同步荧光分析法的应用及其新进展
第 ;$ 卷第 ; 期 !"
化
学
进
展
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同
荧步分析光的应法及其新用展进!
! 立何$，芳
林丹
$
丽耀李群$!厦
#门$";+；"
（$ ’
门厦学化大学工化学院现代分析学科教部育重实验室 ! ’ 点龙学院化学系 岩摘 要龙岩 # ;
）同荧光技步术是决解多分组荧物光同时测质的定良手段好一。本之文恒波从同步荧长光法、
恒能同步荧光量法、可 角变同荧光步法、 恒基同步荧光体法以及们与导它数术技 低温、术、 技化计学学方法 量的用联等面方同对荧步技光术领出域的现技术及新用作应一述评 。关键 词步荧光同多 组分析 评分 中述分类号：图;+*=> 文#标识码：献?文章 编号：$""+-!$@) （!"
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一、引
言
常
的化规学分析是样品在淀、 分沉离 萃、之取 通后重量过析分 色层析、 光分、、析 电析分等析分术 技来成完的，通 常需消耗大量溶的剂和间时，并且 取 在和处理过样程中产大量污染物生 ，析分本高成。 荧光术技敏度高灵， 但规的常荧分光法在实际析用应中往往受 到制， 限一些复对混杂物合分析遇到光 常谱互相重叠、 不易辨分困的， 需难要分预离操作且繁琐。和常规 光荧分析法比，相同 荧光分步析具法有 图简谱、 化择性选提高、光 射散扰干少等减特， 点 尤适其对合组多混合分物的分析。该近法年几到得 迅速发和广展的应泛， 出用了许多现的技术新，如 导数 恒量同能步光荧、 法数导基体恒强度步同光荧法 、斯
稿：收!"#"年 $" 月收，改修稿!："#"年 $! 月
波
基 （J斯NB1’ 低温同步荧&法光、 振偏同-荧光步I 0T）0光法、 三 维同荧步光法和变角可步同荧法光。该等 已法应于用组分多多环烃芳的定定量分性，析 物 分药， 食析、品蛋 白、质氨 基、酸石油产
品分析。本等文拟对近十 几来国内外尤其是国内年分工作者在析 同步荧光析领域的工分作作回一和展望。顾
二、步同扫描技与术步荧同光光谱［$
］ 同步描扫技术是 D1由2& 首先8提出的 ，与它 常的用荧测光方定法大最的区别同是时描扫激和发发
两射单色个器长波由。得的荧测强度信光与对号 应的激波长发 （发射或波长 构）光成谱，图称为 步同荧 ［］! 光光谱
。（
&’% !)(*"+#!）、 教部育优秀年教青基金和师建福省然自学基金资助项科目!国家 然科自学基金通讯联系 ： 人,-/.10 320415 67. ,’78 ’9 !!:
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*第"卷
同步 光荧法光谱按扫方描式不同的分为可恒（固 定 ） 波 长 法 、 恒能 量法 可变角法、和基体恒 法［!
—］"
［7］ 酸
定
同荧步光谱技光在术气勘探中同油样有较的好
［7， 7") 应］前用。宋景继梅 等恒波用长步同光法荧测
。! #波恒同步荧长分光析 恒波长法同步荧光系法扫描在过中使程发激波 长和射波发彼长此间保固定持的长波隔间（! ! $ !&% ，通即常所说同的荧光步， 是最法早 ’!%(提$ 常）数［)— *］+。 恒在长同步荧波光出的 种一步扫同技术 法描， 中这将直接响影到同步荧! ! 选择十分的要重 ，光光谱的形、 带宽状信和号度。强可能在件下， 选条［*,
］择等于托斯克斯位移的! !
定了原油样。的芳品， 烃可判断以原油属性的成因 类型。和法该于分用析石、 岩壤土油田水和样品 可，以 测油预气层他。通过们析大量油气的恒波长分步同荧 光谱，光 出不同性质提油的气光荧光谱特征，将此 技 术用于钻井应岩屑的析分和油属性气判的断，以
［7 ］ 及地+下水和地表样土壤分析。王子样军等对
减压渣油
分中组芳环烃数分布的同步荧光光谱行进 研究，利用其光谱 好地反较出映极性和芳香度各同 组不分芳香的系环小。大同荧步光谱法还可以用于光 监测相液色法谱（以氧化铝 作固相定 ）重质将中油的［
7］, ［6
素波恒同长荧步光谱光较法用于多多组多分芳环 的烃同时测定多环芳。烃性很相似质，尽 有管强 的光， 但各种荧合化的激物和发射光发谱往光往重 谱严叠重 用经，典光法荧难进行以合混的物直分析。 接步荧同法具光选择性好、有灵敏度 、高 干扰少特等 ， 点 用可 于多 组分 多 环 芳 烃 混合 物 的同 时测 。 -./0定 和 132%44 首将同次荧光分步法析应用法于科庭 ［655!］—［ 75］学领域 李。静等 红
用恒波同步荧长光谱光同 分析了时苯蒽并和 ， 由于,者两激发* 6二甲基蒽， 8和射光谱发相互重叠 ，经典用荧光光无法谱直分 接。析采用 !! $5 6& 9长差对波混合物 进行 同步 描，扫 并蒽苯和, ， *互86二基蒽同步甲荧光峰区好，
分［)］ 究研苯了 并 ［］ 的:步同荧光 不干扰。蒋测淑
酸艳。 将导数技术与同步荧技术光联用可使测检限更低 ， 对组各分分的辨更有效。有报已用导道数同
［ 族维生 ［,
定导件条 引，系数入正以消除校同物系苯 ［并 ］ 荧蒽对 ;应用于并台烟市区不同地段 并 苯［:］ 的测定干，扰 及不时间的同多大气飘尘个样的品测。李定耀群［5
等用 同荧步法同光时测 定， 5=85羟二基联苯 7和8［5 "，5 )］ 基羟联苯。勇张 用同等步光法荧检测的微芘
数
步荧光同法用于已定可能发测生荧光灭猝的 ** ［7］ "种环芳烃多的合混物， 人 体清中血甲氧的丙萘酸［
"
生物。解及降胆汁中的 鱼8羟*基。芘恒 长同步波荧光谱光法除用于多应环芳烃的分 外， 析常还于用药物析分和蛋质、白 基氨测定。酸 已报见道有的同步荧光分析用法分维生析素 * >、>5 和
［+—!!］ ［!7］5， 清维血生素2 及几中草种药痕中 量>" ! 奶粉维中素生> *和 5 的>测 。
定
" #恒能量同荧光分步析 恒法能量 同 步 荧 光 谱光法 （ ?E2-E） 由F9&:9 和 ［7， )! ］它在。克拉曼服光 、CG%9/H19A%A *于+5 ,提年出提 高析分灵度敏面均方显有著效果 ，具其他有步 同荧法光所有没独的特点优恒。量同能荧光步法在系激 波长!%发 和发(射波 长%& !的时扫描同过程中保持 者两一恒定的能差 量 !!关系 该。法荧光体的以 量!子振动迁的特跃征量为依能来进据行同步描， 若选扫择固一定能差 !量则 ! 等 某于振一动量能差 ，!在同步 扫中描， 当激能发和发射量量能好匹配一 特刚定吸8发收射迁跃件时条 该，跃迁处于佳条最件
，"［ ］此产由的生同光谱可步最达强度大 。
菊
等
同用步荧光法究研
了细胞素 ? 与胱色氨 酸作的，用 用同利荧步技术光肌红对蛋的荧白光光谱 行研进究，并 对其特峰征行进属。归
7［6］ 脂质过、同 步光法还荧可对清血氧化脂过
［质)—!!,］
氧
化物
［7*］
、
铽（ " 与）铁运脱蛋白铁用作［
77
］［7
5］
、 超氧
［7化］! 歧化物 进行分析酶以，及用应于品商杀菌腐防
恒能量
同步荧光对于法环芳烃多的别鉴和定 测特别利有。恒能量同步荧光的法光优点可以谱以定
剂中苯
甲和水酸酸的同杨时定测
和料饮中苯甲
第
期*
何
立等芳
同荧光步析分法应的及其新进展
用・
++ $
・
量形来表式并用达选来择扫参描数， 从而体为系 的数优参化提了便供
［利"!
］。描方法可分该线性为非线与性两类 ：性线可变 同步荧角光法的描扫径路表现等在线图中为一条不 高 为)"G的线； 直而线性可变非角步荧光法其扫同描路径 表在等现线高图中为线折或任意曲线。线性可非 变同角步荧扫光描时 不但要求，发、 发激两射个单 器色以不能的速同率和同的不向进行扫方。该描法 方能扫描路使径方地便选有性地择通各过， 因而点
获7［］ 得极佳!的谱分光辨。李耀群等提 了利用出变可
该。已法用多于种多环芳
&’$
烃
测的， 绝对检测定限至低! # $%(， 线性 态动范 !’， ［)］! 达 )围 个数级量， 还 应于空气用品样中多环 芳烃的谱指纹光别鉴［!
］*
汽油，废气中多 环 机 烃 芳
测［!!］
!［+ 定］和 苯的分析酚等 。 ,-.0/12 2 指等 利出用 恒
能
量同步光法荧 有，可能产生载气环多烃芳的效有 而单简 “选”筛新技术 。3 456 4和 ,-/.122 等 将0方 法广到推温低， 使可谱光生产温低波斯基斯效应， 谱 带窄化至 8%45。对’多芳烃同分环异体构混物和合 多芳环烷烃烃系同物行光进分辨谱，取 得满的结意
+%［］［+ ］$果 。何 文琪 以等能恒同步荧光光量对苯谱 并［7］
角!步荧光法同服二克散次光射扰干的想，设并且探 讨了适于包括可宜角变步同荧光谱在光的内长域
［波7］+ 步同的理谱计算论 式导。技数和术可变同角步
光法的荧联可用进步一高提析的分灵度敏选和
择77［ 性 ］李耀群等分。了导析可数角变同步荧光光
［ 6］谱芘 、苯并 ［ ］- 芘 、蒽 、 、芘) 种 组的分多芳烃混 合环物行同时进量分定析 此，方可用于大气法、 泥和底柴油机尾 样气究。
研+9［ 李耀群］等 用能量同步恒荧光分析法咔对、唑
特点的， 应用该 技 术 测 定 了水 样 $中萘 @酚 和 9@ ［7萘］7［$ %% ［$%$］ 酚 ， 苯］酚苯和 胺 苯，胺和 @萘$酚， 以及 咔 唑、 蒽、 二 苊、氢 )多种环芳烃 7的 ，%@$二基蒽、 甲［%$9］ $［，7$%’ —%)$ 混］合物。 该
方 也法 应用 于 药 物分 析。
［ $%］ 应*固用相变可角荧分辨了光光重谱 叠HI6>J6 等4 $［%］!的 多芳环。K烃-.446-EL等 应用 非性线可变角
同蒽、
的合物进行分混析 并，恒将量能同荧光步和 法固波定同步长荧法进行比光，较证明 者在简前化扫
［’+ 描步］上有显骤著的越优。 ,-性:06.;等 用恒能量
步同荧分光法分析析煤高褐分温解的芳烃构结特 。征导 技术数放大窄能带敏灵、度 抑制带， 宽恒对能 量同步荧光光谱的窄应用带有很利因。将导数此技 和恒能量同术步光荧术技用， 可联更效地有多对 组混合分物微中量组分进行析分 提，高敏灵度选择和性
［+"+7］—
荧步光结数学处理方合法消除干扰，测 了多环芳
［定$%， +$%］ 烃7。@1=A?(6>4 等 分别.用非利性线变可角 导和可变角同数荧光法步时测同了酸定溶中的液
吡哆
、 醛吡胺哆 维生、 素M* 和血浆、 样尿中水杨的酰
［$$］ %胺。等雍克岚 用三维等光荧光谱可和角同步
变
光荧扫技术描析天分然荧光基氨的含酸。 量N460DL-［$
$］ $等 用变角同步可光法荧析分’ 种除草 混合剂 的物环糊精液，溶 并与秩消法（ .4/6 44>06>?J6>41 5-J01E
）
导数。能恒量步荧同光析分比导法数波
恒
荧光长分法有析更大优的越， 性导数恒能用量同步 荧光光法谱需只一次描扫可就到导数达同步荧光光 法多次谱扫的描最佳效。李耀果等提群出导数能 恒量同步荧光法
［7%，7$］
进了比较，行发 可变现角步同光法荧有具高更分的析精密 和准确性度 " 。 F恒体同步荧光分基析法 $［$］9提出 了恒体基同$77" 年 =.?1@?=A(6?>.4 等 荧步光。法也可被认为它是非线可变角同性步荧光 法一种的，其扫 描径在路高线图中表等为一现线， 巧曲妙是该曲线是的基体 （干扰将物视为基体）的等 荧［$
’］ $强度线光。方法一般与导数该技联用术， 着沿
，
述了该法的特阐点和克在拉服
［’
］光方曼的独特面用作苊、 蒽 等体、
系
，并该法用同时测定芴、
了［
7， $7］9
7［］ 。’ @A1?(=.>46 等分 别
用一阶数导射、发一 阶导恒波数和一阶长导数恒量 能荧光测法乙氧定萘（ 胺 ）霉青素 9，和* @甲氧二基青 ［苯"—7*］ 7素，霉 并对种方三进行法比较 。B>1.6 等用 导数恒量能同步荧法分析光二氢、 苊、蒽苯 并 ［6］ 、蒽苯 并 ［ 6 ］ 芘 、苯 并［ C 荧］蒽等 +$ 多种芳烃环。作者用 还二导阶恒能量和数恒长波法析了分并 苯 ［］C荧蒽 苯、并 ［ / ］荧蒽、 苯 ［ 并，( 茚［，$并芘中的 0 ，> 、 9，］ ’， ，D ］E苯并 ［ ］6芘 ，并将 两方种应用法于水样的情中况了 作比较 ! 。F可变角同步 荧光分析法 可变同步荧角光法
是在绘同步光测谱， 时激 发和使发射两单个器色不同以速率的方或同时向扫
等高线扫
，描 再结合导技数术就可以除基体消的 扰。干其基原本理是 ：等高线图上把基在的荧光强体 度等 的相各 点连 接 起 来形 成等 高 线（等 荧 光 强 度 线） ， 着沿体基的高等扫线描 ，在整则扫描个程中 基体的荧光过度强相等由于整。个扫描程基体过的荧 强度光致， 一当合结导数技微术后分， 基体的数信导 号零。为混在合中沿着测物定路径 干扰（或物基 体的等线高 ）扫时所描得信号的通是常混物的总合 的光荧号，信既 括包测物的信待， 又包号括干物 扰基
（・
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第 !
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体 的信）。但号由于是沿扰物 （基干）体的 高等扫 描线 ，荧信光号求导后， 干物 （扰基体） 的扰干就得了到 消除，扫描所得的导 数号则是信测被的净信号物 。温下室恒的体基步同荧法已用光来定血清中测水 杨
酸!［!］
羟"基甲苯， 苯酚和酸间二酚、苯 酚和邻苯二酚苯进 测行。定
［!"# 鄢远等 采用］计机辅助算合曲褶线分析结法
同步 合荧光 光 谱 （苯 对%对 酚苯 二酚、 苯 酚 % 苯 二邻［
!"" 酚］ 双组）分系进行体同测定时张。志等 德分充
，
尿 中样的各种分如组水杨酸 、#， %二羟$苯
［基!!(—!!)
］
甲酸、 生维 &素’以 及尼奎定等
。该
方也法
运
仪器功能用 在，合混硬物解基析上础，结 合学化计 量手段速快确准检地测及萘其衍物。生
!［8］+［!" ， (!［’" !"］］$、 &和3;
水
!!［］ 用*来测定共存水杨酸的和 # ，以 $二%羟苯甲酸基
及谱严重光重叠 的!%蒽氯 和*溴% 。蒽!% 羟基 芘是反映人体接触环境多环中烃芳程的重要度物标生
［!!］ #物， 李耀志等群 用导恒数体同基步光荧析分法
［!+#］
样中
的多环芳而烃需预不离分 ，取良得的效好。 #果 其,他技术 !［"］8 贤黄智等 提了偏出技振和术同荧步法光用 的设联， 利用荧光想体和杂散光偏差异， 有振抑制散
［效!") ］射的干扰， 提高检测的光灵敏。度耀群等李将偏
接测定直中尿的 %羟基芘!
。三同步、光分荧法与析他其术技联用
的 !,与低 技温术的用 在联温低光法的应用中荧，主要 利低用激发和温发 光射来进行谱定测尽。管由于低温应光效谱带谱 变窄，有利 于物质选的性测择定； 谱带分但加裂，剧 杂体系复的谱光更加复杂难峰区以， 用普通分低 荧光法测定困难温较且烦琐大。用技联能术充分够 结低温合术技和同步光荧术两者的优技点 有，效决解 些这题问，进一 提高实际测步中的定敏度灵和选 性择目
。
前，低 技术温恒波与同步荧长光、 能量恒同步
［#!—!#$］ 荧光技#的联用术已相关报有道。 ［8" )，］+ 提出低了恒能量 -温.0/ 和. 12.43675.6 等 同3步光荧法并该法将于用环多烃同芳分构体异合 ［混!#］ ’和烷物同基族混体合物的分。析於军立 用一等
振术与可变技同角荧步光技术合联 ，时同测定混浊
［了"*，!! +］(液中荧光 、素罗 明丹 D ’和罗丹 明。&勇等 研究张磁了场效下分子应光行发， 为并磁用效%应振%偏
共振
步荧光法同时测定痕量蒽、同 、 。杨天
红!(!［］等 偏用同振荧步法测光定土中的壤芳烃。 ［(#!］ 家俊等何 自以动维荧三检光索法数和处据
理方
相法合， 探讨了同结荧光分步析最佳的条。件
!("［］蒋 淑艳研 究罗丹明了& 同 荧步光猝灭法测定 微量的磷件， 并将此法应用于条种黑色几品食中的
测定。
磷!［((］李 耀群 等将内反全射光荧检与同测步荧光
相结
， 考察合一了种溶水性啉卟玻璃在水%界上面 激发的、发 射以及步同荧光谱的信息。光
!($［ ］［!"—((!’ ［!］(8 、］@;00 、F5672A6?C3 9、3.%6.0% BE
套
纤传光导温低装和荧置分光光光度计偶，联 配合 步荧光同技术举例说了明斯斯基低波荧光技温术 的高效鉴能别力 它，望成有分析为多芳环烃常规分 析的工。具用恒能 同步扫量描斯和波斯95 4;:060 和; 217?22［!8# 等］结合 波长同恒步光分析法荧最和小二乘法同［ #!(
了］环芳烃多的光荧谱， 并应用于光实际样中多品 环芳烃测定的， 为具有增、溶 增稳、增 作敏的胶束用 体在系领该的域用应注入新的了力。
活
四、结语束
同步光分析法荧在继仍发展续 ，于由的高灵 敏度和高选它性择其成为使测痕量检组分特别是多 组分系体有的手段。其利中，恒 长波同步荧分光析法 由商于化仪品的器在存，已 环在、境生 、 材物等料 域领得广泛获应的，用 期近，带 恒能有量步同描功扫 能的商化荧品光分计业光已现出同步荧。分光析器仪的 及将进一步促普进同荧光步术技分各领支域发 的展应用和。参考文献
时测
青定霉 素 和 # ，%二’甲 氧 基 苯 青霉 素。唐 波 ［#)—!!"
!］ 等用双 倍峰配平增导%数同荧光法或拟步面 积波多数长线性双据合，组多 长线性回归和导波 数析同解荧步法光对双分体系组如邻基羟苯酸和间
甲
第
4期
［! ］ "#$% & (’ ，)*+-,/，!.0!12，3!：45
何立芳等
步荧同分析法的应用及其光进展新
・PP3
・
2P］［李 耀群（ C I "）J 黄，贤 （智-;+, +*,-CZ. ?营 学养 ，!0报40!，P（ H3）：31Q L8/+,F CC8A + ［3!］）关 群 （ 玉9+-8I J） ，胡珉 （ 锡- ;=R） ， 充王 （>+8 ）（ ’ ?? 物分析药杂 ，!0志1，0： R3/C& B8+#? ?） !2P—P5! ［53 吴］毅惠 （> -;I） ，陈 （晋 7/68’） ，申 莲 海（7/F ;8 "）? 临 床 !，00，Q! 33（ ）!：H2!2— !检杂志验 （’? #C8?6" V+? AFC ? ）［3Q ］ 淑艳 蒋（’ C+ 药?物分杂析（志’ ?，!00 0!， 02）（： !—00 R3/C & ?B+8 #? ） ［34 ］乃梁胡 ;-（ "） *赵，兵 一:（7$ I (）+ ，王媛冬（ >8 -; I） ， 杨晋 I（+ 8）6 袁，杰文 I（ +8- > ）’（ F .+C,, ?峡药学 ，海!000，! !（5 ：）3 G0+.7L+A-/,AC+# $’-8.+） #5［2 杜］莲 （ 秀- O =）" 李，昌 （荣"CS 6 ）王夔 （，+8 科?学 报 通（ 768/C@ /AF/C8A/ (##-,C/8 ，2）H!，5H （4）Q： 03—5034［5 3］曾 成伟 （: / 6），杨辉 （ +8
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英刊名： 文年，(卷)： 期引用被次：
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