交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶)
交叉配血试验标准操作规程
(微柱凝胶抗人球蛋白法)
1. 目的
为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用,保证检测结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。
2. 适用范围
适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。
3. 职责
医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。
4. 原理
红细胞血型抗原与不完全抗体(IgG ),在抗人球蛋白的桥梁作用下,经一定的离心力,产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体(IgM )直接产生的特异性免疫凝集复合物,被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中,判为阳性结果,表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体;红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部,即判断为阴性反应,表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。
5. 所需设备和试剂
普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡
6. 检测环境条件
室湿应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%。
7. 操作步骤
7.1先将供(受)血标本制备0.5%红细胞低离子介质(LIM )悬液。
7.2撕开卡的封膜,于反应胶中主(次)侧管加供(受)者 0.5% 红细胞LIM 悬液100μl ,加入受(供)血者血浆或血清25μl (或50μl )。
7.3将检测卡37℃孵育15min 取出,置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min 。
结果,表示受(供)血者血浆或血清中含供(受)血者红细胞血
型抗原相应的抗体(不完全抗体IgG 或完全抗体IgM ),供
受血者血液不相容。
阴性结果,表示供受血者血液相容。
8. 质量控制
8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用,每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。
8.1试剂质量控制方法
8.1.1即作阴、阳性对照试验:撕开检测卡的封膜,于2个反应腔中分别加入已致敏IgG 抗D 的1%O型RhD(+)红细胞LIM 悬液50μl 、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM 悬液50μl 。
8.1.2将检测卡于离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min 。
8.1.3取出,结果判定同7.3
9. 注意事项
9.1检测卡若在冰箱储存,使用前须放置实验室平衡至室温。
9.2检测卡试验前,应3000r/min离心1min ,正立放置待用。
9.3如因运输过程产生的气泡,可将检测卡放置在漩涡震荡器上震荡,使气泡漂移至胶面为止,3000r/min离心2min 。
9.4细菌污染、纤维蛋白析出、抗凝不佳的血,可产生假阳性。
9.5离心速度过快,时间过长,试剂失效等因素均可导致假阴性。
10. 相关文件
中山市生科试剂仪器有限公司《抗人球蛋白检测卡说明书》