捕蝇草叶的组织培养
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3第6 3 第卷 期 20
7年 60月
海师范大学上学报(然科自版学
J)nu f h hi nom Uai rt( a r lces c roao ag aNr nlv s N yt Sine)a lS ei u
V . o, 16 3o.N
2007 3,J n. u
捕
蝇 草 叶的组 织培 养
瑾怡王,陈 峰军 , 国开 ,银 根周余
(海 范大师 学生命 环与科境 学学,院上海20 ) 上30 2 4
摘
要
:体离件下影条捕响蝇叶草化分苗成的若 干素因进 了研行.实究 结验表明 果 对 ,蔗 糖
浓
为度I % , 时蝇捕叶草分化情况好最 ; 萄糖作葡 源碳优 其于碳他 源;%.牛 肉的浸膏度有浓 0 3利于叶根的分及 ; B化 养基培利 有于蝇草叶分化捕数量的增苗 加; 液体培基养比 固体培养 基对 捕蝇 分草化 的生苗长更 优 势有. 关 键词 捕:草 蝇; 蔗浓糖度 ;糖 类种 牛;肉浸;固膏液培基 ; 养培基种养类 图中类分号 :69 文献标 识 : 码文章编 号 : 10-170 )3 20 59Q4 A 0035(0 7-0 - 8 0 0蝇草捕( i ama pst E l Do e ) ucua ls 为茅膏科捕蝇菜草属食虫植物. n i i 该属 只一种有, 产美国南原 、卡
北莱那 州罗 的海平岸 地 区 , 新原泽西和 弗 尼吉 也亚分 布 有, 要主 长在生 半 稀树草 原沼的 、 湿泽 地周围 …. 捕 草蝇 多是年 草生 本, 属于低 植矮 物 ,高 不过 c 茎 很1 , 短构造片 分 十特 , 5m, 叶奇 为具有 一 定观 赏价
值的保环物. 植捕草蝇常规采用种播扦插的繁或殖方法 ,但播种的幼 苗长慢 ,势 扦插苗活成底. 率国外 内已采用成 熟的叶和片花序作梗外植体行组织培进养 快速,繁殖捕草蝇5 引 实验 本以叶作植体对外 .I 体条件离影响下蝇草叶分化苗的若干捕因素行了研究 进 为捕蝇,草大规模生产的推广提供和据依.
1材 料 与法方
11 验实 材 料.
捕蝇草 ( iaamsp t l) E试管 苗本由校培室组供. 提oDe u cauls , n i i
2 1 培养及基培 养条 件 .化分培养 基:3 S+ 0 gL5 . 1 M K/ .m/ T 继培养基 代:3 S0 + g5LK 0 1 + 【LAI, 1M/ .m / T. m g/B 化和 分
继代培基的养脂琼度浓均 0为 %5, . H . 8 p.5 5 培养件条为 :培养温度为室5 2 ( 光照强o 10度 2 0;I2 ±
)C, 50 —00光照x 1 h 2d/ 1
3 实验方 法 .
、
1
13 蔗糖浓度对蝇草叶捕化分成苗影响 的. . 取 长1m 0 左右 , m片面荚 积 m2 0 m左右成的熟 , 叶接种蔗糖到度浓别为 0分 1 % ,, %的化 ,分% 3
5培 基上 养,每 一理处 52叶, 试验 重 复 次一,0 d8后 统试 验结计 . 果 1 23 糖的种类对 蝇捕 草叶 分 成化苗 影的 响 . .糖 的类种为 蔗糖 、 萄糖 、 糖、葡 乳果糖 ,浓 度为 1 . %法方同 .. ” 1“3 . 1 收 稿
期日 : 06 1 — 0 20-2
基金项2 :目海市上教育 发基 金展 3 ( Z2; 0 D0 )上海 自市然金基(5 R 4 9)上海师范 学博大士研科 动项 启目. 0Z 1 0 3 ;
者简作 介 王瑾:怡(94 , , 18 一)女 上海 师大范学生 命与境环科学 学院科本 ; 生周余根 (6 9 , 1)上海师一大学生范 与 4
命境科学学环院教授 ; 国 银9 (一) 7上师海大范生命学与环科学学 院副境授.教开 17 ,
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m海上范大学学师报(然自学科 版)
2 007往
13 3牛 浸肉膏对捕 蝇 草分叶化 成 苗 的 响影 . . 牛 肉 膏浓 浸为 度00 1 ,% ,.. % , % .1 ,每 一. 处理 2 .%, 0 035 07% 叶 0 他试验, 方法 同“ . ”.其 311 . 13 培4养 基种 类捕 对蝇草 分叶化 苗 成的 响影 .. 养培 基类种 13 ,为6 附5加激素 K /S M N,B ,T 度浓 为 0 /5 .mg,L试 方验 同 “. 法 ” .13 1. 315液 体 培 养基对捕蝇 草分 苗 生长 的影化 响 ..取 分 培化 养 基上似相的 芽 , 别移 人丛 体液 和体固 化分养培基 , 分 一 处每 理1, 验 复 重一 ,次 0 丛0试 d3后
统 计验 试结 果 .
2 果与分析结 2
1 蔗糖浓 对度 蝇草 叶捕分化 苗的 影响 .
周康等 在蝇捕草序轴培花养时所用的是1 2S / M基本培养 ; 基曾君宋 等 也捕在蝇草组织的培时
使养用 了21MS本基培养 ;基 /贤陈等 在对 于兴捕草蝇 快速 的殖技繁术 研究 的中发 现 M,培S 养上基 ,在 捕 蝇草叶片 或 柄叶点芽 出现情 远远况 差于在 1 2 M/S培养 上基的 诱导情 况, 在而 更低基 本培 基 养度 浓1 5M/S 养培上 基的生长和生根现象更 ;好iG —oWa gnJ n 等 对捕 蝇 组织培养草的研 究则表 明 3M,基 培本基 养1 S / 上, 蝇 草叶 的片分 化率及叶 片生
长情况好最. 于 捕蝇的最草适长生p 捕 鉴H值在5 5 , 右. 故在 左考参以上 文 献 , 后本实 验运所用 基的 本培养选 取基1 3,H值 为5 5进行蔗糖浓度 的验试. /MSp .
1表蔗糖浓 对捕度蝇叶草化分成苗 影响 的
:注分化 率 =分苗化叶 /接种数数 × , %叶苗数 以有根 系 的小株植为计统标 准
表 1
的 结果表明 , 糖浓 度 对捕 草蝇叶 化分 苗具成 有明 的作 用 显 .浓 度糖 为0 时,的 基 能部 蔗 蔗 % 叶 较 早出愈现伤组织 0 (2d 右左 ) 很快 且 就发萌 出芽 , 小而萌发 产 生的芽 生 长速 基度 本滞停, , 然 叶数 及量 积 面增长缓慢 . 糖 浓度 蔗 1为一 % 时 ,5 3 %2d左右 , 叶柄 基 部出现 愈 伤 组织, 03 左d 右开 出现 始 小. 蔗芽
糖度 1 浓上%小萌芽后发其余 蔗较糖浓度培的养基生快 ,长 分的完整小植化株数 叶及也数 明多显 .叶 、长 端部肉质荚片平均面积的及根以的度也长优其余 于糖浓蔗的度培养基. 糖浓蔗度 为3% 时, 蝇捕草 的生
长况 相似 情于 1 蔗 %糖 浓 度 ,是 分 化的数 和 苗数叶等 都 差 于1 糖蔗浓 度. 当蔗糖 度浓上 升 到 % 而但 5 % 时,褐 死亡 化叶的 剧增 ,叶 基柄部有 粉红色 棉的状絮膨 , 大似愈伤组 织 ,有 的芽分化 , 鲜 即使 有分 化 也多为 丛芽 生 , 点法统 苗数计 无 .此 ,因糖 浓度 1为 的 养基培 最宜适捕蝇 草成 熟 叶的 化 分和 苗生的长 . 蔗 % 体 培离 时 养 是培, 养基成份 中 用 最量大 的 有机 类 物 质 作,用 除了 为 作 重要 的碳源 和 能量 物质 糖其 外, 还 能 维培 持养基的 渗 压透 糖J的 含量 植对 物细胞 生的 和长次 生 谢产 物 代形 的有 成 显著影 ,响. 含
过量低时 , 不能满细胞生长足和陈新代谢的需 要 . 本试验中蔗J糖浓度含量过时高 由,培养于基的渗透
过压 , 严高重影 了愈响伤组 织的形成 和 苗 分的 化,叶产 生严重 化褐 至死甚亡 现的 象. 于培 养 基在 没有碳 至 源 的条下件捕蝇 草成 熟也叶能 较早 地产 生愈伤 组 和分织化 苗 , 可能 与 增殖 培养基 上 的 素激 后效应 很有关 , 还要 进一 需步验证 . 这 2 碳2 源 类种对 蝇草捕叶 分苗化的 影 响 . 碳源 种 对于类 蝇捕草 的叶化分 成 苗的 影响较 显著为
.
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第3o 期
王
瑾 怡,陈 军峰 ,开国银 ,周余根 :蝇捕草的组 织叶养培
9 1
:注 小植丛株重鲜是由单叶指化分出来 小的植株的鲜团重
表
2的结果显 示, 种糖 4 然 虽 都使 能捕蝇草 产叶生 苗的 分 , 分化化 结的果 却 在 存著 显 差 异. 萄 但 糖葡对 于捕蝇 草的 叶的分 化最 有为 利. 由于 葡萄糖 是大 数多生物 以直可 利用 的接量 能源来 , 不需 转要化就 能 植使 更有 物地 效收吸 用利 , 而使 蝇 草单 捕叶分 出化小植的 丛株 鲜重最重 , 分化从株数 及 均平 叶 也较 数 其余 碳 的培源养 基 中好 .要 的平 均面 叶也积 位此于 种碳 4源培 养 基首的位. 2 牛3 浸膏对肉捕 蝇草 分叶成化苗 的 响 影
.表3 牛 浸膏对捕蝇 肉草叶化分成苗影的响
3的试验 结果 表表明 , 当 养基 培中 牛肉浸膏的 度为浓0 1 .%时, 捕 草蝇 叶的 化 叶分 及数 根 数与 不添 牛加肉浸 膏的培养 基 中叶分的化情 况 相 差大 . 随不着牛 浸膏 肉浓 度增 的 加到 03 时, 分叶 化 的 植小 .% 单丛株 的重 增加鲜 ,分 化的小 植 株数 、数 根及 数 优 于 添加 牛 肉不浸 的膏 养培基 . 虽 叶及然 根的数量 叶较 , 叶 的长多 和度积 却面 不添 较加牛 肉膏浸的培 基 中的养 很多 小 ,分纤十 细, 程壮 度不及前 者 .但 根 随着 牛粗肉 浸膏 度 的浓 一步 增加 ,进 达当07 .%时 , 普叶 遍 出死亡现, 少 现出存 和活 分化. 度 1 为 浓 极%时 , 片 叶 则 全部 死 亡. 可是 由于牛能 浸 膏浓肉度 过高使 培 基养 中渗 压透改 所变 致 这 由.此 见 ,可肉浸 这膏 类有 牛 机添加 物 叶及对根 分 化的一有定 的促 进作用 且,其 浓度为 30 时的效果 最为 著 ( 显1. . % 图) 方 玉白 人等 现发 ,虫植物食如 捕草 蝇 ,在培基 养中入加 一 的定 机添有加物 ( 肉 )有利汁于 组培 的苗 增殖, .们我的 试则证 明验了定一 浓度的牛 肉浸 膏同样 利有 食于虫植物 蝇草 叶的捕化分 和组 苗培的 殖 .
增0
%
0 % .1
0 3 .%
0.
% 5
07 % .
图
不同1浓 度的机添有加对叶及物根 分化的效果比较
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i上海师
范大学学报( 然自科版)学
2 0伍 7
240 养 基培种 类 捕蝇草 叶分 对成 苗化 的影响 本实.验 中 将3 ,I N 3基 本种 培基 养行进比较 3种培.养 基差的 是异 3I/ MS B , 这 /M 的大S量 元素浓 度 低均其于 他 两培 养种基, 微 而 量素 的元度浓则 高 另两于 种 ;外另, 培养 基中没有 氨 甘酸 .
表B4 养基培种类捕对草蝇叶分成化苗的 响影
注:
个种类的每养基培中 添加激素均的为 0
5 KL . /m g
T
表4的 试 验结 表果明 ,养基 种 类 对捕蝇草 叶化分成 苗 有一定的 影响. 培 养 基中, 叶分 化所 出 培 单B
来的数叶大于其他两量种培基 , 养而然, 叶从生的状况来看 , 长 培B基养 中的化叶分细小 密、 集, 丛以
生主, 为难较 分株 .其 他种 培两基养 分 中 化叶虽的然 数量 上较 少 ,但 较为饱满 , 叶 面较积大 /( 1M S培养 基 3中 叶积最面大 较 )分 易株. , 根系 分化生 长方 面, 养基 培 中根 的细长 / MS培, 养 中 的根 比基 较粗 壮 ,B 3 1 根 毛 发 , 培达养 中基略 差 1于 S3培养 基. / 因M此 / ,M1 3 基 本培 养S基中 根 系的 育 最发好.
G n—a g iWo n 等 在文中 引的 述 培养基M中捕蝇草的片叶分是化由于 N / HJ S N O之 比,M 而S 1和3S的 N / 比H 一是致的 ./M O N 者笔 认为其 中的分化 异差可 能 与 甘氨 酸的 有无 关 , 有在 因 于同 原
有甘 氨酸的 13 /MS 和N 培 养基 中 ,试 次 的验 株植分化情 况并 有 没大太的 差 异 .上 所述 , 培养 基6 此综 B 有利 于丛 芽生 分的 化 增殖, 1 S培3养基 在 整则体 上有 利 更捕于蝇 叶草 分化 苗的生 长 而. M /
B 5
N6
图2 3种养基培分化对苗的影响 比成较
2 5体液 养 培对 基捕 蝇草分 成化苗生 长的 影响
. 表5 液 体培养对基蝇捕分草化苗生成长的 影 响
表
的结果 5 明表, 液固液和体 培 养 种方两 式对 叶分成 苗化 的生 长显有 著影 .响 固 在体培 基 中养已 养培 5 左d右的 丛芽 ,别转 到固体 和体液 养培基中 周1后 , 之培体 养里基的 芽开丛 始较有多 的嫩 出 叶0 分 液现 , 生 比较长 密 集 ,且 在后之 的整个培 养 期 内 间, 有大 断量生 新密叶 出现.集 固 培体养基 中 芽则丛 在 不而
1 周半 至2之周后明才显嫩叶出有 现 且不如液体培,基养那么中集密 另外.液体培养基中 植株根上的系
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第
期
3王
瑾 ,怡陈军 峰, 开国银, 周根 余:捕 蝇 叶的组织草培养
根
毛数量 明 显 较固培体 基 中多 , 苗也 更养粗 壮 .加
产生这 一差异的因原 是 在,体震荡液培 养中生长植使株的各个部 都能在更大程分上充分接触培度 养 基 但相对于,固培养体基 液体中的动流性支和持较 ,差 株分植情化显得就比较 乱 杂 ,时有 同叶又出上
分化现 的 现象 .
3
小
结
( )培
基中养
的糖浓对捕蝇草叶的分化有度显 著的响影 1. 糖浓度过高无则使捕蝇法草发生叶化 分 , 导致 其
严重褐 甚化至死亡 . 试 验本结 表 果明 %,的 蔗糖浓度对 蝇 捕叶分草化 芽成和后 生期 最长 .好源 1 碳 种类 以葡萄糖则 为优 分化后 的生,长情 况 显明优于其 他碳 . 芽源 ( ) 牛肉 浸膏 的 加 对添 蝇捕草 的叶芽分化 一 有定影响. 浸肉 膏的 度在浓0 3时 化 的叶 ,数 量 牛2.% 分
最多 .
( )
养培 基 种类 对 于捕的蝇 叶草化分成 苗 一定 有影 响.培 基养分 化 叶数量 最 多 体 生,长 好最 3 B整 的为 13 / M S养 基 培 .( 液)体培 养对捕蝇草 叶分 化 的生 苗长优 固于体培 养 4.
考参献文 : f
] P R P OE O PEJR P OOP a iur 8 lh o f【d. eO , oi r bsr,9 6 1 1 I O T A L ,ITO A L . Cr v sp n o ew r M] rg Tmn e s 19 : 5e—1 . n aoo tlP 6
[ ] —GOW AG , WA —GSO K,RMD N A K rir gp note u yt pb hoc l [r 2 ] INJN KN O I O —O G P R M e. opaaof ns a y st ouu J eo i Vl r f t P
a C tlT su Ord a u t r 03 2, :—5 9. nl e li s ea g nC u e 2 07 9 n l8
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S u yo l r la fo Di n e s it l t d nCu t e oe f m f ou a u cm u r uap Els i
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(
责 编辑 任 :
吴澄
)