葡萄球菌链球菌
目录
摘要…………………………………………………………………1
Abstract……………………………………………………………1
1. 材料与方法…………………………………………………… 2
1.1 材料…………………………………………………………1
1.1.1 材料………………………………………………… 2
1.1.2 培养基……………………………………………… 2
1.1.3 试剂………………………………………………… 2
1.1.4 仪器………………………………………………… 2
1.2 方法……………………………………………………… 2
1.2.1 革兰氏染色的方法…………………………………2
1.2.2 甘露醇发酵的方法…………………………………2
1.2.3 凝固酶试验的方法…………………………………2
1.2.4 过氧化氢酶试验的方法……………………………2
2. 结果分析………………………………………………………3
2.1 革兰氏染色的结果分析…………………………………3
2.2 甘露醇发酵的结果分析………………………………… 3
2.3 凝固酶试验的结果分析………………………………… 3
2.4 过氧化氢酶试验的结果分析…………………………… 3
3. 讨论…………………………………………………………… 3
3.1 结果讨论………………………………………………… 3
3.2 操作过程中可能出现的问题…………………………… 3
4. 结论…………………………………………………………… 4
5. 参考文献……………………………………………………… 4
葡萄球菌链球菌的分离鉴定
摘要:在微生物学中,葡萄球菌和链球菌都属于革兰氏阳性菌,具有致病性。主要了解两种细菌的形态、排列、生化特性以及主要的鉴别特点。通过用革兰氏染色,甘露醇试验,凝固酶试验以及过氧化氢酶试验的方法来看链球菌和葡萄球菌的不同,从而来证明A组为链球菌,B组为葡萄球菌。
关键词:葡萄球菌;链球菌;革兰氏染色;甘露醇;过氧化氢酶;凝固酶 引言
葡萄菌属(Staphylococcus)属微球菌科,葡萄球菌属,本菌属分为20多种
[1],为排列不规则的革兰氏阳性球菌,广泛存在于自然界。寄居于人和动物的口、鼻、皮肤、毛发等处的葡萄球菌是正常菌群成员菌群之一。 有致病性的葡萄球菌主要是金黄色葡萄球菌,可引起人和动物的化脓感染,也可造成人类的食物中毒。此外,还常常是其他传染病的继发感染或混合感染的病原。致病性葡萄球菌的鉴定可通过色素颜色、溶血性、过氧化氢酶试验、凝固酶试验、甘露醇发酵试验,肠毒素【2】试验等进行。
链球菌(Streptococcus)为长短不一、链状排列的球形或卵圆形革兰氏阳性细菌,也广泛分布于自然界。本均属分类迄今尚未统一,多以溶血性、生理生化特征和抗原结构加以分类,是兽医学上重要的病原菌,可引起牛的乳房炎、子宫炎、猪链球菌病、新生幼畜脐感染、马腺疫以及家禽的某些疾患【3】。在鉴定链球菌时,主要以形态、培养特、生化试验、抗原构造以及抵抗力来作为鉴定种别的依据。
1. 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 材料:金黄色葡萄球菌、链球菌
1.1.2 培养基:金黄色葡萄球菌斜面培养物、普通营养琼脂平板、血琼脂平板、 甘露醇微量发酵管
1.1.3 试剂:革兰氏染色液、香柏油、1:5兔血浆、3%H2O2
1.1.4 仪器:显微镜、接种环、载玻片等
1.2 方法
1.2.1 革兰氏染色的方法:
(1)初染:在已干燥、固定好的抹片上滴加草酸铵结晶紫溶液,染色1-2min, 水洗;
(2)媒染:加革兰氏碘溶液于抹片上媒染,作用1-3min,水洗;
(3)脱色:加95%乙醇于抹片上,脱色0.5-1min,水洗;
(4)复染:加稀释的石碳酸复红(或沙黄水溶液)复染10-30s,水洗;
(5)吸干或自然干燥,镜检。
1.2.2 甘露醇发酵的方法:将各种葡萄球菌分别接种于甘露醇发酵管中,置37℃培养24h,观察分解甘露醇的情况。
1.2.3 凝固酶试验的方法:在玻片上滴加生理盐水一滴,挑取菌落于生理盐水中混匀,然后滴加兔血浆一滴,混匀,若细菌凝结成块则为阳性。
1.2.4 过氧化氢酶试验的方法:取2ml 3%过氧化氢溶液,加入干净的小试管中,用细玻璃棒蘸取试验菌,插入过氧化氢液下面,若有气泡产生者为阳性。
2.结果分析
2.1 革兰氏染色的结果分析
链球菌 葡萄球菌
2.2 甘露醇发酵的结果分析
B管褪色的葡萄球菌,A管颜色不变的为链球菌。
2.3 凝固酶试验的结果分析
凝固的为葡萄球菌。
2.4 过氧化氢酶试验的结果分析
取干净的小试管,用细玻璃棒蘸取试验菌,插入过氧化氢液下面,若有气泡产生,则为葡萄球菌。
3.讨论
3.1 结果讨论
在革兰氏染色试验中根据图片形状来判断菌种,在甘露醇发酵试验中根据甘露醇是否褪色来判断,在凝固酶试验中看试管中是否凝固,在过氧化氢酶试验中根据是否冒气泡来判断。
3.2 操作过程中可能出现的问题
(1)在进行革兰氏染色时,应挑取最适生长阶段的菌落(18-24h)进行图片,否则可能出现染色特性不均一。
(2)平板的制备、细菌的接种都应进行严格的无菌操作,防止病原菌的散播。
4.结论
A组为链球菌,B组为葡萄球菌。
5.参考文献
【1】《伯杰氏系统细菌学手册》(1986)
【2】黄汉菊.医学微生物学【M】.北京:高等教育出版社,2004
【3】陆承平.兽医微生物学【M】.4版.北京:中国农业出版社,2007