,严格按照说明书操作程序进行。
2. 同一批试剂相同批号底物液、终止液和洗液可以混用,其它组分不能混用。
3. 微孔板开封后,剩余要2-8℃密封干燥保存,并建议在半个月之内用完。
4. 各试剂使用前应平衡到室温并摇匀后使用,严格控制反应温度和时间。
5. 加样操作应快速、准确、手法一致,慢吸快打,缩短加样时间;。
6. 为防止样品和试剂蒸发及避免污染,温育时将反应板覆盖一层封板膜。
7. 冷冻保存的血清样本使用前需要在室温中完全融化并充分混合后再使用,并且要尽量避免血清反复冻融。
8. 试剂和待测样本加样前要混匀后再加样,加样时避免产生气泡,吸头不要接触孔壁,并注意更换吸头,不用严重溶血和大量脂血样品;每块酶标板加样起始至结束时间严格控制在10分钟以内。
9. 严禁使用自来水冲洗微孔板或用自来水稀释洗液。
10. 数据分析(单波长450nm 检测)。
11. 试剂本底(空白液检测值):OD450nm ≤0.100。
12. 建议PGI 使用双对数拟合方法【ln (Y :浓度)-ln (X :1000×OD450)】。线性:在规定的线性范围内,曲线相关系数r2应不低于0.9900。
13. 体检者采血前十小时保持空腹。
14. 采血前三天不要暴饮暴食、饮酒、不要吃腥辣等刺激性食物。
15. 接受药物或其它方式治疗者,建议在疗程结束一周以后再检测。
胃蛋白酶原1(PG1)手工计算:
1. 将标准及测定OD 值输入,将各个OD 值减去空白孔OD 值。
2. 将其乘以1000后去自然对数LN ,将光标在所取对数的后面,按插入中的函数LN ,然
后将光标点击所取自然对数的OD 值,即可出现。然后下拉即可。
3. 将个对数值做曲线。插入,图表,散点图,第一个,下一步,系列,添加,将所选的区
域选择后关闭即出现曲线,在坐标点上击右键,添加趋势线,选项显示公式及R 平方。即会出现Y=0.9696X-2.2628的相关曲线。
插入,函数EXP 输入公式0.9696x-2.2628(x为F9), 确定,下拉即