异丙肾上腺素对家兔心房钠尿肽分泌的影响
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边 大 延学医学 学
２０ ０报７年３月 ３第 ０
卷
第 期１
・
１ ・
［实验究研 ］
丙异肾 腺上 素对家 兔心房钠 尿 肽 分泌的 影
梁哲龙 金响 哲元崔勋 ，
（ ， 础． 医院 学生 理学与病 理生 理学教 研 部；． 白 山 功能 子因省部 共建重 点 验 实室 ： 大 学 ，边林 吉 １延 ０３ ）１基２长 延 吉３０ ０
［ 要］ ［ 摘 目的 ］ 观 察８ 上腺肾 素 受 体激 剂动 丙 异上 肾 素 对 心腺房 钠 尿 肽 Ｎ（ Ｐ分 泌的 影 ，响讨 其 机Ａ ）探
．制［ ］法 搏用 动的 房心灌 流 型模 放及 射 免疫 技术 观 异察丙 肾上腺 素 对ＡＮ 分泌、 磷 腺 酸苷 方 采Ｐ环 （ Ａ） 出量及 心 动房力 学变 化 的 影 响．结 果】 丙异肾 上腺 素 可 显 明 制 Ａ抑 ｃ ＭＰ逸 ［ ＮＰ的分 泌， 著增 加 心 显房
出搏量及 环 磷 酸 苷腺 选量出； 白激 酶非选 择 性抑 制 剂 Ｓ ａｓｒｏｌ 蛋ｕｔｐｒｏ ｅ可 缓 减异 肾丙 腺上 对素Ａ ＮＰ分 泌ｎ的抑 制 效应 ．结论 ］ 【肾上 腺８素 受 激 体剂 动 异 丙上肾 腺 素 抑 Ａ制 Ｐ分Ｎ 泌 作用由 ｃＰ依Ｍ 赖 性 信号 传Ａ
导 途 径来 现 实 ．
［ 关键词 ］ 心 房钠 肽 ；尿 丙肾 上 素 腺； 激白 酶类 苯； 平 ； 地 异 蛋 硝兔 ［国分 类 号 ］ ３ １Ｒ３中 ．３ ［ 文 标 献识 码 ］Ａ 【 章 文编 号］ １ ０． ４８ ０ ２１）０ —０ ３ ０１０２ ０ ７（ ０ ０ １． ０
Ｅ ｅｆｔ ｉｏ ｒｆ ｒ ｎ ｌｏ ｔｔ ｉｌ ｎｔｉ ｒ ｃ ｔ ｐ ｉ ｐ ｓ ｃｅ ｅｉ ｉ ｎ ｂａ ｔ ｒａａｆ ｃｓ ｏ ｓ ｐｏｅ ｅ ｎｏ ｒａａ ａ ｕｒ ｅ ｉ ｅ ｔ ｄ ｅ ｒｔ ｎｏｒ ｂ ｉ ｔｉ
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（ ．ａｅｔ ｎ ｈｓ ｌ ａｙｄ Ｐｔ ｈｏ ｓｌｙ， Ｃｌ ｇ Ｂ ｓ ｃｄ ｅ ２ ＫＬｙｂ ｒｒｔ ｇ ｓｎ Ｆｎ ｔ ｌｎ ａｒ ｔ１Ｄｐ ｍｅｒ ｆｔＰ ｉｙｏ ｎ ａｈ ｐ ｉｙｏ ｏｏ ｏｇｇｏ ｅ ｅ ｌ ａｉ ｏｅＭｉ ｎ； ．ｅ ａ ｏ ａ ｏｙｏ Ｏｒ ａ ｉｆ ｃ ｉ ｍｆ ｕ ｏ ｃ ａ ｃｓｉ Ｆｏ ｆ ｔ ａｇ ａ ａｎｎ，ｉｉＭ ｒ ｄｃ ｔ Ｙ ｎ ｉｎ Ｕｎ ｅｉｓｙ Ｙ， １ ３０ ， ｉ ｎ， Ｃｉ ｏ ｈｅｎ ｂ ｉｕ ｔ ｉｈＣ Ｍ ｏ ｎ ｓｙｏＥ ｕ ｉ ： ａａ ｂ ｎ ｖｉｒ ｆ ｏ ｔ ａ ｔａ ０ ３０Ｊｌ
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心 Ａ 房Ｎ是 由Ｐ心肌 细 合胞成 并分 泌 肽 的类
激
中 房 的心 械 机 性 动 活 与ＡＰ Ｎ分 泌 关的 系 密 切 Ｊ异 最 丙肾 腺 上 （素Ｓ是 非选 择 性肾上８腺 素 ． Ｉ Ｏ 受）体 （ｄｅｅ ｇｒｃｃｐ ，￣ｏ ａ ｒｐ ｎｒ ｉｅ ｅｔ ｒＡ
［Ｒ） 动 剂Ｓ ，Ａ — －激 Ｉ ＯＢ
Ｒ素［
主 要 能功是排钠 尿 、 利张 管及血抑 制 肾素 一¨， 扩 血管 紧素一 张固酮 系统醛活性 ， 与 压 调节血 和碱酸 参
平 研究结果
明表，衡． 影响Ａ Ｐ Ｎ泌分的因素校多， 合物复可偶 联Ｇ蛋白 共 激，腺苷酸活化酶， Ａ 环Ｐ 使Ｔ 转变
成ｃ ＭＰ 进 影 响心而房 机的 性械活动 ．利文 ， Ａ本 用家 兔搏动 的 心房灌 模 流 型 观察，了 丙异 上腺 素肾
［ 金 项 目 ］ 国家 自 然科 基 学金 ０（ ６０ ３基 ３２ ０３ ［） 稿日 期 ］２ ０—０ 收１ ０１６５． ＊ 讯 ［者作 ］ 崔勋（ ９ ４ ） （男鲜 族 ） 授教， 士 ， 通１ 一 ，６ 朝， 博 研 究方 向为循 环生 理 学．
对心房 Ａ Ｎ Ｐ 泌 的分影 ，响 并讨探 了其 制 ．机
１ 材 料 与 方法
１ １材 料 实 验 动 物 取大耳 白 ， 龄 为 兔 ３月． 兔
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・２
・
．＿ — ｏ Ｊ ｕ ｌｎ Ｍ ｆｅ ｉｌ ｅ ｃｃ ｎ ｎｉｎｖｒＵｉ Ｍａ ．２ ０ ． Ｅ－ＬＬＬ【 ｏ ｒｕ ａｄ ｃｎｉｅＹ ｂａ ａ ｉｓｅ ｏｔａ Ｓｙ ｒ ０ — ∞ｌＩ ０Ｎ．ｏｕ２∞ ７Ｖ ｏ —昱 ｌｌ１ ｚ《 １３
１∞ ● ∞ ●● ●加 ●● ， １●● ●Ｊ ０ １●● Ｊ ● ● ●■● ｍ
● ， ５１体ｄ重 （ ．为 １８０ ±２ｋ ， ．） ｇ雄 不雌 ，限 延由 大 边学
学部实医验动物科提 供， 养 境环 温 为 度２饲 ５℃ ， 湿
先以 １ ｌＬ硝 苯地 平 行３ 个 循环， 硝 苯 地 平 存 ／ ｍ ｏ 在 在再追下 加 丙异肾上 腺 行 素３个循环 ， 观 异 察 丙肾 上 素 对 心腺 房 搏 出量 、 磷 腺酸苷 逸 出量 及心 房 环 ＡＰ分 Ｎ 泌的 影 响；验 同 实 ３ ２方 法 验，予 实 给 ： １ｍｏ／ 蛋０白 激酶 非 选 择性 抑 制 剂Ｓａｒｓ ｏｉ ｅ． Ｌｌｔｕ ｏ ｐｒ ｎ 进 行 实验． 房 灌流 液 中 ｉ ＮＰ的 测 定 采用 Ｃ ｏ ｒ心Ａ ｈ 等 ｌ的 射放疫免测 定法进行 磷 ；酸 腺 含 苷 量测的 ３ Ｊ环 定 采用Ｃ ｉ【 放 射的 免 疫 测定法 进行． 计学 分 ｕ等４ 】
统度为 ７． ０％ 放免疫射测检 试盒 剂 购自北 京邦定 泰 克
物生技术公 ， 用试司 均剂 自购 国 美ｇＳ 公司 ．所 ｉ ａ ｍ １２ 方法 ．２ 用 ／ｇ０ ｍｇｋ 巴比 妥钠 醉 麻兔家后 即立
开
取胸 心脏 ，出 离剥 左心后房固 定于 Ｃ 等ｏｌ研 制 ｈ３ ］
的心 房 流灌装 置 ．上予 宜适 的 连 电续刺 激
给（． ， ０ Ｖ０，． ， １ｚ ｍ２Ｌｍｉ 的 速 ０３ ｓ ２ｍ ４～ １ Ｈ３ ） 以 ． ｎ／
度
向心 房持 灌流 氧饱续 和 Ｈ的 ＥＥ Ｐ Ｓ缓冲液 （ Ｈ值 ｐ
析 ：ｉ Ｐ １ 用．ｒ ｍ ３ ０ 软件 进行统 计学处 理，ｓ 所 有实 验数 据
进行 单因方 素分差析 和ｔ 检验 ．
结２ 果
为 ４７， 分 组 成 如 成 （ ．）下其 ｍｍ／ ： ｏ 化 钠为 ｌ）Ｌ氯 １ ０ 氯化钾 ８为４ ７ 二 氯化 钙 为 ２ ５ 二氯 化 为 镁 １．， ．， ．
１２， 碳 氢酸钠为 ２ ． ， 萄 为 １糖． Ｅ Ｅ，．， ５ 葡 ０ ００Ｈ Ｐ Ｓ 为 １ ； ．０ 牛血清 白０ 蛋为 白 ／１ ．Ｌ 流 ６灌 稳ｎ定后 ｇ， ０ｍ ｉ
２ １ 丙异肾上腺 素 对心 房Ａ ． Ｎ Ｐ分泌 、磷 酸 苷 腺环
以
ｍｉ ２ｎ的间隔 ４在条℃件下 集收灌 流液 用，． 待 实
１ 验 将刺电激 频率固 在 １定３Ｈｚ 每 １ 定ｎ为 ： ． ， ２ ｍｉ
逸
出 及量 心 搏 出量房 的响 影 果结表 明 与对， 照 环循组 比 较， 丙 肾异上腺 素 明显抑 制 心 房 Ａ Ｐ分 泌， Ｎ
１ 个实验 环循， 过 １ 循 环 的个对 照 之后 ， 经 以
１ ０ｌ 丙Ｌ 上肾腺 素行 个 ３ 环循 ， 心 房 ．察 ／异 ｏ 观 ｍＡＮ Ｐ泌 的分化变 ；验 ２ 经过 循１环对 照 之后 ， 实： 个
—
时同显 增著 加 磷环 酸腺 苷逸 出量 心及房 搏量 ， 出 均
显有 著 差性 异 Ｐ（＜ ００， ． １＜０Ｐ０ １， 图１ ．０ ） 见 ．
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ｆｔ ｎａｎｍｂ ｒｃｒｉ ｕ ｅ ｏ
Ａ：
房Ａ Ｐ分 泌量 ；环 磷酸 苷腺 出逸 ； 心 房 量 搏量出 心 Ｎ Ｂ ：：
与对Ｃ循照比环，＊Ｐ较
．ｌ ＜Ｏ０，
Ｐ＜ＯＯ
．ｌ
０图１ 异 丙 肾上 腺素 心对房 Ａ ＰＮ 泌分、 环 酸磷 腺苷 逸 出 及量 心搏房出量 的 影 响
２２Ｌ 型 离子钙通道 阻断剂 对 丙 异肾上腺素 致 心 ．
－ Ａ ＮＰ分泌的 抑 制效应， 而 磷环酸 苷生腺 成与异丙 肾 上 腺 相 素比较 虽 有减弱 ，所仍 明显 高对 于照环循 但，
相 较比有非 显著 性常异 （ Ｐ差＜０ ０ １ ，．０ ） 见图 ． ２
２３ 蛋 白激酶 非 选 择性 阻 断剂对 异丙 上 腺肾 致素
．
房 Ｐ分Ａ泌的影响 Ｎ
结 表果明 ，０ｍ１／ 用 ｏ． ｌ 硝Ｌ苯
地
阻断 平 Ｌ 型离钙 子通道 后再 予 给丙异 肾 上腺素 ． 时 ， 苯地平明 显抑心房制搏 出 ，量硝 单 独与予异 丙给 肾腺上素时 比较相房心搏出 量间差 异有计统学意义 （＜Ｐ ０ １０ ， 不 能并 改变 异 丙 肾 上 腺对 素心房 ０．） 但
心房
Ａ Ｐ分泌 的影 响
Ｎ果 表结明 ， 白激酶 非选择
性蛋抑 制剂Ｓ ｒａｏｉｓｅ ｕｔｏ ｐ ｒ明减显 缓丙异肾 腺上对 素心 ｎ
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边大延医学学学报
２００７年 ３ 月 ３第一 ０一 ｌｕ ０卷 ＥＩ第 ∞ 期 ｃ ｚ。《加
∞ ０
・
３・
房 ＡＮ
Ｐ分 泌抑制效的 应， 时同显亦著 抑制 心房搏出
逸 出量
与 照对 环循比较 显明增加 ，单 独 灌注 异 丙 与 肾 上 素 的腺结 果相比 较差 异 均有 统 计 学 义 意
（ Ｐ０＜０ ） ．１．
量
与，单灌 注独异丙肾上腺 素 比时 较 异有，统计 差学
义 （ 意＜０ Ｐ ）０加 用 ａｒｓＳｏｉ后 环ｅ 磷酸 腺苷 ．１ ； ｔｏｐｕｒ
ｎＩ ｏＥｌ ｔ圜Ｉ （ｍ ｌ）一 ０ｌ．Ｄｏ／ ｌ）．（ｍ ＆） ８ ｕ １ｐ ０Ｌ５＋（ ０ｍ ｍ Ｚ）］ｃｎ ｒ ｓｏ １ｎ ｏ ０．Ｌ／ ｉ１ ｍｌ ｓ Ｌ１ｎ ｄ囹 ｔＯ ｍ（１ ）０１ ｎ ￣ （ ０＋ ０ｏ ａ ．／ Ｉ ．
： 房ＡＡ 心 Ｎ分Ｐ 泌量 ； ： 磷酸 腺苷 逸 出量 ； 心房搏 量 出Ｂ环一 Ｃ 与：对循环照 比较 ，Ｐ ． ， ＃Ｐ＜Ｏ０与异１肾上丙素 比较 腺，Ｐ＜ Ｏ ， ０ ＃＜Ｏ ＃０ ． ；５ ０ ＊． ＊＊ Ｐ＜ ０Ｏ， ＊＊ ＊Ｐ＜００ １５． ｌ０ ．
２图硝 地苯 平， ｔｕ ｏｏｎ 对 丙 异肾 上腺素引起 心房 Ａ Ｐ分 、 磷泌酸腺 逸苷出量 及 房心搏 出 变量化 影 的 响 Ｓａｒ ｓ ｅ ｐｉ Ｎｒ 环
Ｌ 钙离型子通道 内 流 的钙 子离 ．实 结验 还 果 ，示＿ 本 在
３ 讨
蛋论 激 白 酶 非选 择性 抑 制剂 Ｓａ ｓｍｉｏ 在 ｅ异 下 丙 ｔｐ ｒ ｕ 存
ｎ 上 腺素肾 明仍促显 心进细房 内胞ｃ ＡＭＰ 的成生 ，但可
异
丙肾上 素 腺为非 选 性择８Ａ ＿Ｒ激 动剂 与， 它
后 合，通过 苷鸟酸结蛋 白合偶联 激活腺 苷酸 环
化 ，酶 使细胞 内ｃ Ｍ水Ｐ平 高升， 而 激 活 白蛋 激 Ａ酶
进Ａ 使细，胞膜上钙离 的通子蛋道 白磷酸化 ， 使致离子钙 内 流增多 通过， 导 钙 释放诱 制 机释 更 多 放的钙 再离子［ 引． 本实 验果结 示，， 丙肾异上素可 明腺显加增 心 房组织磷环酸腺逸 出量苷， 明 抑制 显兔家心 房 Ａ 的Ｐ Ｎ分泌 ， 异示 丙肾 上 腺 素激 活 苷 腺 酸环化 酶 ， 制 提抑 Ａ Ｐ的 分是泌细 胞内 生成Ｎ增 多 的 功 能 现 表．
减
缓丙异 肾 腺上素 对Ａ ＰＮ分 泌的 制抑效 应 ，示提异
丙 上肾腺抑制 素 Ａ分Ｐ 泌的过程中 有 ｃＭＰ 蛋白激 Ａ 一 酶信Ｎ 传导途径号 介入的． 上 述 ，所肾 腺上受体激素 综Ｊ ３ 活剂 异丙肾 腺上素 家兔 对房 Ａ 心Ｐ的泌分 有抑具 制
Ｎ效 ，应通过 ＭｃＰ赖 依信性传导途号径 实现． Ａ ［ 参 考 文献 ］
报道 据 ，离在体搏的心房动流模灌型中细 胞通 过型Ｌ 钙离 通子 道内的钙流子离对心 房 ＮＰＡ分的具泌抑
有［
］Ｄ ｏ ＢＪｒ ｓ ｉｉ １ｅ ｌ ＡＢ， ｅ ｎ ｌ ｄｔ ｏｎ ｅ ｂ， Ｖ ｓＡ ｒｅｓ Ｔ，ｅａ ． ａｉ ｅ ｔ １ ． ｒＡ ｄ ｐ ａ ｄｐ ｔ ｎ ｒａ ｒｔｒ ｐ ｎ ｅ ．ｔ啪 ｏ Ｓ ｉｅ ｔｎｏ ｎ ｏ ｅ ｎ ｔｔｉ ｅｉｅ ｏｓ Ⅱ ｕｏｃ ｓ 衄 ｕ ｎｃ ｏ ｆ ｉｊ ａ ｏａ ｉ ｘｒｉｔ ｔ Ｊ ｉ ．＆ １ ，８８８ ｔａｍ．ｙｒ ａｃｅ ｃｔ ｒ ｓ］Ｌｒ ｄｌｌａ ｓ ｎ ａ［ ， １９ ：９２ ［ ］Ｃ ｉｅＷ ， ｉ Ｓｙｅｓｅ ｆｂ ｌ ｆｒ ｈＡｓ２ ｕＸ， ＪｎＪ Ｆ ｎＨ．ｕ ｔ－ ｃ ｃｅｏ ｃＭＰ ｏ— ｐ ｐ ｉ ｐｏｓ ｉ
ｐ ｏ ｉｔ ａ ｅ ｅ ｕ ａｉ ｔａ ｒ ｒ ｔｅ ｔｅ ｒ ｓ ｅ ｈ ｅｄ ｅ ｓｉ ｒｓｇ ｔｌ ｎｏ ｒ ｍｔｉａｅｉ ｐ ｐ ｉ ｄ ａｅｓ ｒ ｎ ｏｆｉ ｌ ｕｃ ｄ
作制用 ［Ａ Ｐ在 心 肌细 胞 内的 泌 依分 赖于钙离 子 ．Ｎ
的存在 ， 胞 内 离钙子浓 度越 高，Ｎ 细 Ａ Ｐ的释放 越多 ．
［］ Ｆｒ ｈ ｒ ａ ｏ，２ ０４１３ ： ９ Ｊ ． ．ｕ Ｐ Ｊｍａ ｌｃ０ ，５ （２） ２５ ［ Ｃ ｏＫ］ Ｋｍ， ，ＨｍＫ Ｈ ｅ，ａ． ｅｈｎ ｎｂｓＭ ３ ｈ Ｗ ｉＳ ｉ Ｃｔ １． ａｅ Ｌａ ｉｏ ￣ ｓｆ
ｒａ ａａｒ ｒ ｔ
ｐｐ ｉｅｅ ｒｔ ｎ ｎ ｅ ｔ ｇ ｉｔ ：ｒａ ｔｉ ｔｎｉ ｉ ｅ ｅ ｓｔｃｉｅ ｉ ｂ ａｉ ａ ｒｌｕ ｃｄｏ ｎ ａ ｔｉ ｌ ａ
了为 讨异 探 丙肾 上素腺对 Ａ Ｐ分 的 抑制泌作 用 与 Ｎ
型Ｌ离子通道钙的关系 ， 一 本实验 利用 型钙离Ｌ子 通 ＿
道
ｓ ｏｅｖ ｌ ｄ Ｅ Ｆｔ ｎｌａ ｏ ［］ ｍ Ｊ ＡｙＰｉ ， ｔ ｏｋ ｅｍａ Ｃ ｒ ｃｓｔ ｎ Ｊ ．ｓｈ ｌ ｕｒ ｎ ￣ａ ｉｏ １９，６ （ ｔ ） Ｒ １ ． ９２ ２ ５ ５８Ｐ １－ ９ ２ ［ ］Ｃ ｉＬ ｅＳ ，Ｋ Ｓｍ ｔ，／ ．ｆ ｆｃ ｉ ｒｉ ｎ — ｄ４ ｕ Ｘ ， Ｊｅｉ ｅＺａ ． Ｅ ｆ ｏ ｐ ｕｔｙａｅｙａ ｅ ｓ ｔｔ
ｌ ｅｃｃ ｓ ｃｉ ａｇｉ ｌｐ ｐｉｐｅ２ ｎ ｃｃｃ ＡＭＰ ｆ ｕ ａｙ ｌ ａ ｔｅ ｔ ｅ ｔ ｙ７ ｏ ｙ ｌ ｔ ａｖ ｎ ｏ ｄ ｉ ｅｆ ｘ ｌ
断剂阻硝苯地进行 平了实 验，结 果示单 独予硝 苯地
平可给加增胞 细内Ａ Ｐ的分 泌 量， Ｎ减 少心房出搏 量 同 ，
ａｄａｉ ｙａ ｉｃ ｐｒ￣ ｂａｉ ［ｒ ］ ｒＥ Ｐａ —ｎｔａｄ ｎｍｉ ｅｆｎｒ ｌ ｓ ｅｔｕ ｇ ａｉ Ｊ． ｕＪｈ ｒ ｔｎ ａ ｍ ｃｌ２ ００ （—），９１ ｏ，０ａ０ ４ ２１ ２ ２ ．：【 ］ 沈 建 新 和平，， 太 真． 丙肾 上 腺 素 心肌对 胞 内钙细 ５ 程 异 韩放释 肌 和 浆 内网钙容 量 的影 响［］ 脏 杂 心 志，０１ １ Ｊ． ２０ ， ６ （） １７ ：９ ３ ．［ ］ Ｂ ｔＤ ａｄ ．ｃ ｅａｃｉ －ｎ ｒ ｎｔｃｕｌｇ ［ ］ ６ ｅ Ｍ Ｃ ｓｒ ａｉｘｔｃ ｔｎｃ ｏｏ ｐ ｎ Ｊ． ｉ ｔ ｏ ａｉｏ
Ｎａ ｕ ｉｅ ２０ ４ ５： ９ ． ｒｔ， ０２， １ ８ １
时
予给异丙肾腺素 却不 能上改 变异 丙上 肾素腺 对 心
房Ａ Ｐ分泌 的抑制和 进促 生Ｎ成 的 效应， 提
［示］ Ｗ ＦｅＣ， ７ｉ ｎ Ｊ Ｘ，Ａｕｎ Ｊ ｏ，． ｉ ｉ ｔｒ ｒｅＬ ａｄ ｈ Ｓ ． １ｓ Ｄｎ ｏ ｆ－ ｃｔ ｏｌｓ ｎ
ｔＴｅ － ｐ ｙ
ｃｎａｉｌ ｇｉ ｌ ａＡ Ｐ ｒｅｓ［］ ｈｅ ｎｒ ｕｔｎｏ ａ ｌ Ｎ ｌ Ｊｅ． ｓｎｅ ａ ｏｆ ｅ ａ
异 丙肾 上 素腺 对 Ａ分 Ｐ泌 的 抑 作 用制并 非依 赖 于 Ｎ
Ａ Ｊｍ ｈｄｌ ｒｅＣ ｒＰ３ ｏ， ００ ９ ２６： ７ ． ３ ｏ Ｈ ａ ｉｔ ｈｄ ２ｌ０ ， ７（） ２Ｈ９ 囵 Ｐ ｃ ８