结核杆菌培养基的种类及应用

结核杆培养基的种类菌及应用

源：中国来论下文载心中 [ 0802-02- 61:55:00] 作 ：者仙王何树　梅　俐袁 编辑： sudt20 a

【键关词 】结核杆

菌

　自从1882　K年cho现发结核杆以来菌为，进结核杆促生长菌，缩培养短间，达时到提前离、分鉴定目的，人们的结对核杆菌营的养生理、谢及代工人养进培了行一系列的究研经，一个多过世纪不懈的努力已，经结核杆菌对的生规律长有比了深较入了解地并且，成了许形成多的熟养培法方。尽现管代子生分学技术在物核结病研究发中着越挥来越重的作用，要是结但核菌的培杆养结核病的诊在断流、病行学标指结核、菌分的鉴定、药型敏试、结核验病物药的研究等方依面然着有可替代不作的用为。了能够较统系了地、解有对性针选择合适地恰、当的养培基本文就，国外较内成熟的培为养基种及应类进行如用综述。下

　

　1 培养基的按性状分

类

养结核杆培菌培养的基，从性上状主分有要固培养基体、液体养培基、半体流养培、固液双基相养培等基类型这，些养基培有各特点

。

　

　11 .固 体养培 基常用最是的氏（罗ownLtsin-Jeenosn，LJ）培-养，基也是具最代表的一种性，他的其还有小辰次川Ta（tujsigawoa）鸡蛋培养基M和idlde robk oH17、7011H琼脂等培养等。基固在体培养中，基由于以直可接察菌观落形态并的做鉴别可用因此常用，临于标本床的分离养、培别、保存鉴种菌对抗及结药核的敏物感性测等定面方缺点是结核，生长菌慢。

缓　

　1. 液2体培养 基常 的用苏通有（aSutno）培养、Mi基dle bdook 7Hr9等液培养基。体核杆结菌在体液培基养中能够广更泛的接触养成分营，因此液体中生长相对在快,较主要液在体表生长面，动搅时沉至管底下可，得大量获的核杆结。主菌缺点要是：在对床临标的收本集采、样运、输方有面利的一不面不；根能据肉观眼察落菌态形培；基养染机污多，影响结核会杆的生长菌，染时污易不结核与菌鉴别，杆需片染涂色检判断镜核结菌是否生长杆

。

　1.　3 流体半养基培 改苏良半流通琼脂体培养基一种是工综人培合基养，质基明透呈半，体状态流生长的，核杆菌形成白结颗粒色状落悬浮于培菌基养中，段于便观察。

　1　.4 固 双向液培养 基 Seti-CphcekA FB双相培养基国外是应较早的一种培养基用［］1，用采BD利式封闭专固式双液相一化培养体设基计。液相为Middel rookb7H 分9枝杆菌用专增菌养培基可，迅速殖分枝繁杆菌固，为3种相体固培养平基：M面ddileb orok7 H11和良改L的-J培养用于及基将增时肉汤菌内分杆菌枝进行分离化以

纯获得单个落菌，克巧力琼脂于用期

早

现污染菌发，免时避间浪。费于由有相液为基作础，因结此杆核生长较快菌也是，种一非有效的培养常基。内有国平菇用制备的菇双平相养培基［］是利用平菇浸2液出为础，基小加血清、琼脂牛等分而成制的一配培养基种，据根脂琼量的不制成液相、同固培相养。基国内应用在少，较主要特点是本成低，制简备单适合于基层使，用，有定一的研究值价。

　　 2按 分成分类

主要

分以为鸡卵琼和脂为基的础种培养两基3］。为了［结使杆核菌达到快速长的目生的可，加上血液椰、汁、平液等菇不营养成分，同而配从制出各不种同培养基的。

　2　. 以1鸡卵为础基的养基培 有 L-J培基养、gOawa养基培、丙酸钠培酮基和丙养酮酸钠胞色素C培养细等基。在鸡卵主为的培基中，鸡卵养液关键成分是在，备培养基制时要充，分考鸡卵虑液的新程度鲜及以营成养分是受到破坏否。

　2.　1.1 LJ-培基 养是种一典的经培基［4养，主］成要分有门天素冬K、2PH4、MgSOO?472O、枸H酸镁、甘橼、油卵液等，需要血清鸡凝固对器培基进行凝固，以保养培证养基中有定一凝固水，的满足长时以间养培的需要根。据成种类及剂分的不量，又同分为可性酸-LJ养培基和性碱-JL养基培将L。-J养培基K中2PO4H的由2量.4增g为加4g1就是，性酸-JL培养，基将而H2KP42.O4改为g2HKPO436g，.是就性碱-J培L基。养-LJ养基培备简单制，主用于分枝要杆初菌次离培分、传代培养、养落观察菌保、菌存种、物敏感药性定测及菌种鉴定等而酸，L-J性培养和基性L碱J培养基-用分于枝菌分离杆养培时，本标分别碱用和酸处理。结杆菌在核L-培J养上生长基时培，养时较长间，大约在48周，因此~利不临于快床检测速的需，求但作其为快他诊速断的照，以参及为作结核菌杆诊断标的准非有重要的意义常。

　　.1.2 2 Oawa培g养基 成较少，又少分天门冬了，因素此一种是L-J比培基更养经为济培的基，养要主分有成谷氨酸、钠KHP2O4甘、油、卵液等鸡，可还以过调通整K2POH的4量及氨谷钠的量制备成酸良改培养基（Mdofiei dgawa），此培养O基的用与L途J-培养相基，同由价廉，特别于适于合展发国中家［］5

。

　

2.　1.3 丙酮酸钠 培养 基 在L-J培是基的基养础加上入丙酮钠，酸去除油制甘而成，主要用于备从本标分离牛型分中杆枝菌或为作菌本传种及保的存。而酮丙钠酸胞色细C培素养是在基gawa培O养基础基上杨乐，等荫0用.1丙%酮酸代钠替甘，油并入2.5%加葡萄液糖及胞色素细C制丙成酸酮钠胞细色素培C养，基丙酮与钠酸养基培、gawaO培基对临养床

标本比较其，培养的养阳性培最率，显高了丙酮示酸钠细色胞C素培基的优

越养性。

　2　.2 以琼脂 为础基培基养 包括苏通（aSton）培养基Muddle irboo 7H9k7、H107、H117、12，H氏培匡养Pr基okause培r养和B基ec琼k脂培养等基。些这养培基主要由是无盐机类一系列及有机化的合物等分成组成琼。脂的用主要是作赋剂，通形调整过琼的量脂一方，可以制备面不成同性状培养的；另基方一，面液体在培养中的基量少脂有琼利于核结杆菌在段形成中菌落，从便而观察于

。

　

2　2..1 Sautn培o养基6］ 主要［成分有天门素、冬2HKP4OMg、OS47?H2O柠檬酸、、枸橼铁酸铵、甘油，等据是否根入加琼脂及琼的量，又脂形了液体培成基及养半体培养固基也称（良改苏半通流培养基）等。在培养基的体制备，上不需也要殊特的备，通过高压灭设菌既法可理培养处基因此，作操简单，要主用牛型分于枝杆的培养，卡菌苗的介生及产草药中结对杆核的作菌用的究研。中

　　22.. 2 Mddie bloro系列k养基 培是外最常用国于核结杆研菌和究诊目的断的培基养一，从成之上看分最大的特，是成分点、多配制杂［6复，但是培］时养间，短因此来越越到受内外国者的关注，其中学H9、77H1为2体培液基养，H107、7H11固体培养基为。过在培养通基加入标中14记的C榈棕，当酸分枝有菌生杆时长，就可利培用基养中标的记物产生而有射放性14OC,2然由BACTE 后BT46 监测0统检系测含量其，因此常敏非。Mi感dldeb oor系列培养k主基用于要枝分杆培养菌及药物敏感性测定。

的

　

2.　.2 3Pr osakue培r养和基eBck琼脂培基养 使用简 ，但便是菌不落型，呈扁平典、露滴状状多，光滑型［7］。为

　

3　 按目 的分

类

　　

在述前的培养基基上，础根研究据目不的，同入特定物质后加，以制备可用成于速快培养、别鉴、敏药等同用不途的培基，养要为主了满足床临需要。

　的　3.1 用 快速培养 于主要 有eBctn Doikissno（nDB公司研制）的列全系自培养系动和Orga统nn oTekniak公研制开司发培养系统。的其的还有iDfoc公E司P系统、S生物梅里埃公司VI的TLA统系等。由于与代现先的仪器设备进、技结合，检测灵术敏高度时，间，短但常价通位高较

。20世70纪代年，B末公司D制的研养培统系要有早主的B期ACECT 460MT T，B成全球第为台一业专全的自分枝杆动菌养培定鉴仪，该统培养系基以Middle rbook7H1为2基，在培础基中养加标入1记C4棕的榈，酸故也因为放射称同素位体培养液法，于由在存弃物放废性环境污射以染探及针刺空开放性测检术缺技，陷公又司出无推射性放污的B染ACTC 9000MBE及ABTECC MIGT9 06

全

自动快速枝分菌培养杆鉴定敏系统，药正实真现了分杆菌枝速快安全、、无放性射检测。ABTCECM IT G609养基以Mi培dld br

e

ook7 9H为础，配方优良基的BB LANTA PM抗T剂和菌AODC营养。采用剂一种荧物质作为光分杆菌生枝指长剂，因此示也称分为杆菌枝生指长管法（my示obcacetiarg rotw hindcatoi rtbue，MGTI），目前是全最快的分球枝直培养、鉴定菌药敏系、统许。多学者8~1［］0应发用，结核现分枝杆平均检菌出间为14时4天.最,1快0。适天用多种于标本来源对各，种分杆菌枝测检适用。

都　

　BMBac/分枝杆T菌培系养是统O由rgnan oeknTki公司开发的a将，血培养中判液细菌生断长的H指p剂用于示核结杆的菌养。结培杆核代菌谢产中的CO生变化通2化过学受感器测，利监酸碱用度变化的p使H示指颜剂改色，最变通过发后射光度检计测颜色变。化其平检均测时比间LJ2早周该系统。然采依Mid用dl beoork7H 9体培养基液当，有性信阳时号需，取培液进行养涂及片鉴定确。认iDcf公oESP系司统是一种全,自的动培养系统，可以连续监血细菌的生测长。有无具放射的性特，与点ABCTC TB 460比E［11，1较］，2在检测间时差异无上著性显,以可代使用，替Wlliims-Bouayr N等将eSEP与BACTCEM GIT96 0进行了详细比［较31，］在体整检测间上稍长些，对时戈登枝杆分菌监测率高作为。种一体培养基,液需与固体培要养基结使合用,而能不为一种独立作系。

统

　　我学国者据根国具内情体，况用利血液、汁椰植、物激、平菇素液豆、浸液等不同养成分营配，成多种制不同的快培速养。基如平菇用备制平的双菇培相养，在基落实培养基基上的豆浸础培液基养、物植素激养基等。

培

　　3

. 2用于择选 由 于核结杆菌长生慢，且缓营要求高，因此养于其对的他微生极易物长，生常通培在基中都养加有菌抑质。在物罗氏培养基，中量微孔雀绿可既抑杂制的生菌，长可对又结杆核的生菌长促进有作。用Gnyt通f把过雀孔的浓度绿高提，同加时青霉素、萘啶入酸制成选备性的改择良氏罗培基养1［］。在4Midledbr oko7 H01、iMddleb ookr7H 1的1础基，通上过加上多黏素菌、羧苄B霉青C、素两性素B霉三和氧甲氨啶嘧可即制备成结核素菌选的培养基择其，目主要的是为减了少染污率，高提阳率性

。

　　.3 3用于鉴 别 最主要的有 （对硝苯基酸甲）TCH（和噻-吩2羧酸）-鉴培养别基。用溶解稀释后在制备L，J培-基的养时同，入加甲基二甲酰胺或二醇丙成制NP培养B基加入，吩-2噻羧酸制-TC成H培养基，于用结分核枝菌杆牛、分枝杆和菌结核非分枝杆性的初步菌定［鉴15。

］

　

3.4　 用 于敏药 氏培匡养基是

由我研国制的一种在结核杆菌速药敏快验中试很好价值的有养培［1基6。］然B虽D公的产司品够快速的能测检核结杆，菌且在并敏方面药也一有的定势优，

但早期的

培系统养在存射性，新放发的开培系统养又在存染率污高较问的，而在题传的含药罗统氏养基上培在存结抗药物核热受失活蛋白质和吸两个主附问要至今题未解尚决而，氏培匡养基优点的在不存在于高白组蛋对药分物的附作吸用又，无热凝加固造等药物失活问成，题此在因药试验方敏有着显著面优越性的。主要无由盐、维机素生琼、、脂甘和小油牛清血等分组成。药成试验报告敏结果罗比培氏基养平早29天，多数药均敏结可在果周内3报告，对核结病临的床治疗重有指导要义意BA。TEC系列培养C系统E、PS统系等都可用于敏试药验一些液，体养培基（通培养基和胆固苏醇液培养体可用于中）草对药核结杆抑菌菌试。验

　3.5　 用于L 细菌的培型 养 核结杆菌型的营养L基上本与菌原相，但同一需般加要一入定量的渗压稳定透剂血清，和国主外使要用的培基［养17］巯基有酸盐醋养培基PP、L琼O脂V、SY肉汤和高桥的胰大豆蛋白腺陈琼脂培基养(STAI-等。国内)玉辉等庄［18］已成地利功用改良SA-LT养培培基L型养菌。外此安徽蚌埠医院的学型L液培养基体(代9号-23TL)，B培15养天后取可沉渣镜。检

　　在结核菌的培养研杆中究出过现很多养培，基上以介绍的国内是通用的外些培养基一有，多许出新现的培养虽然基养培时缩短，但间时出现问同也题多很，此要慎因重择选。另，外用一种要养基同培达时到多种的目是也很困难，因的此多许实验室同多时应用几种培养，以基便从各于个角度来满临足和科床的研需要总。，只要之结核病威胁还着类的健康人，对培养的基研还将究续继下去，但是如何入深、细致研地究现培有基各养分成相的作互及用如何现使代物技术与生统传养培术更技好结的等合问还有题待进一于的研步究。

　　【参文考献

】

　1 　seInerb gHD, ’DAatm oF,RH ifees t,Let al. ollCborataivefeas biiity study lf ao bipashci ysset(mocRehS pti-eCek hAF)Bfo rapir dedteciotn na idslotion af omcoybcaetri.aJ C ln Miicroibol1,99,1 29(8)17:19-1227

.

　　 申2维，袁建玮，娉李等，.平菇相培双基养用于结杆菌培核养的究研中国.痨杂防，2志010，234）：2（4-1442

.

　

　 S3ito a.HL baratory omedi afor het cltuiavton of itburelc ebcialus. Keklakk,19u9,873(5):23-3937

.

　　 WHO4.La braoory tersicvsei ntu ebcrlosuisco tnrlo1,989

　　.5 Da ivdLub ais, Cahrty iabeenHu,z StoshaiM iartia. vEauatioln ofan oawg amcybaotcerium clture meuhod tomidfid eorf ihghe renssitivity

employng ioncenctaredt smalesp.T roicapl Mediinc ead nHeatlh,200,432():1-1.

4

　　

6 张熔.敦代结核现学病.京北人民军：医出版社，2000,1-79.

1

　7 　闻 梅玉.现医学微代物生学上.：上海海科医大出学版社199，，509.

7

　8　 aHnanB ,A Erbhamiadze A,h Ellotti BL,e t l. aMultcinteer evaluatin of toh BeCAETCMGIT 96 0sstey mor feroverycof myco bcteari.a J lCin Mircboilo19,9,9373(:)7487-5.

　　2 9 hCie nH, YuP MC,Wu MH, et l. aCmoapisrono f he BACTEtCM IT G60 9wiht Lownseeti-Jensennmedium or recfovrye f mycoboatcriaef orm clinicals pecmeisn. Int TuJbec rung DLsi,002, 4(09)8:66-70.

8

　　10 k o soSmoskv,i Csba adKnm,k o Lsanot, steal. oCmapisro onfr coeerivse fo Mycoacbteiru mubtrceulsosi sinug th auetoamtd BACeEC TGITM9 0 S6styme,the BACTCE46 0 BTS ytem, ands oLewnseti-Jnesen mnedium J.Cl n iicrMoiol,b200,3806()2:3592-97.3

　　11

Wo os dLG,FishG, Plaut n, eM tl. aClincai lvaluaeitn ofo idcf oSP Ecltuur system Ⅱ efro grotw ahn ddetcetoi nf myocbaoctrei. Joauranl f Cloiincl aicMoriboolyg,19973,5 (1:) 12-1142

.

　　

21 nriEo cTrtolio,Pao alCic hre,oM G briella Cahriilo, lt ael .Mltucietnreco pmairosn f oEPS cltuur esysem Ⅱ tiwt BhACTEC 406TBand with owlnseteniJ-esenn mediu formrecove yr ofmy coabtercia for mifdfrenet linccal isecimpne, sicnluindgb oodl. Juonarl ofC inicll Maircoiolobgy,9981,3(6): 157831381.

-

　　31 WillimasB-oueyrN ,orkY eR,Le e I,H e atl .oCpmarsion o ftehBA CTCEM ITG9 60an d ES cuPturles syem Ⅱ ftr groowh andtde tceiotnof myc oabtcreia J. CilnM irociobl，200,38011()4:16-7147.0

　14　 闫 国蕊，苏亮.结保核细病菌检学技术验.郑州郑州：学出版大社2，01，90：2.3

　1　 5中国痨协会.结防病核诊断菌细检学验程规.中国痨杂防，志19961，8（）：12-831

.　　16 匡

吉铁董，梅张青霞，，等匡.氏琼脂养基培用于结核菌痰直药接试敏验效果研的.究中检国验学医与临床，0220,（32）5：456-.

　1　7 王进.核分结支杆L菌的研究现型.状华新中医，20学0，3419）：177（-47167

　.　18 庄 辉玉，李国，张利刚，等.肺小核病结L型人分培离养法方研的.微生究学通报物1，99，18（6）1：348

.