标本放置时间对胰岛素测定的影响

・论著・临森医学工程２０ｌＯ年３月第１７卷第３期

标本放置时问对胰岛素测定的影响

梁颖茵，何雅军

（广东省广州市红十字会医院检验科，广东广州５１０２２０）

【摘要】

目的探讨血清标本在４℃放置不同时间对化学发光检测血清胰岛素浓度的影响。方法用真空分离胶采血管抽取

２１例血标本。冷冻离心分离血清，采用全自动化学发光仪即时检测胰岛素浓度，将标本于４℃分别放置１小时、３小时和２４小时后重复检测，并与即时检测结果相比较。结果标本采集后即时检测与４℃下放置１小时、３小时、２４小时后检测胰岛素浓度分别为（６．８８±４．３８）ｌＩｌＩｕ／Ｌ、

（６．８７±４．４４）ｍｌＵ／Ｌ、

（７．０５±４．６８）ｍｌＵ／Ｌ、（７．５７±４．６０）ｍＩｕ／Ｌ，经配对ｔ检验，血清标本在

４℃放置１小时和３小时所测结果与即时测定结果无统计学差异，而放置２４ｄ、时后所测结果与即时测定结果有统计学差异（Ｐ＝ｏ．００９）。结论标本放置时间对胰岛素测定有影响，血清胰岛素在４℃条件下不能放置２４小时以上。

【关键词】标本放置时间；胰岛素中图分类号：Ｒ４４６．１１

文献标识码：Ａ

文章编号：１６７４－－４６５９（２０ＬＯ）０３－－００５５—０２

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胰岛素在糖尿病的治疗和诊断中被普遍应用。随着对胰岛

素研究的逐渐深入．测定胰岛素的技术手段的不断发展、更新，现在胰岛素的测定主要应用于以下研究中：①糖尿病的诊

１．２临床样本广州市红十字会医院临床样本（无溶血，无黄疸）２ｌ份，用普通分离胶真空采血管抽取静脉血。１．３实验方法

１．３．１标本处理标本采集半小时左右后用低温离心机以３

０００ｄ

断．区别胰岛素依赖型糖尿病和非胰岛素依赖型糖尿病：②糖尿病的早期检测，在临床症状ｌ叶Ｉ现前作出诊断：③随访和稳定

胰岛索治疗的糖尿病；④预测２型糖尿病或２型糖尿病的并发

ｍｉｎ离心１０分钟，分离血清标本。立即测定胰岛素浓度，剩余标本在４℃环境下放置１小时、３小时和２４／Ｊ，０寸后测定胰岛素浓度。１．３．２质量控制每次实验前使用质控血清进行质控检查．质控结果在受控范围方进行实验。

１．３．３统计学处理各组有效数据均记录面±８．各时段实验组分别与即时组进行结果比较，采用配对ｔ检验【ｌ】，ａ＝０．０５。

症；⑤胰岛素瘤的诊断。胰岛素测定的多方面应用前提是对胰

岛素作准确的测定，然而，现实工作中，标本采集到含量检测要相隔一段时间．标本如何放置及放置多久才不会对胰岛素测定产生影响值得探讨。

本研究将标本在４℃放置不同时间测定血清胰岛索浓度，旨在探讨标本放置不同时间对胰岛素测定的影响。

２结果

２．１标本采集即时检测组与４℃放置１ｈ、３ｈ．和２４ｈ后检测血清胰岛素浓度见表ｌ。

表１血清放置不同时间后胰岛素测定结果（ｉ±暑）

１对象和方法

１．１仪器与试剂美国贝克曼化学发光仪ＡＣＣＥＳＳ一２及其配套试剂。试剂批号：８２５０１３。质控品为伯乐公司的免疫测定多项目控制品，批号：２２１ｌ—０６。

修回日期：２０１０－０２－－０９

收稿日期：２０１０－０１－０８

作者简介：梁颖茵（１９７４－－），女，检验师，从事临床医学检验工作。

・５５・

万方数据　

临瘩医学工程２０１０年３月第１７卷第３期

２．２标本４℃放置不同时间与标本采集后即时检测血清胰岛素浓度比较结果见表２。

表２血清放置不同时间后胰岛素测定结果的比较时段比较分组例数

测定值的蔗值

Ｐ值

放置ｌ小时与即时组２１

Ｏ．０１３８±０．２１６４８０．７７３放置３小时与即时组２ｌＯ．１６６２：，－Ｏ．６７５７８０．２７３放置２４，ｈｏｅ与即时组

２１

０．６９０５＿＿．１．０８４７ｌ

０．００９

血清胰岛素浓度在４℃存放１小时和３小时所测结果与即时测定结果无统计学差异。２４小时所测结果与即时测定结果有统计学差异（尸＝０．００９＜０．０５），胰岛素浓度在存放２４小时后检测结果有升高趋势。

３讨论

糖尿病是一种常见病。多发病，随着人民生活水平的提高，生活方式的改变而迅速增加。它是一组以慢性血葡萄糖（血糖）水平增高为特征的代谢疾病群，久病可引起多系统损害，导致眼、肾、神经、心脏、血管等组织的慢性进行性病变．引起功能缺陷及衰竭．例如肾衰、心脏病、神经损害、失明、坏疽等，高血糖的发作会导致酮症酸中毒和昏迷ｆ２］。糖尿病血糖升高是由于胰岛素分泌缺陷和（或）胰岛索作用缺陷而引起．因此，胰岛素在糖尿病的诊断和中治疗被普遍应用。

胰岛素是一种较小的球状蛋白．可溶于稀酸溶液中。在中

性条件下对热稳定，不耐碱．经氧化或还原后均被失活。胰岛

素在人血中主要以两种形式存在：一部分和血浆球蛋白结合，另一部分呈游离状态。在正常生理条件下，胰岛厣细胞每天均分泌适量的胰岛素进入血循环中．调节糖、蛋白质和脂肪代谢。胰岛素最重要的生理作用是降低ＪｆⅡ糖浓度．促进组织糖原合成和加速葡萄糖的氧化，调节机体能量供应。当体内葡萄糖含量升高时，胰岛素生物合成和释放加快。血中葡萄糖浓度是刺激胰岛口细胞兴奋、促进胰岛素合成的信号。

胰岛素浓度测定方法有三类：生物测定法、免疫学测定法、仪器分析测定法。免疫学测定法主要包括放射免疫测定法（ＲＩＡ）、免疫酶分析法（ＩＥＭＡ）、微孑Ｌ板酶免疫法（ＭＥＩＡ）、荧光酶免疫法（ＦＥＩＡ）和化学发光免疫分析法（ＣＬＩＡ）等。本实验胰岛素检测采用双位点一步酶免法检测（“双抗体夹心法”），即样品、标记了碱性磷酸酶的抗胰岛素单抗（酶结合物）以及包被了抗胰岛素另一位点单抗的磁性颗粒被一起加入到反应管中．样品中的胰岛索和固相在磁性颗粒表面的抗体以及游离的酶结合物在不同的抗原位点上同时发生反应。而后，反应管被传送到磁性分离区域进行多次冲洗。去除未和固相结合的其它成分。最后在反应管中加入化学发光底物（Ｌｕｍｉ—Ｐｈｏｓ＊５３０），已与同相结合的碱性磷酸酶会使该底物发出光子并被光电比色计所检测１３１。对照仪器中储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品胰岛素的对应关系而计算出样品中的胰岛素浓度，反应产生的光子与样品中胰岛素的含量成正比。

有文献报道［“】．由于红细胞中存在胰岛素降解酶，所以胰岛素测定的血清标本应在取血后５ｈ内分离。本实验在采集标本后。待标本完全自然形成凝块，血清析出后立即离心把血

・５６・

万　

方数据清和红细胞等有形成分分离，以减少胰岛素降解酶对胰岛素的降解，但分离后在４ｏＣ放置时间会否埘胰岛素测定有影响目前报道较少。由下近年来胰岛素检测大多采用发光免疫分析法．

试剂、仪器成本较高，且胰岛素测定非急诊项目．故大多数医院不是２４小时开机检测此项目，标本需放置一段时间再作检测。另外，实际工作中，常有各种原因需要保存标本以备复查。因此，研究标本保存时间对胰岛素测定的影响有一定的现实意义。

本实验将血清标本在４℃下放置不同时间后测定胰岛素浓度．结果表明，标本在４ｏＣ下放置ｌ小时后与不放置即时测定的血清胰岛素浓度比较，Ｐ值分别为０．７７３＞０．０５，差异无统计学意义，即放置１小时后血清胰岛素浓度没有明显变化，同样。放置３小时后与即时测定的血清胰岛素浓度比较。Ｐ＝

小时后与即时测定的血清胰岛素浓度比较，Ｐ＝０．００９＜０．０５，即胰岛素浓度差异有统计学意义。呈现了湿著的差异．即标本放置２４小时后测定的血清胰岛素浓度已不能准确反映人血中的胰岛素浓度。

血清的成分虽然没有血浆复杂．但具有很多有氧化或还原置２４小时后，胰岛素部分已经失活。检测结果应降低。但本次明．检测胰岛素的血清标本不能在４℃放过夜。以减少假阳性的标本都不能置于４℃冰箱中保存，有文献报道［８ｆ，】测定血ｈ以上必须保存于一２０℃以下。【ｌ】何雅军，杨小华，马福广．标本放置时间对ＩＩＩＬ红蛋白Ａ２测定的影响

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（责任编辑：常海庆）

０．２７３＞０．０５。即浓度未出现显著变化．但将标本４℃放置２４作用的物质存在，胰岛素容易被氧化或还原而失活【”。血清放实验中．血清标本４℃放置２４小时后胰岛素浓度出现升高趋势．出现这种假阳性结果的原因可能是血清在放置过程中有某种类似胰岛素的小的球状蛋白分解出来。本实验结果分析表结果，确保检测结果的准确性。另外。实际工作中，如需复查清胰岛素的标本如果要保存２４参考文献

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标本放置时间对胰岛素测定的影响

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：

梁颖茵， 何雅军， LIANG Yingyin， HE Yajun

广东省广州市红十字会医院检验科,广东,广州,510220临床医学工程

CLINICAL MEDICAL ENGINEERING2010,17(3)

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