葡萄糖测定试剂盒
试剂用途
为医用体外诊断试剂,作辅助诊断用,用于人血清、血浆、尿液或脑脊液中葡萄糖浓度的体外定量分析。
临床意义 血液中葡萄糖,主要来自食物。它是糖在体内的运输形式,通过糖元生成与糖元分解、糖元异生与糖元酵解、脂肪形成与解脂作用间的相互调节和平衡,血
糖的相对恒定对维持机体正常生理功能有重要意义。葡萄糖升高:高血糖症最常见的是糖尿病。胰腺炎、胰腺癌等弥漫性胰腺疾患,空腹血糖可增高,除严重病例外,一般不超过8.3mM。抽搐及某些疾病终期,糖元分解加速可出现轻度高血糖;窒息可引起酸中毒及糖原分解增多,结果出现高血糖。感染性疾病、毒血症以及颅内疾患,由于机体内对病理损伤的反应,可能出现明显的高血糖。麻醉往往可
出现高血糖,血糖升高的程度与麻醉种类和时间长短有关,并出现尿糖。葡萄糖降低:血糖值低于2.8mM,可诊断为低血糖。最多见于接受超剂量胰岛素治疗的糖尿病患者。胰岛β-细胞瘤患者可出现严重的低血糖,有时降至零,这种情况常见于清晨或肌饿禁食时出现。甲状腺功能低下、脑垂体功能低下和肾上腺皮质功能低下患者,血糖可降至正常范围以下。由于肝糖原分解过程中某些酶的缺陷而引起的肝糖元累积病,糖元不能转化为葡萄糖,也可能出现低血糖。慢性腹泻吸收不良及脂肪泻,由于葡萄糖吸收障碍可使血糖降低;有些胃次全切除术后的患者可出现餐后一时性低血糖,或称反应性低血糖。另外,剧烈运动可产生低血糖。肝脏病由于肝糖元贮备不足,有时可出现低血糖。
实验原理
葡萄糖+O2+H2O GOD 葡萄糖酸+H2O2 H2O2+HBA+4-AA POD 醌亚胺色素+H2O
上述反应生成的红色醌亚胺色素与样本中葡萄糖的浓度成正比,可在500nm(490至520nm)波长处进行吸光度测定,同时与标准品吸光度比较,从而计算出样本中葡萄糖的浓度。
产品组成
液体双或单试剂,双试剂由试剂一(R1)和试剂二(R2)组成。R1和R2工作体积比为4:1,直接使用或按比例合成单试剂应用。双试剂合成工作试剂或单试剂中各原料终浓度为:GOOD’S Buffer50mM、HBA10.5mM、4-AA0.5mM、GLO≥27KU、POD≥0.7KU、EDTA-2Na2mM,非反应性稳定剂适量。
样本收集
葡萄糖样本应采用含氟化钠的样本管收集,防止细菌污染和糖酵解。血清或血浆应尽快从样本管中分离且不溶血。肝素抗凝血浆样本。血清或血浆样本4℃可稳定24小时、30℃可稳定4小时。尿液样本4℃可稳定1天。
测定方法
①实验器材:具有490~510nm波长及37℃恒温装置的分光光度计、定时器、加样器。试剂适用于各类半自动或全自动生化分析仪分析。 ②测定条件(基本操作参数)
反应时间
5~10min 150:1 试样比例 反应方向
Increase
测定方法 曲线类型 实验温度 测试波长 OD范围
Endpoint Linearity 37℃ 500nm 0~2A
③测定步骤:样本(校准品、蒸馏水)0.008ml与测定试剂1.2ml混匀后于37℃平衡5~10分钟,以蒸馏水管为空白管校零后测定其它各管吸光度值。
结果计算
葡萄糖浓度(mM)=(测定管吸光度-空白管吸光度)/(标准管吸光度-空白管吸光度)×标准浓度 单位换算公式:mmol/L=mg/dL×0.0556;mmol/L×18=mg/dL